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四川大学学报. 自然科学版, 2002 作者通过根癌农杆菌 (Agrobacteriumtumefaciens)Ti质粒介导和基因枪法 ,将含抗除草剂Bar基因的植物表达载体 ,导入小麦幼穗和幼胚愈伤组织 .X Gluc染色检查表达载体中GUS标记基因的瞬时表达 ,并在含有除草剂Basta的培养基上进行多步筛选 .以愈伤组织为单位 ,统计GUS表达阳性频率和转化体的分化频率 .结果表明 :基因枪轰击法的平均转化率高于农杆菌导入法 ;幼穗作为受体的转化率高于幼胚 ;干燥处理有利于提高根癌农杆菌对小麦愈伤受体的浸染力 .
杨晓娟, 邓光兵, 余懋群
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Gene Cloning, Structural Prediction, and Prokaryotic Expression of Agrobacterium tumefaciens D-Psicose-3-Epimerase(根癌农杆菌D-阿洛酮糖-3-差向异构酶基因克隆、结构预测及原核表达) [PDF]
Shipin kexue jishu xuebao, 2019 D-Psicose can be converted from D-fructose catalyzed by D-psicose-3-epimerase. To realize the heterologous expression of D-psicose-3-epimerase (DPEase), the primers were designed to clone and isolate the gene.
ZHU Xingxing(朱星星) +4 more
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四川大学学报. 自然科学版, 2007 通过根癌农杆菌介导将正向和反向插入白芥防御素基因的pBI121重组质粒转入甘蓝型油菜的下胚轴,经组织培养和抗性筛选获得再生植株.PCR检测后,初步鉴定为阳性植株.
王贺一 +4 more
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四川大学学报. 自然科学版, 2002 作者用根癌农杆菌LBA4 4 0 4转化甘薯 8个品系 (该农杆菌携带有含人乳铁蛋白基因 (hLFc)的表达质粒 pCSL2 34) ,研究了转化甘薯的频率 .结果转化有效叶片 2 4 9片 ,共获得 6 5个抗性愈伤组织 ,平均转化频率为 2 6 .10 %,有 14.4 6 %的叶片发生了转化 .不同品种的转化频率有很大的差异 ,从 0～ 6 9.35 %,表明转化频率受基因型的影响很大 ,94 0 3 4是一个重要的高转化频率甘薯品系 .该研究中采用的完整叶片转化方法是一种较好的改良叶盘转化法 .
罗红蓉, 张勇为, 张义正
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甘薯(Ipomoea batatas L.Lam.)基因启动子在根癌农杆菌中的作用
四川大学学报. 自然科学版, 1998 作者曾用自行构建的启动子探针型载体ｐＳＵＰＶ４，从甘薯（ＩｐｏｍｏｅａｂａｔａｔａｓＬ．Ｌａｍ．）总ＤＮＡ中克隆到了６５个在大肠杆菌中具有启动基因表达功能的ＤＮＡ片段．现研究发现，甘薯基因启动子片段在根癌农杆菌中也具有启动基因转录的功能，其启动功能的大小与启动子片段在大肠杆菌中启动卡那霉素抗性基因表达活性呈正相关，即原来卡那霉素抗性越高的，ＧＵＳ基因的酶活性越高．利用重组子ｐＩＢ２中插入片段所做的Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交实验证实，该ＤＮＡ片段来源于甘薯基因组．
宋玉萍 +2 more
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四川大学学报. 自然科学版, 2004 作者用冻融法,将构建有盐藻3 磷酸甘油脱氢酶基因的植物高效表达载体DsGPDH导入感受态的根癌农杆菌EHA105中.叶盘法转化烟草,在含卡那霉素的MS培养基上进行选择性培养,生根率达到80%.用PCR的方法对再生苗进行了初步筛选,阳性率约为50%.对PCR阳性苗,进行RT PCR分析,证实整合到烟草基因组中的GPDH基因表达产生了mRNA.
张华 +5 more
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根癌农杆菌介导的盐生杜氏藻DsNRT2基因转化紫花苜蓿的初步研究
四川大学学报. 自然科学版, 2008 利用根癌农杆菌介导法进行紫花苜蓿遗传转化研究.将从抗逆生物盐生杜氏藻中克隆得到的DsNRT2(编码硝酸盐转运蛋白)导入紫花苜蓿"中苜一号"中,在含50 mg/L的卡那霉素的培养基上获得再生苗35株,经PCR和Southern杂交鉴定,得到7株阳性苗,表明DsNRT2基因已整合到苜蓿的基因组中.
李世林 +6 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2005 目的 在烟草中高效表达抑肽酶（bpti）。方法 克隆抑肽酶基因,以烟草叶片为外植体,通过根癌农杆菌将其导入烟草,经卡那霉素抗性筛选和PCR扩增检测基因的整合;抽提转染植株叶片中的抑肽酶,进行活性测定。结果 抗性植株整合并高效表达了抑肽酶。结论 构建的含抑肽酶基因的植物表达载体pBI1 2 1 +bpti具有正确的阅读框,并能在异源植物中表达。
耿学军 +6 more
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四川大学学报. 自然科学版, 2010 将半胱氨酸蛋白酶基因(Bncp5)cDNA序列片段正反向插入表达载体pFGC5941中,构建了RNA干扰表达载体pFGC-Bncp5-RNAi.采用根癌农杆菌介导法,转化甘蓝型油菜下胚轴.在5mg/L BastaMS培养基中筛选,PCR鉴定结果显示,获得Bncp5转基因植株28株.半定量PCR分析结果显示,半胱氨酸蛋白酶基因在转基因油菜中表达受到一定程度的抑制,表明Bncp5的干扰载体在油菜中得到表达.
安金玲 +4 more
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四川大学学报. 自然科学版, 2013 油菜耐热基因(BnTR1)克隆自油菜,编码一种E3连接酶.为验证它的抗逆功能,本研究用携带BnTR1和新霉素磷酸转移酶(neomycin phosphotransferase,nptⅡ)基因的植物表达载体pCAMBIA2301-TR1的根癌农杆菌EHA105,对多年生黑麦草丛生芽进行遗传转化.经共培养和巴龙霉素筛选培养,获得了175株抗性植株.通过PCR和RT-PCR检测,获得62株转基因植株.结果表明,外源BnTR1基因已整合到转基因植株基因组中并在转录水平上表达.初步抗旱检测表明 ...
袁晓燕, 马欣荣, 李旭峰, 杨毅
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