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Zhejiang Daxue xuebao. Lixue ban, 2007 抽提小鼠R5杂交瘤细胞的mRNA，逆转录成cDNA，扩增出R5单抗的轻重链基因.分析克隆到的轻重链基因的序列信息，得到互补决定区(CDR)序列信息.构建真核表达质粒并在真核细胞中表达.采用互补决定区移植（CDR-grafting）的方法人源化鼠源单抗R5基因.先从人种系(germline)抗体基因片段中选出和克隆到的小鼠R5抗体基因具有相同互补决定区正则结构类型(CDR canonical structure class)的片段，合成寡核苷酸并采用PCR重叠延伸(overlap extension ...
YUJun-ming(余君铭) +1 more
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Developmental Medicine &Child Neurology, Volume 61, Issue 3, Page E1-E35, March 2019., 2019 目的 本国际临床指南由欧洲残疾儿童学会（the European Academy of Childhood Disability，EACD）牵头制定，旨在解决发育性协调障碍（developmental coordination disorder，DCD）的定义、诊断、评估、干预以及与社会心理方面的临床应用关键问题。 方法 本指南针对五个领域的关键问题，通过文献综述和专家团队的正式讨论达成共识。为保证指南的循证基础，以“机制”、“评估”和“干预”为检索词, 对2012年更新以来提出的最新建议以及新增的“社会心理问题”和“青少年/成人”为检索词进行检索。根据牛津大学循证医学中心证据等级 (证据水平 [level of evidence, LOE]1–4) 将结果进行分类，最终转化为指南建议。并由国际 ...
Jing Hua +6 more
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Zhongguo youzhi, 2023 可可脂类油脂富含对称型单不饱和甘油三酯，通过科学调控可可脂类油脂中的甘油二酯，可优化巧克力的调温工艺，控制其起霜行为。综述了可可脂类油脂中甘油二酯的含量与种类（包括脂肪酸饱和度、链长和位置分布），探讨其对油脂结晶行为的作用规律，进而分析其对巧克力抗霜性能的影响。在适宜含量下1,3-甘油二酯可促进油脂形成巧克力需要的Ⅴ型晶体结构，而1,2-甘油二酯则倾向于使油脂形成Ⅱ～Ⅳ型晶体结构，且作用程度受脂肪酸链长的影响。然而，高含量甘油二酯无法使油脂形成Ⅴ型晶体结构。当甘油二酯含量在3%～5%时 ...
陈昕玥，顾晓霞，王雨昕，刘周颖，朱云，金俊，金青哲，王兴国 CHEN Xinyue, GU Xiaoxia, WANG Yuxin, LIU Zhouying, ZHU Yun, JIN Jun, JIN Qingzhe, WANG Xingguo
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2022 多发性骨髓瘤（MM）是一种起源于骨髓的浆细胞恶性克隆增殖性疾病，好发于中老年人[1]，发病率逐年增加，是血液系统较为常见恶性肿瘤。大多数患者随着近些年来免疫调节剂和蛋白酶体抑制剂的临床应用后总体生存率有显著提高，患者生存质量得以改善，然而难治性和复发性骨髓瘤患者的治疗效果不尽如人意。人CD38抗原为单链Ⅱ型跨膜糖蛋白，长度为45kDa，调节细胞活化、分化和增殖[2]，通常在造血干细胞、T细胞、NK细胞和树突细胞中表达，外周血中性粒细胞和B淋巴细胞不表达，骨髓瘤细胞高量表达 ...
强新晨, 杨华莹, 邵俊良
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Veterinary Dermatology, Volume 35, Issue 3, Page 325-336, June 2024.Background – Norway spruce (Picea abies) resin‐based products are used in human medicine. A resin‐based otic rinse also could be useful in supportive care of canine otitis externa (COE), yet information on its antimicrobial effect against canine pathogens or ototoxicity is lacking.
Elina Aimo‐Koivisto +5 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2006 目的通过噬菌体展示技术构建HIV-1 p24单链抗体库,从中筛选出高亲和力的抗体基因,为进一步单链抗体表达打下基础。方法从HIV患者的血清中提取mRNA,RTP-CR扩增出HIV-1 p24基因,扩增的产物用ClaⅠ和BstxⅠ双酶切消化后,连接到同样双酶切的pIRES1表达质粒,把构建的重组pIRES1-p24质粒免疫Balb/c小鼠。1个月后,取鼠脾细胞mRNA构建出单链抗体（ScFv）cDNA文库。该文库以噬菌粒pCANTAB5E cDNA为载体,转化大肠杆菌TG1 ...
王波, 王贤俊, 温志国
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2008 目的从Tomlinson（I+J）噬菌体抗体库中筛选人源化抗HIV-Tat蛋白单链抗体（scFv）并进行鉴定。方法以HIV-Tat蛋白为抗原,通过"吸附-洗脱-扩增"过程从噬菌体抗体库中筛选特异性抗Tat蛋白单链抗体,对其进行基因序列测定,并检测其抗原结合活性。结果经过筛选,获得了1株能与Tat蛋白特异性结合的阳性克隆,经检索kabat数据库,发现其轻、重链可变区分别属于VκⅠ型、VHⅢ型。结论利用噬菌体抗体库技术可以不经过免疫制备出高特异性的人源化抗Tat蛋白单链抗体。
邵锴 +6 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2006 目的从噬菌体抗体库中筛选人源性抗人cyclinD1蛋白的单链抗体并进行鉴定。方法以原核表达并用Ni-NTA Agarose纯化的重组人cyclinD1蛋白为抗原,通过“吸附-洗脱-扩增”淘选过程从噬菌体抗体库中筛选特异性抗人cyclinD1蛋白的单链抗体,通过ELISA方法对获得抗体的特异性和结合活性进行分析鉴定。结果经过4轮筛选,获得7株能与人cyclinD1蛋白结合的阳性克隆,其中3株噬菌体的可溶性表达单链抗体能与人cyclinD1蛋白有特异性结合活性 ...
李桂英 +6 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2008 目的原核表达、纯化抗人cyclin D1人源单链抗体（AD9）并对其活性进行分析。方法将含有AD9基因片段的噬菌粒转化大肠杆菌HB2151后,IPTG诱导表达,ELISA鉴定培养上清具有与cyclin D1蛋白结合活性后,经硫酸铵沉淀,His Trap HP亲和纯化,获得抗人cyclin D1人源单链抗体（AD9）,进一步利用ELISA和Western blot对其进行鉴定和活性分析。结果IPTG诱导AD9可溶性表达,培养上清经硫酸铵沉淀和亲和纯化后,获得纯度达95%的单链抗体蛋白 ...
曹玉华 +6 more
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抗CD133单链抗体/白喉毒素DAB389融合蛋白的基因构建、表达、纯化及鉴定
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2018 目的构建抗CD133单链抗体(scFV)/白喉毒素DAB389融合蛋白,在大肠杆菌里表达,并鉴定及纯化。方法采用PCR的方法,扩增融合基因DAB389-Linker-CD133(scFV),并插入到原核表达载体pET28a中,构建了重组表达载体pET28a-DAB389-CD133,融合蛋白在BL21(DE3)中表达,表达产物经SDS-PAGE鉴定,通过Ni柱纯化目的蛋白,获得了纯度达95%的DAB389-Linker--CD133(scFV)融合蛋白。Western blot鉴定蛋白活性 ...
程金章 +7 more
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