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源于水母 (Aequoreavietoria)等海洋无脊椎动物的绿色荧光蛋白 (greenfluorescentprotein ,GFP)是一种极具潜力的标记物。其内源荧光基团在受到紫外光或蓝光激发时可高效发射清晰可见的绿光 ,且荧光性质稳定 ,与现有的标记物相比 ,GFP具有无可比拟的优势。因而自GFP被发现以来 ,一直作为一个监测完整细胞和组织内基因表达及蛋白定位的理想标记。广泛应用于转基因动物的研究、融合标记、基因治疗、蛋白在活细胞内功能定位及迁移变化 ,病原菌侵入活细胞的分子过程等 ...
倪培华, 温惠萍, 王丹艺
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目的在大肠杆菌中以可溶性形式表达鼠源性α-1,3-半乳糖基转移酶的催化结构域(α1,3 GTcd;catalytic do-main ofα1,3GT),利用其在人消化道肿瘤细胞表面构建α-gal表位(Galα1-3Gal-β1-4GlcNAc-R),拟用来制备一种新的自体肿瘤疫苗。方法利用pET-15 b载体以可溶性形式表达鼠源性α1,3 GTcd,利用高效液相色谱阴离子交换柱检测酶的活性。通过其在人不同消化道肿瘤细胞表面构建α-gal表位,先与人血清孵育,FITC标记的羊抗人的IgG为第二抗体 ...
张睿, 迟宝荣, 朱学伟
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呼吸道感染(RTI)是一种常见病、多发病、高居门、急诊就诊患者人数的首位[1]。据统计,我国每年有近5亿人感染呼吸系统疾病,7岁以下儿童平均每人每年患急性RTI203-4次[2]。在治疗RTI时使用频率最高、用量最多的药物是抗生素,该药物的出现大大降低了RTI感染患者的致死率,使众多患者健康得到了保障,延长了人类平均寿命。然而,随着时间的推移,临床和患者自行滥用抗生素,逐渐导致菌群失调,耐药致病菌株不断增多,如:MRSA、ESBL、SSBL、VRSA、VRE等超级细菌。耐药致病菌感染已经成为除癌症 ...
张艳, 张平, 胡顺勇
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具核梭杆菌诱导葡萄糖转运蛋白4 高表达在食管鳞癌组织中的临床意义及预后价值
【目的】分析食管鳞癌患者癌组织中具核梭杆菌(Fn)对葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)的诱导效应与临床病理特征及5 年生存期的相关性,并探讨其临床意义及预后价值。【方法】选择2014 年1 月到2015 年3 月安阳肿瘤医院手术切除的96 例食管鳞癌患者癌组织石蜡包埋标本为研究对象,采用RNAscope 及免疫组织化学方法分别检测食管鳞癌癌组织中 Fn 感染及GLUT4 的表达情况,并分析 Fn 对GLUT4 的诱导效应,及其与临床病理特征相关性;采用 Kaplan-Meier 生存分析法绘制生存曲线并利用
刘怡文, 梁梦夏, 周福有
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目的探讨组织胺对肠黏膜屏障的保护作用。方法从颈静脉插管放血加十二指肠灌注大肠杆菌制成失血感染模型。观察组织胺作用0.5,1,2,3 h后侵入肝脏和肠系膜淋巴结(MLN)大肠杆菌数,免疫球蛋白IgA分泌量。结果组织胺作用0.5,1,2,3 h,侵入肝脏大肠杆菌数分别为1 523,480,153,76个。侵入MLN大肠杆菌数分别为2806,763,264,140个,对照组肝脏和MLN大肠杆菌数分别为1 368,2 683,组织胺作用1 h后的实验组与对照组相比均具有统计学意义 ...
郝彦开, 冯丽英, 王军民
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目的观察组织胺对肠黏膜免疫分泌的调节作用。方法从十二指肠灌注大肠杆菌制成单纯感染模型,从颈静脉插管放血加十二指肠灌注大肠杆菌制成失血感染模型。大鼠随机分为假手术组、单纯感染组、失血感染组和1×10-6mol/L浓度的组织胺对以上各组的干预组共6组。组织胺干预组分别用1×10-6mmol/L的组织胺对制成的模型大鼠进行肠内灌注。观察模型大鼠免疫球蛋白IgA分泌量。结果1×10-6mmol/L组织胺干预组肠道IgA分泌量较失血-感染组也明显增多 ...
郝彦开, 冯丽英, 王军民
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实验性阿尔茨海默模型大鼠海马内病理和PCNAmRNA表达的变化及rLent/NT4-NAP对其的影响
目的探讨实验性阿尔茨海默病模型大鼠脑内海马光镜下的变化和DNA修复蛋白PCNAmRNA表达的变化,进一步探讨神经保护肽慢病毒rLent/NT4-NAP(NAP)对其具有神经保护作用机制。方法选择无菌级雄性大鼠Wister大鼠40只,随机分为对照组,假手术组,阿尔茨海默(AD)模型大鼠组,rLent/NT4-NAP(NAP)组,每组10只。建立Aβ1-40联合应用转移生长因子β1(TGFβ1)注入实验大鼠左侧海马区制备阿尔茨海默动物模型,通过HE染色观察各组大鼠海马区的形态学改变 ...
白晶, 房绍宽, 张影, 周春奎
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【目的】 探讨肾移植术后侵袭性曲霉菌感染的诊断和治疗方法? 【方法】 回顾性分析了肾移植术后3例侵袭性曲霉菌感染患者的临床资料,结合文献复习对侵袭性曲霉菌感染的诊断和治疗方法作出总结? 【结果】 3例患者的原发感染部位均为肺部,其中1例并发中枢神经系统感染,1例并发鹅口疮,1例并发肝脏感染;1例在先后使用氟康唑和伊曲康唑治疗14 d后死亡;另两例在使用伏立康唑?粒细胞集落刺激因子?停用免疫抑制剂以及结合手术切除局部病灶等综合治疗后取得良好效果;其中1例在肺部病灶局限后实行肺叶切除后痊愈 ...
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人类精液中可能存在各种微生物,人工授精引起生殖道感染已有报道,要实现更高一级的授精技术,如宫腔内授精,配子输卵管内移植,体外授精等必须从细菌学角度去证实精子经过处理后不含任何引起盆腔感染的微生物。作者收集20例不孕妇女的丈夫与有生育能力的健康供精者精液标本,按工作习惯分随意收集与注意清洁处理的特定收集两组,比较洗精处理前后定量细菌培养菌落数。培养结果,洗精处理前,除特定收集精液标本2份需氧与厌氧菌阴性外,其余18份需氧与厌氧菌均为阳性,每份标本阳性菌落数范围1~4个,总菌落数40,菌落计数均>10 ...
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【目的】构建人resistin基因原核表达载体并观察其表达,为开展对resistin的研究打下实验基础。【方法】酚氯仿一步法从一位2型糖尿病合并胆管癌患者腹壁皮下脂肪组织抽取总RNA,RT-PCR法扩增出re-sistin基因cDNA,经测序后,PCR产物亚克隆入T载体,用EcoRI和KpnI分别酶切重组T质粒和原核表达载体pGENKS,然后resistin基因片段和表达载体通过T4DNA连接酶进行定向连接,用核酸内切酶EcoRI、KpnI酶切和测序方法鉴定出重组表达质粒 ...
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