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野生动物学报, 2013 目的:确定毕赤酵母表达东北林蛙皮肤抗菌肽dybowskin-1ST基因的最佳诱导表达条件。方法:本研究将PCR合成的dybowskin-1ST基因克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9K中,构建pPIC9K-dybowskin-1ST诱导型表达载体。表达载体经线性化后转化巴斯德毕赤酵母GS115,应用BMMY培养基诱导表达。采用单一变量法及正交试验法,对甲醇诱导的浓度、时间和温度进行了优化,通过SDS-PAGE电泳分析和体外抑菌试验检测目的肽表达丰度。结果:最佳诱导条件:甲醇终浓度为0.5%、诱导时间为72 ...
崔绍鹏 +4 more
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野生动物学报, 2014 由于环境、气候的恶化以及疾病的侵害,全球两栖动物种群数量呈现出整体衰退的趋势,其中虹彩病毒属蛙病毒科的蛙病毒是不可忽略的原因之一。环介导等温扩增技术(loop-mediated-isothermal-amplification,LAMP)是一种新型的核酸扩增技术,具有特异性强、快速、简便等特点,本研究利用LAMP技术,开发了针对中国东北林蛙种蛙蛙病毒的快速检测方法,针对蛙病毒MCP基因设计出能特异识别靶序列上6个位点的4条特异性引物,在链置换聚合酶(Bst 酶)的作用下,62 ℃扩增30 min ...
汪 环 王思睿 王晓龙
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东北林蛙(Rana dybowskii)生殖腺及附属器官在冬眠期内的生理变化
野生动物学报, 2015 为了探索东北林蛙在越冬期内生殖器官的生理变化,本研究自2013年10月至翌年3月,每月采集雌、雄成体林蛙各10只,测定雄蛙的体重、睾丸重、脂肪体重; 雌蛙的体重、输卵管重和卵巢重,并进行测定器官的系数计算和相关性分析。结果表明:雄性林蛙睾丸的重量和系数在越冬期里无显著变化(P>0.05),而脂肪体的重量和系数自1月之后显著降低 ...
范 宁 李 梁 刘少华 彭安权 卫功庆
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Process of Extraction Protein from Selenium-enriched Lyophyllum decastes Mycelia and Analysis of Its Amino Acid [PDF]
The process of extracting seleno-protein from the selenium enriched Lyophyllum decastes mycelia cultured in a 20 L fermentor was optimized, and the effects of selenium enrichment on both types and contents of amino acids in Lyophyllum decastes mycelia ...
Huijuan GAO +8 more
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野生动物学报, 2017 为评价东北林蛙(Rana dybowskii)的耐寒性及其适应低温能力,并为其养殖、运输和暂养提供参考数据,本研究分别测定了25℃、4℃和0℃驯养条件下东北林蛙的过冷却点和结冰点。结果显示,东北林蛙过冷却点最低可达-2.6℃,最高为-1.4℃; 结冰点最低可达-2.3℃,最高为-1.2℃; 低温驯化可显著降低东北林蛙结冰点。基于本试验结果和相关文献分析表明,经过低温驯化的东北林蛙可通过升高血糖维持在-2℃左右的过冷却状态,其耐寒对策为避免冰冻; 在东北林蛙的人工养殖越冬、暂养、运输过程中,应尽量控制在 ...
杨 斌 袁一田 陈 晨 肖向红 黄璞祎 柴龙会
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野生动物学报, 2016 东北林蛙(Rana dybowskii)主要分布在我国东北部,季节性的低温环境使东北林蛙具有高效的抗冻策略,形成高浓度的葡萄糖保护剂是重要的抗冻机制之一。GLUT1是机体细胞中分布最广泛葡萄糖转运蛋白。本实验采用高通量测序技术获得东北林蛙GLUT1 mRNA片段,通过实时荧光定量PCR技术分析低温胁迫下(-1℃)东北林蛙随胁迫时间延长,其肝脏、骨骼肌、心脏、脂肪、皮肤组织中GLUT1转录水平的表达变化。结果发现,肝脏和心脏的GLUT1在低温胁迫24 h达到峰值,分别为对照组的9.17倍和5倍 ...
郭柏宏 肖向红 巩珊珊 张晶钰 柴龙会
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环境温度对东北林蛙(Rana dybowskii)体温的影响
野生动物学报, 2016 在10℃、16℃、22℃和28℃4个温度条件下,通过测量东北林蛙泄殖腔温度的方法,研究分析了东北林蛙2个不同种群在不同环境温度下的体温变化及其影响。结果表明,东北林蛙的体温随着环境温度的升高而升高,两性间体温无显著差异,但不同地理种群间体温存在一定的差异; 恒温条件下,集安种群的体温没有明显日变化节律,而伊春种群的体温存在显著的日节律变化; 伊春种群具有较低的体温和较强的体温调节能力。由此可知,环境温度是影响东北林蛙不同地理种群的体温及生理体温调节能力的主要因素之一。
孙清琳 徐骁骁 刘 鹏 赵文阁
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野生动物学报, 2016 为探究低温条件下东北林蛙(Rana dybowskii)肝脏中GSK3β基因表达量变化,需利用荧光定量PCR(Fluorescence quantitative real-time PCR)对GSK3β基因表达量进行检测,而在此过程中PCR引物的筛选直接影响到检测结果数据的准确性与真实性。本实验以东北林蛙为实验对象,基于本研究组前期获得的东北林蛙转录组数据库,并参考其他物种GSK3β基因,利用Beacon Designer 7软件设计了6对引物,采用逆转录PCR和实时荧光定量PCR技术 ...
张 宇 巩珊珊 柴龙会 张晶钰 肖向红
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野生动物学报, 2018 在黑龙江省伊春林区捕获的呈“红腿病”体征的东北林蛙(Rana dybowskii),从其肝脏和腹腔积液中分离出一致病菌株RY-1,通过对分离菌株形态特征、生理生化、16S rDNA基因序列和系统发育树等分析进行菌种鉴定,并用该菌株RY-1人工感染健康东北林蛙后观察其肝脏组织病理学变化。结果显示,菌株RY-1形态呈浅黄色有光泽的圆形、中央凸起、边缘光滑、直径为1.5～2 cm的菌落,革兰氏染色阴性,16S rDNA的系统发育树等结果分析判定为嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila ...
邵 婕 柴龙会 王伯驹 曲俐俐 肖向红
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