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以脑源性神经营养因子等干预视神经损伤大鼠视神经应力松弛特性分析
视神经损伤是以药物治疗、手术治疗,还是以糖皮质激素治疗,仍存在着较大的争议[1]。近期视神经损伤以干细胞移植治疗已在动物实验中取得了一定的进展[2]。干细胞移植治疗视神经损伤很可能成为一条崭新的途径[1]。关于以人脐血干细胞hUCBSC(human umbilical cord blood stem cells)干预治疗视神经损伤,周丹[3]以人脐血干细胞干预治疗大鼠外伤性视神经部分损伤进行了研究 ...
王玲, 李鹏, 姜琦
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摘 要:【目的】用三七总皂甙(total Panax notoginseng saponins)在体外定向诱导SD 青年鼠骨髓间质干细胞(mesenchymal stem cell , rMSC)分化为神经元样细胞。【方法】用低糖DMEM 冲洗骨髓腔, 收集骨髓细胞悬液, 接种在塑料培养瓶中。 经体外扩增、纯化, 选用第5 代后的间质干细胞进行诱导分化。用10 μg/ L bFGF 预诱导24 h, 更换成含三七总皂甙的无血清 培养基DMEM 诱导间质干细胞分化为神经元样细胞。用免疫组化SABC ...
撒亚莲, 李海标
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大鼠骨髓间充质干细胞向神经元样细胞定向诱导分化及免疫组化鉴定
目的建立体外分离、培养大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的方法,体外诱导其向神经元样细胞方向分化。方法应用细胞培养技术从大鼠股骨、胫骨中分离、纯化骨髓间充质干细胞并在体外进行培养,以形态学方法鉴定间充质干细胞,在倒置显微镜下观察细胞的形态特征,利用含10 ng/ml bFGF的LG-DMEM及含200μmol/L BHA、2%DMSO的无血清DMEM诱导其向神经元样细胞分化,并通过免疫组化方法鉴定。结果经原代及传代培养的骨髓间充质干细胞呈梭形,类似于成纤维细胞;成神经元诱导24 h后 ...
于音 +7 more
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【目的】探讨褪黑激素对体外培养新生大鼠神经干细胞分化的影响。【方法】从新生SD 大鼠室管膜下区分离依 赖碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和表皮细胞生长因子(EGF)生存的神经干细胞进行培养, 原代及子代细胞鉴定后用于实 验。实验细胞均在无生长因子而含10 mL/ L 胎牛血清条件下培养, 经褪黑激素或Luzindole 作用1 周后做免疫组织化学染色, 比较Map2 阳性细胞出现率。【结果】①依赖bFGF 和EGF 生长的神经干细胞体外呈集落样生长, 表达抗原蛋白巢蛋白 (Nestin ...
胡黎平, 谢富康, 李海标
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GAP-43在骨髓间充质干细胞向神经样细胞分化过程中表达的实验研究
目的观察生长相关蛋白-43(GAP-43)在体外培养的骨髓间充质干细胞(BMSCs)向神经样细胞分化中的表达情况以探讨其在骨髓间充质干细胞定向分化过程中的作用。方法体外培养大鼠骨髓间充质干细胞,选取第3代细胞,经流式细胞仪检测细胞表面标志物进行鉴定,并分别应用化学诱导剂β巯基乙醇(BME)和脑源性神经生长因子(BDNF)诱导BMSCs分化,观察诱导后细胞的形态学变化,并应用免疫细胞化学方法对诱导后的细胞进行鉴定、分析生长相关蛋白43、神经巢蛋白(nestin)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经丝蛋白(
王晨光 +4 more
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6-羟基多巴对 C17.2 神经干细胞毒性及NURR1基因对其保护作用
【目的】初步鉴定C17.2神经干细胞的特性并研究不同浓度6-羟基多巴对C17.2神经干细胞毒性及NURR1基因对C17.2神经干细胞的保护作用。【方法】免疫组化检测神经干细胞特异性抗原nestin,X-gal染色检测LacZ基因的表达,流式细胞仪检测剂量为0.02、0.04、0.06g/L6-羟基多巴在添加含有NURR1基因的重组复制缺陷性病毒前后诱发神经干细胞的坏死和凋亡。【结果】C17.2神经干细胞nestin抗原染色阳性,绝大部分细胞呈X-gal染色阳性,0.02g/L时6 ...
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目的观察在体外培养的经GDNF基因诱导的骨髓间充质干细胞(BMSCs)向神经细胞分化的表达。方法体外培养大鼠骨髓间充质干细胞,选取第3代细胞,应用GDNF基因诱导BMSCs分化两周,观察诱导后细胞的形态学变化,免疫荧光方法验证及鉴定神经元特异性烯醇化酶(NSE)及髓磷脂酸性蛋白2(MAP-2)的表达。结果镜下观察细胞形态学以及特异性荧光可见BMSCs向神经细胞分化明显。结论 GDNF基因转染的BMSCs在体外培养情况下可转化为神经细胞,并表达特定神经细胞标志蛋白。
顾加祥 +6 more
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摘要: 【目的】 探讨人诱导多能干细胞(hiPS细胞)在体外向外周神经元分化的能力。【方法】人诱导多能干细胞在无饲养层培养条件下维持培养,然后在神经培养基中悬浮培养分化为神经球,通过把神经球贴壁在多聚赖氨酸和层粘连蛋白包被的培养板上,利用流式分选细胞方法获得神经嵴干细胞(NCSC),通过把神经嵴干细胞在外周神经诱导培养基中诱导分化,获得外周神经元,利用免疫荧光染色的方法检测神经嵴干细胞和外周神经元的标记物。【结果】贴壁的神经球出现特征性的神经花环(Neural rosettes)结构 ...
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目的利用人诱导多能干细胞(hiPSCs)定向分化为γ-氨基丁酸能(GABA)神经前体细胞后种植到脱细胞视神经(DON)材料内,以构建出具有突触形成潜能的hiPSC源性抑制性神经网络组织。为研究与治疗修复中枢神经系统损伤提供一种新的组织工程产品。方法采用分步定向诱导和组织工程构建技术相结合的方法。将hiPSCs体外定向诱导为GABA能神经前体细胞(hNPCs)后,种植于DON材料上三维培养,在特定神经元诱导环境下,将其进一步分化为GABA能神经元 ...
彭历芝 +7 more
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【目的】对成人视网膜前体细胞进行体外分离、培养和鉴定。【方法】成人眼球 12 只,“机械分离联合酶消化法”分离出睫状上皮层的色素性细胞, 10 ng/mL 碱性成纤维细胞生长因子(bFGF) +10 ng/mL 表皮生长因子(EGF) 的无血清 DMEM/F12 培养液中培养, 并从三方面鉴定其神经干细胞特性: A. 免疫荧光染色检测神经干细胞特异性抗原神经巢蛋白 Nestin 的表达 ; B. 自我更新能力 : 原代神经球消化传代后 , 继续培养观察新神经球的形成; C. 多向分化潜能: 原代细胞培养
唐仕波, 林少芬
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