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鲫Nub1基因的克隆及特征分析

open access: yes, 2010
Nub1(NEDD8 Ultimate Buster-1)是近年来发现的一种干扰素诱导表达基因,过量表达该基因能抑制细胞生长。研究通过RACE-PCR方法从产生干扰素的鲫囊胚培养细胞(Carassius auratus blastulae embryonic cells,CAB)中克隆出鲫Nub1基因。鲫Nub1全长cDNA为2298bp,编码一个由589个氨基酸残基组成的蛋白。推导的鲫NUB1蛋白具有哺乳类同源蛋白保守的结构域,包括N端的UBL结构域和C端两个UBA结构域,与已知的哺乳类包括人和小鼠 ...
孙钒, 张义兵, 桂建芳, 甘力
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鱼类培养细胞抗病毒基因差减cDNA文库的构建

open access: yes, 2003
紫外线灭活的草鱼出血病病毒(GCHV)能诱导鲫囊胚培养细胞(CAB)产生高滴度的干扰素,从而诱导宿主细胞基因表达的改变并处于抗病毒状态。提取灭活病毒诱导未经病毒诱导的CAB细胞mRNA,利用抑制性差减杂交技术,成功构建了鱼类培养细胞抗病毒基因差减cDNA文库。以鲫管家基因α-tubulin和β-actin作为差减指标,检测差减cDNA文库的差减效率分别高达2^15和2^7倍,表明经过病毒诱导后的细胞中,某些差异表达基因的富集效率也接近2^15倍。鱼类抗病毒基因差减cDNA文库的建立对快速分离 ...
张义兵, 桂建芳, 石耀华
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牙鲆热休克蛋白家族基因的克隆、鉴定及其表达分析

open access: yes, 2006
本文运用抑制性差减杂交技术,构建了灭活大菱鲆弹状病毒诱导的牙鲆囊胚培养细胞和正常对照细胞间差异表达基因的差减cDNA文库。通过构建SMART-cDNA文库并结合RACE技术,从该细胞模型系统中克隆、鉴定了10个Hsp家族基因一个鱼类蛋白质精氨酸甲基转移酶基因的全长cDNA序列和PoCctz基因的部分cDNA序列。 进一步利用Real-time PCR对11个热休克蛋白家族基因在热休克和灭活病毒诱导下的表达时序的研究表明:在灭活病毒诱导下,牙鲆Hsp基因表达特征与在热休克状态下的表达特征相似 ...
董彩文
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牙鲆eIF2α激酶基因HRI和PKR的克隆、表达及功能分析

open access: yes, 2006
当真核细胞面临各种外界压力时,可通过磷酸化真核翻译起始因子eIF2α的Ser51位点来调节蛋白的合成。目前发现了四种磷酸化eIF2α的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,分别是HRI(the heme-regulated initiation factor 2α kinase)、PKR(the interferon inducible double-stranded RNA dependent protein kinase)、GCN2(the general control nonderepressible 2 ...
朱蓉
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印记基因 XIST 和 H19 DNA甲基化水平与猪克隆胚胎发育效率关联分析

, 2021
目的 体细胞核移植(Somatic cell nuclear transfer,SCNT)在农业、生物医学等领域应用广泛,但是克隆效率太低制约了该技术的应用和推广。本研究的目的在于探究印记基因XIST和H19 DNA甲基化水平与克隆效率的联系。 方法 利用同一头猪源耳朵成纤维细胞培养获得14个细胞克隆团,分别作为供体细胞进行SCNT试验,统计比较以各克隆团为供体细胞生产克隆胚胎的囊胚率以及各囊胚的XIST和H19基因调控区的DNA甲基化水平 ...
张宁   +11 more
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脱氧雪腐烯醇(DON)对牛卵母细胞体外成熟及发育能力的影响

, 2021
本试验旨在探究脱氧雪腐烯醇(DON)对牛卵母细胞体外成熟发育的影响及其作用机制。将牛卵丘卵母细胞复合体分别在含DON浓度为0、50、250、500、1 000 ng·mL-1的体外成熟培养液中进行体外成熟,检测卵丘细胞扩展程度及第一极体排出率,构建DON毒性模型。然后,借助此模型研究DON对卵母细胞的线粒体分布及后续受精卵裂率、囊胚发育率的影响,探究DON对牛卵母细胞体外成熟及后续发育能力的影响;通过检测体外成熟卵母细胞内的氧化相关因子(ROS、GSH)水平和抗氧化基因CAT、GPx4的mRNA表达量 ...
孙欢   +17 more
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多囊卵巢综合征患者采用未成熟卵体外成熟培养技术取卵的手术配合

, 2014
目的 探讨未刺激周期未成熟卵体外成熟培养/体外受精胚胎移植术( IVM/IVF-ET )在治疗不孕症中的手术配合。方法回顾分析2010年6月-2012年8月行体外受精胚胎移植的300例患者资料,其中多囊卵巢综合征患者行自然周期IVM治疗91例。充分掌握和了解IVM的治疗方案,给予手术前、手术中和手术后的护理配合以及良好的心理干预。结果91例患者情绪均相对稳定,顺利度过IVM治疗周期。结论规范掌握未成熟卵体外培养手术过程和配合,有助于患者顺利度过IVM治疗周期。
郭军红   +4 more
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太平洋鳕(Gadus macrocephalus)亲鱼驯化培育与早期发育特征

, 2017
采捕山东威海外海黄海海域的太平洋鳕(Gadus macrocephalus)亲鱼进行驯化和培育,在人工条件下成功驯化存活野生亲鱼49尾,经短期促熟培育后,通过人工授精方式获得了多批次受精卵。对胚胎和早期仔鱼发育过程进行了观察,详细描述了从受精卵到早期仔鱼各发育时期的形态特征。结果显示,太平洋鳕成熟卵子为沉性卵,圆球形,卵径为0.9-1.1 mm,无油球。胚胎发育分为5个时期,分别为卵裂期、囊胚期、原肠胚期、神经胚期和器官形成期。在水温为9-10℃、盐度为27-29的海水中孵化,受精卵历时312 h 30
徐永江   +7 more
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TNF-α对牦牛卵母细胞 HIF -1α和 HSP 70的表达及后续胚胎发育能力的影响

, 2019
旨在研究肿瘤坏死因子(TNF-α)对牦牛卵母细胞体外成熟和对低氧诱导因子1α(HIF-1α)、热休克蛋白70(HSP70)的表达以及后续胚胎发育能力的影响。在牦牛卵母细胞体外成熟培养液中添加不同浓度的TNF-α(最终浓度分别为0、10、25、50 ng·mL-1),牦牛卵丘-卵母细胞复合体(cumulus-oocyte complexes,COCs)培养成熟后,统计其卵母细胞成熟率及体外受精后早期胚胎的发育率,采用RT-PCR扩增牦牛HIF-1α、HSP70基因,采用实时荧光定量PCR(qRT-RCR)、
许涛   +15 more
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