为进一步提高野生动物疫情监测、病原检测鉴定和应急防控的时效性,建立了对鸟类拭子样品直接进行禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)核酸检测鉴定的二次PCR方法。对比试验结果显示,该方法可行性较高,具有与实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qPCR)方法等同的特异性和敏感性。禽流感病毒核酸二次PCR检测方法的建立,有利于基层监测单位在缺乏病毒分离技术和qPCR等实验条件的情况下,利用现有条件,就近、及时地开展野鸟样品的禽流感病毒检测工作。
陈 光 李 勇 朱功良 张 俊 冯 伟 陈 婧彭金山 郑和松 杨国祥
doaj
高致病性H5亚型禽流行性感冒病毒血凝素单克隆抗体的制备与初步应用 [PDF]
以禽流感病毒株Ck/HK/Yu22/02(H5N1)作为免疫原,利用常规杂交瘤技术和血凝抑制试验法成功地筛选出6株稳定分泌抗高致病性H5亚型禽流感病毒血凝素的单克隆抗体(单抗),分别命名为2F2、3C8、3FC1、7C6、10HD4和13G4。经血凝抑制试验法分析,结果发现这6株单抗具有特异性高、反应性强、识别谱宽且互补等特点。基于单抗2F2,初步建立了三种H5N1病毒诊断方法,经评估证实均具有很好的特异性。由此说明 ...
夏宁邵 +9 more
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Structural basis for the wide-spectrum neutralization of H5N1 influenza virus by an antibody 13D4 with hCDR3 adaptively fitted to receptor-binding site [PDF]
H5N1病毒自1997年以来造成人类社会巨大的经济损失和社会影响,并且呈现持续性的感染与危害。目前,有效的防治药物有小分子抑制药物与预防性疫苗,但均存在着病毒逃逸现象及保护范围较小等缺陷。因此,开发新型广谱药物是一项长期且重要的研究热点。已知的,流感病毒主要抗原区是在病毒表面包膜蛋白HA和NA上,其中HA被认为是新药物开发的关键靶标。由于越来越多的跨型及型内广谱中和抗体被分离出来,人们将注意力转移至研究血凝素蛋白的广谱表位,以期设计出广谱通用型流感疫苗。 在本实验室前期研究工作中 ...
林庆山
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Studies on Preparation of Virus-like particles Containing H5 AIV HA Gene Fragment [PDF]
H5亚型禽流感病毒不仅能够感染几乎所有禽类,以其高致病性及死亡率严重危害养禽业的发展,还突破了宿主的种属屏障,直接感染人类,严重威胁了人类的生命健康,对H5亚型禽流感病毒的快速检测十分重要。PCR方法已成为H5亚型禽流感病毒快速检测的一种常用手段,目前常采用纯的核酸或灭活的病毒作为PCR检测的质控品,存在稳定性及生物安全性等方面的缺陷。构建一个稳定的具有良好生物安全性的阳性质控品具有重要的意义。 首先 ...
欧阳莹
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Preparation of a Rapid Antigen Detection Test for HA of High Pathogenic H5 Avian Influenza Virus [PDF]
2003年底至今,东南亚地区持续爆发H5N1禽流感疫情,并随着侯鸟迁移不断扩散至欧洲、非洲等地区,引起大规模禽类感染和散在的人感染事件。长期的监测结果表明,H5N1型病毒由于其变异快速、致病性强,能够感染人类,最有可能成为流感大流行的候选株。目前,检测H5亚型禽流感病毒的快速诊断试剂尚无大规模商品化的产品出现,现有的诊断方法难以满足对禽流感疫情的及时发现和控制的需要。本研究致力于研制出一种特异性针对H5N1禽流感病毒血凝素抗原的快速诊断试剂盒,并对其进行全面的性能评估 ...
