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目的 观察死胎肾脏组织中HBVDNA表达的情况 ,探讨通过产妇传播到死胎肾脏组织中的HBV是否存在复制。方法 采集 40例乙型肝炎产妇产下的死胎 ,常规尸检 ,取肾脏组织。采用原位分子杂交法 ,检测其中的HBVD NA ;回访产妇产前静脉血HBV的检测结果。结果 死胎肾脏组织中HBVDNA的检出率为 2 6/ 4 0 (65 .0 % )例。产妇产前静脉血HBV呈高、低和无复制状态时 ,肾脏组织中HBVDNA的检出率分别为 1 4 / 1 6(88.0 % )例、2 / 4 (50 .0 % )例、1 ...
沈玲 +16 more
doaj
目的 观察死胎肾脏组织中HBVDNA表达的情况 ,探讨通过产妇传播到死胎肾脏组织中的HBV是否存在复制。方法 采集 40例乙型肝炎产妇产下的死胎 ,常规尸检 ,取肾脏组织。采用原位分子杂交法 ,检测其中的HBVD NA ;回访产妇产前静脉血HBV的检测结果。结果 死胎肾脏组织中HBVDNA的检出率为 2 6/ 4 0 (65 .0 % )例。产妇产前静脉血HBV呈高、低和无复制状态时 ,肾脏组织中HBVDNA的检出率分别为 1 4 / 1 6(88.0 % )例、2 / 4 (50 .0 % )例、1 ...
沈玲 +5 more
doaj
目的: 探讨乙型肝炎(乙肝)病毒携带孕妇胎儿宫内感染率和乳汁中乙肝病毒( HBV)阳性率的相关性,分析研究 乙肝血清学指标阳性产妇是否适于哺乳。方法: 对 52 例乙肝血清学指标阳性的产妇, 应用酶联免疫吸附法和斑点杂交法分别 检测脐血和初乳中的HBV 标志物(HBVM)以及HBV 脱氧核糖核酸(HBV DNA) , 并对比分析。结果: 孕妇 HBV 阳性与相应的脐 血和初乳中的HBVM 阳性率以及 HBV DNA 的检出率呈高度的一致性(P >0.
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同一份血清中的HBVDNA与HCVRNA经热变性直接法一步裂解,先用针对HCV特异的外引物将HCVRNA逆转录为cDNA,然后采用HBV,HCV各自特异的2套引物进行PCR同步扩增。结果按预定大小,PCR产物出现2条带。分别为428bp,144bp。将产物转移至尼龙膜上,经α-32PdCTP标记HCV探针及地高辛素标记HBV探针进行重复杂交,证明144bp为HCV所特有,428bp为HBV特有。用该方法对30份单独检测证实HBV,HCV核酸均阳性血清测验,其结果完全吻合、该二联技术可明显缩短检测时间 ...
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研究45例慢性乙型肝炎患者的HCV重叠感染。病例均为后发抗HCV阳性的慢性HBsAg携带者,无先抗HCV阳性而后HBsAg阳性的个案,这可能反映HBV和HCV两种病毒感染的先后次序、不同传播方式及HBV对HCV易感性的增进作用。用RT-PCR检出30/45例血浆HCV RNA阳性,不仅确证HCV重叠感染诊断,还证实HCV复制及传染性。23/30例HCVRNA阳性者有输血史,提示输血是其获得HCV重叠感染的主要途迳。用PCR检出25/45例血清HBV DNA阳性,其中抗HBe阳性者的HBV ...
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采用异硫氰酸胍、柠檬酸钠、2-巯基乙醇、十二烷基肌氨酸钠作为变性裂解剂,结合水饱和酚、氯仿、异戍醇等进行快速程序式抽提血清HBV-DNA模板用于多聚酶链式(PCR)基因扩增。该提取法比一般方法简单、稳定、不易污染,抽提过程可在lh内完成。PCR应用结果表明敏感性高于地高辛素标记探针斑点杂交法。经酶切及a-32标记放射自显影鉴定PCR产物具有良好的特异性。
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以异硫氰酸胍裂解血清释放核酸使被二氧化硅吸附,经乙醇洗涤后用水悬浮,上清即含纯化DNA。结合双阶变温PCR建立一种简单快速的血清HBV-DNA检测方法。该法只需检测10ul血清,完成提取和扩增只要3h.操作很易掌握。用之检测56例HBsAg+/HBeAg+的血清、42例HBsAg+/HBeAg-的血清和54例HBsAg/HBeAg的血清,结果HBV-DNA检出率分别为86%、57%和13%。应用表明这是一种简捷有效的核酸纯化和扩增方法,适于对大量临床样本作检测之用。
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乙肝病毒PCR产物的鉴定及单项抗HBc阳性血清的HBV基因扩增
本文报道HBV基因扩增产物的限制性酶切分析和寡核苷酸探针杂交鉴定、应用血清HBVDNA的PCR扩增产物制备基因探针和单项抗HBc阳性血清的HBV基因扩增。PCR用adr、adw、ayw3种亚型HBV的C基因区共有序列为内外两对引物分单次或套式扩增,产物为66abp或428bp,两者序列中段共含-BgIⅡ酶切点并与一寡核苷酸探针同源。428bp产物被用以缺口平移标记32P探针作斑点和转印杂交检测。结合分子杂交的PCR结果从单项抗HBc阳性的8/42例慢性肝炎和2/12例无症状受测者血清中检出HBVDNA ...
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将聚合酶链反应(PCR)成份分两组。先加一组含dNTPs、引物和MgCl2,并加1粒组织切片用石蜡凝固为盖层。再加另一组反应液含待扩增模板、TaqDNA聚合酶和KCl,以与第一组反应液分隔。PCR循环时高温可使中隔蜡层融化,两组反应液相混,蜡油上浮作为防蒸发屏障。由此避免室温混合加样和预置导致引物聚体形成和错导非特异扩增,提高PCR特异性和灵敏性。作者应用这一技术检测53例单项抗HBc阳性血清,检出HBVDNA13例,检测69例HBsAg阳性和抗HBe阳性血清,检出HBVDNA61例 ...
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[Gandou Bushen decoction ameliorates ovarian injury in murine hepatolenticular degeneration via the AGE/RAGE/NF-κB signaling pathway]. [PDF]
Jiang P, Wu L, Han H.
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