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[目的]探讨内皮祖细胞修复动脉内皮损伤的作用.[方法]建立大鼠颈总动脉内皮损伤模型,16只大鼠随机等分为内皮祖细胞移植组和对照组.体外诱导大鼠外周血单个核细胞为内皮祖细胞.在动脉损伤后,将5-溴脱氧尿苷标记的内皮祖细胞注入损伤动脉段,14 d后取损伤动脉段和对侧正常动脉段.采用病理学方法、免疫组织化学和图像分析技术评价内皮祖细胞的修复效果.[结果]内皮祖细胞移植组的损伤动脉段5-溴脱氧尿苷免疫组化为阳性.内皮祖细胞移植组损伤动脉段的新生内膜厚度较对照组明显减轻(43.5±5.5)μm vs(90.7 ...
徐明国 +6 more
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目的探讨环氧化酶-2(Cyclooxygenase-2,COX-2)表达水平同单核-内皮细胞黏附性的关系及其相关机制。方法采用细胞计数法检测单核-内皮细胞的黏附性;实时荧光定量PCR检测内皮细胞COX-2mRNA表达量;Western blot检测内皮细胞COX-2蛋白表达量;ELISA检测内皮细胞前列腺素E2(Prostaglandin E2,PGE2)水平。结果内皮细胞COX-2mRNA及蛋白表达量在炎症因子TNF-α、IL-1β刺激后显著上调,并随时间变化 ...
王红艳 +5 more
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目的探讨血管壁内皮细胞中剪切型XBP1的过表达对动脉粥样硬化形成的影响。方法从产后的健康新生儿脐带获取脐静脉内皮细胞,脐静脉内皮细胞传代至第3代后,以不同浓度(10mg/L,20mg/L)的氧化胆固醇(7-酮基胆固醇,7-KC)温育脐静脉内皮细胞,应用Western Blot的方法,检测脐静脉内皮细胞中剪切型XBP1的蛋白表达水平,凋亡蛋白Caspase3的活性,应用流式细胞学的方法检测脐静脉内皮细胞的凋亡率和继发性细胞坏死阳性率。结果 随着7-KC温育浓度的增加 ...
王琼, 王俊芳, 杨燕, 陈国千
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目的将真核表达质粒pEGFP-ActivinA以脂质体介导转染人皮肤微血管内皮细胞,观察能否在细胞内表达,为进一步研究其作用奠定基础。方法pEGFP-ActivinA扩增和酶切鉴定;原代培养人皮肤微血管内皮细胞,以脂质体介导将真核表达质粒pEGFP-ActivinA转染该细胞,于一定时间内在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达,MTT法检测基因转染对人皮肤微血管内皮细胞增殖的影响。结果转染后48h在荧光显微镜下人皮肤微血管内皮细胞可见发出绿色荧光,72h发出绿色荧光的细胞增多,强度增强 ...
裴颖, 左玲, 栾永昕, 苏冠方
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目的探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)基因转染大鼠内皮祖细胞的方法,分析转染VEGF基因对内皮祖细胞生长的影响。方法分离大鼠骨髓内皮祖细胞并诱导其分化,采取FITCUEA-I和Dil-Ac-LDL双染色法验证;采用腺病毒包装VEGF165基因,按照不同比例转染内皮祖细胞后,通过荧光显微镜观察质粒自带绿色荧光蛋白验证转染效率;以未转染及转染空载体为对照;采用MTT法验证转染VEGF165基因对内皮祖细胞增殖的影响 ...
王伟 +5 more
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目的通过LPC诱导建立体外再狭窄内皮细胞模型并探讨红花黄色素对对血管内皮细胞的保护作用。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),分为:(1)正常对照组,(2)溶血卵磷脂(LPC)组,(3)低浓度红花黄色素组(50 mg/L),(4)高浓度红花黄色素组组(100 mg/L)。分别观测内皮细胞增殖、凋亡及上清液一氧化氮(NO)浓度的的变化。结果与正常对照组比较,LPC抑制内皮细胞增殖,促进细胞凋亡,降低NO浓度。红花黄色素干预LPC对内皮细胞的作用,使内皮细胞增殖增强,细胞凋亡减少,NO浓度升高 ...
韩海玲 +7 more
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[目的]探讨外源性锌指蛋白基因A20对缺氧诱导内皮细胞黏附分子CD54表达的影响。[方法]①培养原代人脐静脉内皮细胞,将细胞分组建立缺氧模型;②采用DOTAP脂质体介导pcDNA3.1EHA20质粒转染培养的内皮细胞,筛选抗G418的阳性克隆,经免疫荧光鉴定A20基因的表达;③采用免疫组化和原位杂交检测内皮细胞CD54的表达。[结果]A20基因在经G418筛选后的内皮细胞中得到高效表达。缺氧能诱导人内皮细胞CD54高表达,外源性A20基因能抑制75%以上由缺氧诱导的内皮细胞CD54表达,两者间相差明显 ...
张剑凯 +4 more
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【目的】 探讨以ES细胞源表皮样干细胞构建组织工程皮肤的方法,为构建新的组织工程皮肤奠定基础。【方法】 先把成纤维细胞放置于胶原海绵真皮支架内,体外培养2d,再放置ES细胞源表皮样干细胞,体外培养3d,观察其形态和进行免疫组化检测。【结果】 成纤维细胞与ES细胞源表皮样干细胞均在真皮支架内黏附,免疫组化表明ES细胞源表皮样干细胞仍呈Bl整合素强阳性和CK15、CK19阳性。【结论】 结果提示ES细胞源表皮样干细胞在体外构建的组织工程化皮肤内仍维持未分化状态。
程树军, 黄锦桃, 李海标
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Aβ25-35损伤对Hep-1细胞内质网分子伴侣GRP78表达的影响
目的构建阿尔茨海默病(AD)内皮细胞损伤模型,探讨β-淀粉样蛋白损伤对血管内皮细胞内质网分子伴侣含量的影响。方法体外培养内皮细胞瘤Hep-1细胞株,应用Aβ25-35构建AD细胞模型,应用免疫荧光染色,激光共聚焦显微镜下观察细胞内内质网分子伴侣含量变化。结果经Aβ25-35诱导的Hep-1AD细胞内质网分子伴侣GRP78表达增加。结论β-淀粉样蛋白损伤后血管内皮细胞细胞内分子伴侣含量上调可能为其参与AD发病的机制之一。
王艳秋 +5 more
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妊娠高血压综合征患者血清对内皮细胞CD226分子表达和PDGF黏附分子的研究
目的探讨妊娠高血压综合征(PIH)患者血清对体外培养的内皮细胞表达CD226的影响,和CD226分子与PDGF表达的相关性。方法用间接免疫荧光染色结合流式细胞术分析观察妊高征患者血清对于体外培养人血管内皮细胞表达CD226的作用以及该血管内皮细胞和活化血小板黏附后CD226表达百分率的变化,用ELISA定量检测不同条件下活化血管内皮细胞分泌的PDGF,进一步探讨CD226分子和PDGF在妊高征血管内皮损伤中的作用。结果①妊高征患者血清刺激血管内皮细胞表达CD226百分率明显高于对照组 ...
许瑞环 +5 more
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