王锐
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Preclinical development of freeze-drying process for anti-H5 broad-spectrum therapeutic monoclonal antibody 13D4 [PDF]
H5N1禽流感病毒(H5N1avianinfluenzavirus,简称H5N1)是一种可致人禽共患病的高致病性流感病毒,可感染鸡禽以及鼠、猴、猫和雪貂等多种哺乳类动物,人感染后死亡率接近60%,目前尚无有效的抗禽流感病毒药物。WHO推荐的流感治疗药物“达菲”对H5N1禽流感病人尽管有缓解症状的效果但不能有效治愈。单克隆抗体由于其特异性高、性质均一,在实验研究和临床检测中得到了广泛应用。临床上使用抗血清的中和性抗体进行被动免疫治疗已逐渐成为急性传染病的主要特异性治疗手段。本实验室在前期研究工作中 ...
张春华
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2013年3月在中国华东地区爆发了一场严重的人类感染禽流感疫情,导致此次疫情的病原体为一种全新的H7N9 禽流感病毒,该病毒以其对人类的高致病性及远高于H5N1禽流感病毒的传播速度而引起全球广泛关注。本文就H7N9禽流感病毒的病原学?致病的分子基础?流行病学?临床特征及防治措施等方面的研究现状进行综述,旨在了解人感染H7N9禽流感的研究进展,为人感染H7N9禽流感的有效防控提供科学依据。
江丽芳
doaj
Purification,Crystaliziation of broad spectum Anti-H5 AIV Therapeutic Mab 13D4 and Prediction of its Epitope [PDF]
高致病性禽流感(Avianinfluenza,AI)是由A型流感病毒H5N1引起的烈性传染病。近年来,该疾病随着候鸟迁徙不断向各国传播,在造成巨大的经济损失的同时,也引起了多例人感染禽流感的病例,因此,对禽流感防治手段的研究引起了广泛重视。中和单抗是防治病毒性疾病的一种很有效手段。但是由于禽流感病毒基因突变频率高,尤其以血凝素(HA)基因为最,因此针对禽流感病毒的中和单抗中和谱较窄,往往只能中和少数遗传变异亚系的病毒,这就极大限制了这些中和单抗的应用。 本实验室所制备的单抗13D4具有广谱中和活性 ...
魏旻希
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Establishment of H5 Haemagglutinin Monoclonal Antibodies Panel, Identification of Broad Reactive Neutralizing Monoclonal Antibodies and Their Cross-Protection against H5N1 Infection [PDF]
2003年以来,高致病性H5N1禽流感病毒(H5N1病毒)在禽类中的持续流行和不断发生的人类感染事件使人们担心H5N1病毒可能持续进化成引发人类流感大流行的大流感病毒株。为此,研制H5N1病毒的疫苗和抗体治疗药物成为当前应对H5N1病毒引发潜在流感大流行的研究热点,而H5N1病毒最主要的中和抗体来自于表面糖蛋白血凝素(HA),因此HA成为主要研究靶标。H5N1病毒具有高度变异性,故疫苗研制的关键是疫苗株的选择。根据分子进化树分析预测结果显示H5N1病毒HA基因已演变成至少10种不同抗原性特征的变异分支 ...
陈毅歆
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抗H5亚型禽流感病毒单链抗体在毕赤酵母中的分泌型表达和生物活性分析 [PDF]
在本实验室研制出的多株针对H5N1亚型禽流感血凝素单抗中,13D4单抗对所有H5亚型病毒均有血凝抑制和中和活性,具有特异性高、反应性强和识别广的特点,且在小鼠实验中显示了对各种代表株禽流感的感染和发病均具有良好的治疗效果。在此研究基础上,本实验通过基因工程构建含有13D4单链抗体(scFv)基因的毕赤酵母表达载体,实现目的蛋白的分泌性表达和纯化。经过竞争法和血凝抑制检测其活性,表明获得的单链抗体具有与原始鼠源抗体相近的反应活性和相同的识别表位。H5N1广谱中和单抗13D4的单链抗体的成功构建 ...
何芳萍 +8 more
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