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高致病性禽流感病毒广谱嵌合抗体的构建表达及活性研究 [PDF]
高致病性禽流感病毒高度变异且缺乏有效的治疗药物.在前期研究工作中,本课题组发现一株鼠源广谱中和单抗13D4,在动物实验中显示出对H5N1禽流感病毒具有广谱治疗效果.在本研究中,从分泌13D4单克隆抗体的杂交瘤细胞株中抽提总RNA,经RT-PCR扩增出轻重链可变区DNA序列,并分别与人IgG1的轻重链恒定区基因序列拼接,构建人-鼠嵌合抗体.筛选出稳定表达嵌合抗体的CHO细胞株,从培养上清中纯化出嵌合抗体.竞争Elisa结果表明,嵌合抗体与鼠源单抗能够识别同一个抗原表位并具有相似的亲和力 ...
傅雅娟 +8 more
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【目的】 建立H5N1禽流感病毒感染BALB/c小鼠的疾病动物模型.【方法】 将100 μL H5N1禽流感病毒 原液(ELD50为10-9/0.2 mL)鼻腔接种BALB/c小鼠,设正常尿囊液组对照,接毒后14 d内每隔24 h观察一次,主要观 测指标有:临床症状?体质量和体温变化?死亡率、病理变化、病毒分离。【结果】 被感染的BALB/c小鼠的病程可以 划分为前驱期(1 ~ 2 d)、发作期(第3 ~ 7 天)、恢复期(第8 ~ 14天),发作期接毒小鼠出现各种严重的临床症状,表现出极度消瘦 ...
doaj
Expression and Construction of Yeast Expression Vector of LBM2eHBc+ gene in P.pastoris [PDF]
禽流感病毒一直是家禽和家畜健康养殖的巨大威胁,之前的研究表明,原核系统中表达的lTb和M2EHbC+融合基因的产物能有效诱导免疫动物对禽流感病毒M2E多肽产生特异性的粘膜免疫应答.酵母作为生物反应器应用于生物制品生产具有独特的优点.本研究构建了PPIC9k-lbM2EHbC+酵母表达载体并对酵母gS115进行了遗传转化,甲醇诱导表达结果表明lbM2EHbC+融合基因在酵母细胞中得到表达,表达出的融合蛋白能够被M2抗体识别.Avian influenza virus(AIV) has been a ...
张国广, 张辉煌, 董美, 陈亮
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Preparation, Characterisation and Primary Application of a Panel of MAbs against Haemagglutinin of High Pathogenic H5 Avian Influenza Virus [PDF]
高致病性H5N1禽流感病毒自1997年在香港首次爆发并致死六人后,2003年底至今又在东南亚和中亚地区持续大规模爆发,除造成63人感染并死亡外,其造成的危害还严重打击了相关各国的农业经济,造成国民经济的惨重损失。世界卫生组织已向世界各国发出警告,指出H5N1病毒将最有可能成为下一次流感大流行的候选病毒株,并已开始组织世界各国参与到“大流感应对计划”中来。而当前全球流感应对计划的三大环节中最为薄弱的一环正是特异性快速诊断试剂的开发及生产。显然,开发出方便、快捷、实时的H5型流感病毒快速诊断试剂 ...
陈毅歆
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流式细胞术检测HPAIV感染小鼠外周血白细胞表面CD54及其受体的表达
目的研究外周血白细胞表面CD54及其受体CD11 b/CD18在小鼠高致病性禽流感病毒(HPAIV)感染中的作用。方法18-20 g普通健康昆明小鼠60只,随机分为实验组(HPAIV)和对照组,应用荧光标记的抗小鼠CD54CD11 b、CD18单抗,采用全血直接免疫荧光流式细胞术,对不同时相实验组和对照组小鼠外周血白细胞表面粘附分子(adhesion molecules,AMS)CD11 b、CD18、CD54的表达含量进行测定。结果实验组小鼠外周血白细胞表面CD11 b、CD18 ...
赵宏霞, 夏咸柱, 鲁继荣
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重组毕赤酵母高密度发酵表达H5N1禽流感病毒糖蛋白 [PDF]
在10L发酵罐中,对高致病性禽流感病毒H5N1糖蛋白HA1在重组毕赤酵母中的表达发酵工艺进行了研究。通过分批补料培养方法探讨不同培养温度、诱导温度、补料方式、微量元素等因素对菌体的生长以及重组蛋白表达和活性的影响。结果表明,菌种培养和诱导温度均为25oC时,菌体的生长、分泌表达量和与广谱中和抗体的反应活性较好;微量元素是影响重组HA1蛋白生物活性的重要因素;通过优化高密度发酵工艺,H5N1病毒糖蛋白HA1在发酵罐中的表达量比摇瓶培养提高10.5倍,达到约120mg/L ...
何芳萍 +8 more
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根据GenBank上已发表的H6N2亚型的非结构蛋白基因(NS)序列,设计一对特异性引物,成功从本实验室分离、保存的H6N2禽流感病毒分离株A/Mallard/SanJiang/151/06(H6N2)中克隆到NS基因序列。该克隆基因全长860bp,编码NS1和NS2两种非结构蛋白,与其他H6N2亚型的NS基因进行同源性比较,同源性为71.1%~97.2%,推导的氨基酸序列同源性为62.0%~94.6%。
张智明, 李晓冰, 华育平
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高致病性禽流感病毒H5N1中和抗体的单链抗体构建与活性鉴定 [PDF]
在本实验室研制出的多株针对H5N1血凝素的鼠单抗中,10F7对34株H5N1病毒株都有血凝抑制和中和活性,具有特异性高、反应性强、识别谱广的特点。通过基因工程构建10F7单链抗体(scFv)表达重组质粒,在大肠杆菌中表达并纯化scFv,经血凝抑制实验及中和实验检测其活性。结果在针对3株病毒的血凝抑制实验中,10F7scFv蛋白对其中2株H5N1病毒均显示出结合活性,而对H9毒株没有反应。在针对7株H5N1病毒的中和实验中,10F7scFv对5株病毒具有较好的中和能力 ...
夏宁邵 +7 more
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[Construction, Identification, and Expression of Lactococcus lactis-Based Recombinant Vaccine for Echinococcus granulosus]. [PDF]
Li W, Ou X, He A.
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Studies on Construction of Plant Expression Vector of Recombinant LBM2eHBc+ Gene and Tomato Transformation [PDF]
禽流感病毒一直是家禽和家畜健康养殖的巨大威胁,甚至威胁着人类的健康,人们也一直在研究各种形式的疫苗来应对禽流感病毒的威胁.番茄作为生物反应器应用于动物疫苗生产具有独特的优点,本研究优化了番茄子叶的再生体系,同时构建了lbM2EHbC+融合基因的植物表达载体并对番茄进行了遗传转化.结果表明在玉米素(zT)浓度为0.5 Mg/l时番茄子叶外植体的芽再生率达到93.33%;测序结果证明植物表达载体PbI121-lbM2EHbC+构建成功;利用农杆菌介导的转化方法获得再生抗性苗34株,经PCr检测,阳性率为75.
张国广, 张辉煌, 董美, 陈亮
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