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采用Q-Sepharose FF离子交换柱对初步纯化的Cry1Ab杀虫蛋白样品进行了多次循环精细纯化,洗脱模式为离子强度台阶梯度,流动相为Tris-HCl缓冲液加NaCl,盐浓度从0.1 mol •L-1变化到1.0 mol • L-1.结果表明,Cry1Ab蛋白在NaCl浓度为0.4 mol • L-1时从柱上被洗脱,并与杂蛋白很好地分离.色谱分离机制符合顶替色谱机制.经3次循环分离后可获得高纯度的Cry1Ab蛋白,用SDS-PAGE分析了蛋白的纯度及表观分子量,电泳胶上分离的蛋白进行原位酶切后 ...
LUANMing-ming(栾明明) +2 more
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交流特高压电力电子式可控避雷器(以下简称电力电子式可控避雷器)作为一种响应快、性能优异、可靠性高的新型可控避雷器,通过电力电子开关灵活控制避雷器可控单元的接入和退出,以动态调整避雷器整体伏安特性,大幅降低残压、深度抑制特高压系统操作过电压的目的,可取消断路器合闸电阻,提高系统经济性与可靠性。在持续运行电压下,杂散电容会引起特高压避雷器轴向电位分布严重不均,而电力电子式可控避雷器由于可控单元并联了电力电子开关而引入了固有结电容,使得避雷器非控单元电位分布进一步劣化,电位分布优化更加复杂。因此 ...
乔光尧 +7 more
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本系列研究筛选了弓形虫(Toxoplasma)速殖子表膜主要抗原(SAG1或P30)及分泌排泄抗原棒状体蛋白基因(ROPl),并将二者拼接构建复合基因(sAG1/ROP1),对其进行扩增、克隆、表达,制备真核表达质粒,接种小鼠,研究其免疫保护效应 ...
周永安 +4 more
core
DMRT/Dmrt(Doublesex and Mab-3 Related Transcription factor)是一类含有锌指样、富含半胱氨酸、能和特异DNA序列结合的DM结构域的转录因子.目前在脊椎动物中已发现8类DMRT/Dmrt基因,其中大部分成员在性腺中表达,表明这些基因可能参与了动物的性别决定与分化,此外部分DMRT/Dmrt成员还参与了体节和神经的形成等胚胎发育的过程,因此Dmrt基因家族是一类与发育相关的重要调控基因.通过RT ...
LUYi(陆怡) +4 more
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肝炎基因诊断芯片同时检测慢性乙型肝炎患者血清及肝组织HBVDNA的临床研究
目的 用肝炎基因诊断芯片同时检测乙型肝炎患者血清及肝组织中HBVDNA ,并与雅培试剂、免疫组织化学和原位分子杂交法比较。方法 用点样仪将PCR扩增的HBCDNA探针点到特殊处理过的玻片上制成基因芯片 ,对 15例慢性乙型肝炎患者的血清及肝活检组织 ,分别用基因芯片、原位分子杂交法、免疫组织化学法、雅培试剂检测HBVDNA、HBcAg、HBsAg、HBeAg .结果 15例HBsAg、HBeAg阳性的乙型肝炎血清 ,基因芯片检测均阳性。 15例肝组织标本 ,免疫组化法阳性 15例 ,原位分子杂交阳性 ...
赵伟 +5 more
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目的探索唐氏综合征(Down’s Syndrome)的快速诊断方法。方法采用细胞遗传学分析技术对35例唐氏综合征患者(包括4例羊水标本和31例外周血标本)进行核型分析。同时采用荧光定量PCR技术对35例唐氏综合征患者和371例正常对照(含32例羊水标本和339例外周血标本)21号染色体上的D21S11位点进行PCR扩增检测。其中对10例未培养的羊水细胞(4例唐氏综合征患者和6例正常对照)进行荧光原位杂交分析。将唐氏综合征患者的荧光定量PCR检测结果和荧光原位杂交检测结果与细胞遗传学分析结果进行比较 ...
尉庭华 +5 more
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荧光原位杂交( FISH)是近年应用起来的一种新的分子细胞遗传学技术。该方法具有简便、快速、安全、稳定及结 果直观等优点,目前被广泛用于细胞遗传学、产前诊断、核组成、基因定位、基因扩增和缺失的检测, 以及肿瘤生物学等领域。 本文主要综述了 FISH 技术的发展史、方法机理及其在肿瘤基础研究和临床研究中的应用。 主题词 原位杂交,荧光;肿瘤标记,生物学 ...
黄贻学 方 女燕 郭 颖
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目的探讨国内骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome,MDS)患者染色体核型及其演变和其分子遗传学特征。方法回顾性分析2000年至2009年诊断为MDS的156患者,按WHO标准进行诊断分型。常规细胞遗传学(conventional cytogenetics,CC)采用骨髓细胞24 h培养法和染色体R显带技术进行核型分析。部分病例联合应用荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization,FISH)研究其分子遗传学改变的情况。结果 ...
姜胜华 +8 more
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烧伤创面内表皮生长因子、表皮生长因子受体、C-myc三种基因表达变化的临床观察
目的为探讨烧伤创面愈合机理,了解烧伤创面内表皮生长因子基因、表皮生长因子受体基因和C-myc基因的变化,为临床治疗提供依据。方法我们对25例病人烧伤创面的不同部位应用原位杂交方法,观察表皮生长因子基因、表皮生长因子受体基因和C-myc基因在烧伤创面肉芽中心部(肉芽中心部)、肉芽与愈合皮肤的交界部(创面交界部)、愈合皮肤部位(创面愈合部)和自身正常皮肤对照部位内表达强度和分布的特点。结果同一部位烧伤创面内,表皮生长因子基因和C-myc基因在交界部表达最强;烧伤创面中心部位表达次之,烧伤创面愈合部位表达较弱;
谷廷敏 +4 more
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目的探讨建立人巨细胞病毒(HCMV)先天性感染致新生鼠肝炎模型的可行性。方法将HCMV-AD169接种至10周龄Balb/c雌雄小鼠腹腔后,随机选择配对。待雌鼠分娩后取出新生鼠肝脏,进行病毒分离、病理学检测及原位分子杂交检测。结果病理学研究结果证实,HCMV感染的新生小鼠肝组织中见点、灶状坏死,并可见巨核细胞。坏死区炎细胞浸润。核内可见偏于一端的包涵体,使细胞呈"猫头鹰眼"样,汇管区可见炎细胞浸润。局部肝脏包膜增厚。原位杂交结果显示,病毒核酸存在于受感染肝细胞内 ...
张俐, 彭丽, 李德丽, 孟繁峥
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