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人TIM-1和TIM-3 mRNA实时SYBR Green Ⅰ定量RT-PCR检测方法的建立

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2012
目的建立实时SYBR Green I定量RT-PCR检测人TIM-1和TIM-3mRNA的方法。方法从人外周血单个核细胞提取的总RNA中逆转录扩增人TIM-1和TIM-3的cDNA,将将纯化的人TIM-1和TIM-3的扩增产物分别与pMD18-T Simple载体进行连接,转化宿主菌DH5α,提取重组质粒DNA,PCR鉴定并测序分析。纯化质粒并检测260nm吸光值,确定重组质粒原液的拷贝浓度并以此制备荧光定量PCR梯度浓度标准品,进行实时荧光定量PCR实验。结果建立了TIM-1和TIM ...
陈治中   +3 more
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基于光电倍增管的高压电力设备放电检测系统的设计

open access: yesGaoya dianqi, 2009
针对目前电力设备放电紫外检测中存在的灵敏度和线性度上的不足,设计了一种基于紫外光电倍增管的放电检测系统,以C8051F120单片机为处理核心,通过数字积分定量测量放电中产生的紫外辐射功率。通过试验室和变电站内的检测试验,验证了该系统能够在站内实测中检测到放电产生的微弱紫外光并能定量反映紫外辐射的强度,从而作为判断放电强弱的依据。该系统灵敏度高,线性度好,能够应用于高压电力设备的放电检测。
黄晓博, 杨永明
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荧光定量PCR检测外周血中JAR细胞的探讨

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2000
目的 建立灵敏可靠的外周血中检出滋养细胞肿瘤细胞的方法,为早期诊断滋养细胞肿瘤的转移奠定实验基础。 方法 在已知数量的JAR细胞掺入10ml外周血中建立肿瘤细胞血行转移实验模型,荧光定量逆转录-聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)定量检测JAR细胞的 β-hCG—mRNA。结果 FQ-RT-PCR可检测到相当于1个JAR细胞表达的 β-hCG—mRNA量,但当JAR细胞被掺入10ml外周血中时,细胞数>102个方可经富集后可检测到。结论 FQ-RT-PCR是一种敏感的检测手 段 ...
郑彤彤, 吕时铭
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肾脏移植术后病人BK病毒检测的初步研究

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2005
目的研究肾脏移植术后病人BK病毒复制情况,并初步探讨其检测方法。方法肾脏移植术后95例患者尿沉渣细胞形态学检测,并通过定量PCR检测尿液和血浆中病毒核酸载量,确定是否存在BK病毒复制。结果尿沉渣形态学检测有35例发现可疑decoy细胞,14例患者的尿液病毒核酸检测呈阳性,核酸载量在4×1032×109/ml之间,5例患者的血浆中病毒核酸呈阳性,核酸载量为2×104/ml4.8×106/ml。结论形态学和血浆、尿液中病毒核酸检测,可以为临床诊断、治疗监测和预防肾脏间质性肾病提供重要的依据。
刘湘帆   +4 more
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荧光定量PCR检测HBV DNA与血清HBV标志物和preS1相互关系研究

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2005
目的探讨荧光定量PCR法检测乙型肝炎病毒(HBV)DNA与HBV血清免疫学标志(HBVM)模式,preS1之间的相互关系及临床意义。方法采用实时荧光定量PCR法(FQ-PCR)检测801例血清的HBVDNA,用ELISA方法对其免疫学标志,preS1同时进行检测。结果HBVDNA的总检出率为67·0%,preS1的总检出率为74·9%。其中,在模式HBsAg(+),HBeAg(+),HBcAb(+)中血清HBVDNA含量明显高于HBsAg(+),HBeAb(+),HcAb(+)及HBsAg ...
张峻梅   +4 more
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两种检测肺炎克雷伯菌生物膜方法的比较

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2008
目的银染法与半定量结晶紫染色法检测临床肺炎克雷伯菌株生物膜的敏感性与特异性比较。方法对经Vitek-2鉴定的150株临床肺炎克雷伯菌临床分离株进行生物膜形成实验,分别经银染和结晶紫染色,再随机挑选20株进行扫描电镜检测。结果150株肺炎克雷伯菌中银染法生物膜检出率为38.7%。其敏感性为83%,特异性100%。半定量结晶紫染色法10株菌中生物膜检出率为45%。其敏感性100%,特异性79%。两种方法的检出率无显著性差异。结论银染法和半定量结晶紫染色法均可用于生物膜的检测。
杨朵, 张正
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荧光定量PCR检测外周血中JAR细胞的探讨 附视频

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2000
目的 建立灵敏可靠的外周血中检出滋养细胞肿瘤细胞的方法,为早期诊断滋养细胞肿瘤的转移奠定实验基础。 方法 在已知数量的JAR细胞掺入10ml外周血中建立肿瘤细胞血行转移实验模型,荧光定量逆转录-聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)定量检测JAR细胞的 β-hCG—mRNA。结果 FQ-RT-PCR可检测到相当于1个JAR细胞表达的 β-hCG—mRNA量,但当JAR细胞被掺入10ml外周血中时,细胞数>102个方可经富集后可检测到。结论 FQ-RT-PCR是一种敏感的检测手 段 ...
郑彤彤, 吕时铭
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抗载脂蛋白apoB鸡卵黄抗体(IgY)的制备

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2008
目的制备抗载脂蛋白apoB鸡卵黄抗体(IgY),并观察鸡蛋黄中抗体的产量、纯度及稳定性。方法用载脂蛋白apoB免疫本地良种产蛋鸡,通过水溶法提取蛋黄中抗体IgY,Bradford法测定抗体含量,SDS-PAGE电泳检测抗体纯度,Western blot免疫印迹法测定抗体的特异性,ELISA检测热处理后的抗体活性。结果经提纯的抗体含量为7.5 mg/ml,抗体纯度达到90%,Western blot免疫印迹法证明该抗体具有高度的特异性,70℃以下稳定性良好 ...
尤昕   +5 more
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半定量PCR检测致龋性变形链球菌的技术及应用

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2003
目的 创建一种临床半定量检测致龋性变形链球菌的分子生物学方法。方法 采用靶基因与参照基因同步扩增法 ,根据变形链球菌葡聚糖酶 (dexA)基因序列 ,作者设计一对特异性引物 ,以pET2 3b质粒DNA为参照基因。对 196名儿童的唾液样品进行半定量PCR检测并进行常规培养法的对比研究。结果  196份唾液样品半定量PCR检测致龋性变形链球菌大于等于 10 5CFU/ml(每毫升菌落形成单位 )唾液的检出率为 91 3%。与常规培养计量法的对比符合率为 94 .9%。结论 ...
肖白, 刘敬忠, 王建秋, 李昌义
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一种光谱法检测油中糠醛的初步研究

open access: yesGaoya dianqi, 2014
检测变压器油中糠醛含量是判断变压器绝缘纸老化程度的有效方法。目前常用的高效液相法存在测量过程复杂、花费时间长等缺点。笔者提出一种基于光谱分析技术的简单、快捷的检测方法。研究中发现,当用光谱仪分别直接检测油样和油样萃取液,因油中BHT(抗氧剂264)的干扰,检测结果不佳。加入TBA(2-硫代巴比妥酸)作为显色剂后能排除干扰。在390 nm波长处对糠醛进行了定量分析,测定结果表明,油中的糠醛质量分数在0.1016.00 mg/L范围内与其吸光度值呈现良好的线性关系。测定精度RSD为1.47%(n=8 ...
张欲晓   +4 more
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