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目的: 研究 bax 过量表达对 Burkitt 淋巴瘤细胞株细胞程序性死亡的效应及其机理。方法: 亚克隆构建可过量表 达 bax α的真核表达载体,通过脂质体转染法导入 Raji 细胞株中。PCR 及免疫荧光定量鉴定 baxα在 Raji 细胞株中的表达; 流式细胞仪检测凋亡率。结果: 成功构建pSFFV-baxα -S 和pSFFV-baxα -AS 两种质粒,转染 Raji 细胞后,测得转染 pSFFV-bax α -S 的 Raji细胞的 baxα表达量明显高于转染空载pSFFV-neo 质粒的
张清秀 朱振宇 马涧泉
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长链非编码RNAHULC沉默表达对人脑胶质母细胞瘤细胞SHG44增殖和凋亡的影响
【目的】探讨长链非编码RNA肝癌高表达转录本(LncRNAHULC)沉默表达对人脑胶质母细胞瘤细胞株SHG44增殖和凋亡的影响。【方法】实时荧光定量PCR(qRT-PCR)验证HULC沉默表达组(HULC-siRNA)及其阴性对照组(NC组)HULC的表达水平。CCK8增殖实验和平板克隆形成实验检测瘤细胞的增殖能力。细胞周期和细胞凋亡实验检测瘤细胞的周期分布及凋亡能力。【结果】qRT-PCR证实HULC-siRNA组较NC组的HULC表达量显著降低(P=0.003)。CCK8增殖实验显示HULC ...
李倩+5 more
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利用XIAP-/-成纤维细胞,检测在剔除XIAP的情况下Xaf1诱导细胞凋亡的作用,探索Xaf1诱导细胞凋亡的机制?【方法】 Xaf1诱导的XIAP-/-成纤维细胞凋亡由流式细胞DNA含量来表示,免疫荧光显微镜检测XIAP-/-成纤维细胞中Xaf1的亚细胞分布,共转染并细胞周期 DNA 含量流式细胞术检测Bcl2对Xaf1诱导的细胞凋亡的影响,细胞色素C流式细胞术检测Xaf1对细胞色素C释放的调节?【结果】 Xaf1与TNFα显著协同诱导XIAP-/-成纤维细胞凋亡,凋亡峰值27 ...
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【目的】 研究Bcl-xl基因对成人神经母细胞廇SH-SY5Y细胞毒性的影响.【方法】 将构建好的Bcl-xl基因重组真核表达载体pIRES2-EGFP/Bcl-xl转染SH-SY5Y细胞,并分为正常组、pIRES2-EGFP空质粒转染组、pIRES2-EGFP/Bcl-xl质粒转染组,利用凋亡诱导剂硝普钠(50 μmol/L)诱导各组细胞凋亡,行Hoechst33258细胞染色对比观察各组细胞凋亡情况,通过MTT法分析各组细胞存活率?RT-PCR与Western blotting检测转染后Bcl ...
杨炼红+5 more
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【目的】 探讨IgA肾病患者血清IgA1对足细胞凋亡的影响。 【方法】 Jacalin 亲和层析和Sephacryl S-200 分子筛用来纯化蛋白,单体IgA1(mIgA1)热聚合为聚合体IgA1(aIgA1), 同步化的足细胞与患者和健康对照来源的aIgA1共培养,流式细胞仪评价细胞凋亡情况,Real time PCR 检测Bcl-2, Bax, Fas and Fas-L mRNA表达情况。 【结果】 IgAN患者的aIgA1可诱导足细胞的凋亡,其凋亡率显著高于对照组[(30.5 ± 5.4 ...
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miR-133b在甲基苯丙胺诱导PC12细胞凋亡中的调控作用
【目的】探讨小分子非编码RNA 133b在甲基苯丙胺(MA)导致神经元毒性损伤中的表达变化及其对神 经细胞凋亡的调控作用。【方法】培养PC12细胞,分为对照组和MA处理组。应用800 μmol/L MA处理PC12细胞建 立神经元损伤细胞模型,显微镜下观察PC12细胞突起变化,采用Hoechst33342/PI双染色检测细胞凋亡变化;采用实 时荧光定量PCR(Real time-PCR)技术检测miR-133b的表达水平变化;并进一步对miR-133b进行功能分析,分别转 染miR ...
刘海莉+4 more
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【目的】探讨他莫昔芬(TAM)对C6胶质瘤细胞凋亡的影响及其可能的作用机制。【方法】①TAM经不 同浓度、不同时间处理C6胶质瘤细胞后,用台盼蓝染色法检测细胞死亡现象,DAPI组化染色观察凋亡细胞核形 态,DNA阶梯法和FACS检测细胞凋亡,Westernblot法分析PKCα磷酸化水平。②PKCα特异性抑制剂Go6976与 TAM联合处理C6胶质瘤细胞后,DNA阶梯法和FACS检测C6胶质瘤细胞凋亡。【结果】①TAM能诱导C6胶质瘤 细胞死亡,且与TAM浓度、TAM处理时间呈正相关 ...
武慧姣+3 more
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