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山东省某地鹦鹉喙羽病病毒的全基因组序列及对SPF鸡胚的致病性探究
野生动物学报, 2019 2017年4月，山东省某鹦鹉场发生疑似喙羽病感染，鹦鹉出现异形喙和羽毛脱落，甚至急性猝死。目的：了解该地区鹦鹉喙羽病病毒（Psittacine beak and feather disease，PBFD）的流行现状、分子生物学特征和遗传变异规律，为PBFDV的防控提供参考依据。方法：收集怀疑有喙羽病病毒（PBFDV）感染的非洲灰鹦鹉的新鲜肝脏组织和羽毛样本，根据PBFDV全基因组序列设计特异性引物，从患病灰鹦鹉肝脏和羽毛组织中扩增PBFDV的全基因组序列，克隆到pMD19T载体中 ...
吴少鹏宋艳孙淑红
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2013 【目的】 比较行囊胚移植的复苏周期中,解冻后经2 ~ 3 h培养或过夜培养后移植对妊娠结局的影响?【方法】 回顾性分析本中心2010年9月至2012年10月进行复苏周期囊胚移植的523个周期资料,按照解冻后至移植前时间不同分为2组:解冻2 ~ 3 h后当天移植(0TET,n = 247)?提前1 d解冻过夜培养后移植(1TET,n = 276),对其妊娠结局进行比较?【结果】1TET组与0TET组相比移植了较少的胚胎个数(1.6 vs. 1.8,P < 0.001),获得较高的妊娠率(57.6% vs.
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, 2003 紫外线灭活的草鱼出血病病毒(GCHV)能诱导鲫鱼囊胚培养细胞(CAB)产生高滴度的干扰素并抵抗病毒入侵,其机制可能是通过诱导一组抗病毒相关基因的表达,而使寄主细胞建立起抗病毒状态.利用抑制性差减杂交技术,构建了灭活病毒诱导鱼类培养细胞基因差异表达的差减cDNA文库.从差减文库中筛选鉴定出272个差异cDNA片段,测序分析发现它们为69个基因,其中46个为已知基因的同源物,23个为未知的假定基因.已知基因包括I型干扰素信号通路的基因Statl和JakI,抗病毒基因Mx和Viperin ...
张义兵,张奇亚,徐德全,胡成钰,桂建芳
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2009 【目的】 建立携带α-地中海贫血纯合子基因人胚胎干细胞系.【方法】 收集经胚胎种植前遗传学诊断技术诊断为携带α-地中海贫血纯合子基因的囊胚,机械法分离内细胞团,用无血清培养基进行人胚胎干细胞培养,建立携带α-地中海贫血纯合子基因的人胚胎干细胞系?对所得人胚胎干细胞进行α-地中海贫血基因的DNA序列分析与全能性鉴定.
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体外构建的皮肤模型InspectskinⅠ修复裸鼠全层皮肤缺损
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2009 【目的】 探讨胚胎来源表皮干细胞构建的人工皮肤模型InspectskinⅠ修复全层皮肤缺损的作用,为构建含皮肤附属结构的检验用皮肤奠定基础65377; 【方法】 将人羊膜和BMP-4定向诱导小鼠胚胎细胞分化为表皮干细胞,采用筏式培养在体外与PHBV和成纤维细胞共培养构建组织工程皮肤,经短暂培养后移植于裸鼠皮肤缺损创面,对移植物进行形态学和免疫组织化学观察65377; 【结果】 移植物可封闭皮肤缺损,在其表面可形成复层表皮样结构,真皮部分可见大小不等的由单层或复层上皮样细胞构成的管状和泡状结构65380 ...
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, 2008 干扰素系统是鱼类抗病毒先天免疫的第一道防线。2003年,鱼类干扰素基因在斑马鱼中通过 EST 序列分析首先获得突破,然而目前对鱼类干扰素启动子研究鲜有报道。本实验室也通过同源克隆的方法,从紫外线灭活 GCHV 诱导的鲫鱼囊胚培养细胞建立的 SMART cDNA 文库中获得了鲫鱼干扰素基因 cDNA。在本研究中,利用构建的银鲫基因组 BAC
张义兵, 张奇亚, 桂建芳, 石军
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, 2007 当真核细胞面临各种外界压力时,可通过磷酸化真核翻译起始因子eIF2a的Ser51位点来调节蛋白的合成。目前发现了四种磷酸化eIF2a的丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶,分别是HRI、PKR、GCN2 和PERK。本研究通过构建紫外灭活的草鱼出血病病毒(GCHV)诱导的牙鲆囊胚培养细胞(FEC) 的SMART cDNA文库,运用同源克隆法,成功克隆鉴定了牙鲆的两个eIF2a激酶基因PoHRI和 ...
张义兵, 张奇亚, 朱蓉, 桂建芳
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2011 【目的】 建立Nestin-GFP转基因小鼠的胚胎干细胞(mESC)系，并观察其示踪ES细胞系的神经分化过程【方法】将E3.5的Nestin-GFP小鼠囊胚接种于小鼠胚胎成纤维细胞上(MEF经γ射线照射失去增殖活性)4 ~ 6 d后将自囊胚长出的内细胞团(ICM)继续培养并传代扩增 ，检测所得细胞Oct-4SSEA-1和AKP等胚胎干细胞特异性标志物的表达及在体内外向三胚层分化的能力；之后，诱导细胞向神经元样细胞及神经胶质样细胞分化，利用免疫荧光检测其标志性抗原【结果】 免疫组化可见Nestin ...
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2009 【目的】 分析经卵黄囊(YS)、胎肝(FL)和骨髓来源(BM)的基质细胞条件培养液(SCCM)诱导产生的胚胎干细胞(ES)来源造血细胞的细胞表型与功能差异【方法】 制备YS-SCCM FL-SCCM及BM-SCCM,将3种基质细胞条件培养液分别加入ESE 14.1细胞分化培养体系培养7 d,通过对分化ESE14.1细胞造血发育表面标志FLK-1Integrin-α4(整联蛋白-α4、Sca-1(干细胞抗原-1)CD34的检测体外高增殖潜能集落形成细胞(HPP-CFC)分析及体内脾集落形成单位(CFU-S)
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, 2007 以前的研究表明;紫外线灭活的CCHV能诱导鲫鱼囊胚培养细胞(CAB)产生干扰素;在此基础上建立了一个研究鱼类抗病毒免疫基因的细胞模型系统;利用抑制性差减杂交技术来研究病毒感染前后CAB细胞基因表达的变化;并通过初步筛选灭活CHV诱导鲫鱼培养细胞差异表达基因的差减cDNA文库鉴定了20多个鲫鱼干扰素系统基因;从分子水平上证实CAB细胞在受病毒感染后启动了抗病毒的干扰素反应 ...
刘庭凯, 张义兵, 桂建芳
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