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Clinical assessment of the mutations detection in drug-resistant tuberculosis by melting analysis based real-time PCR [PDF]
本文主要包含两个部分,第一部分建立了一种磁珠法提取结核分枝杆菌核酸的方法,并对其进行优化,证明了其有效性。第二部分通过检测临床标本,对荧光PCR熔解曲线法检测结核分枝杆菌耐药突变试剂盒进行了较全面的评估,阐述了该试剂盒在临床应用中的优缺点。 结核分枝杆菌的细胞壁厚,难以破裂,同时,结核病患者的痰液中含有大量的呼吸道分泌物及粘蛋白等成分,这些因素对结核分枝杆菌核酸的提取带来了不利影响,直接影响了后续的快速诊断。我们建立了一种利用磁珠进行吸附的提取方法,通过加热和裂解液对结核分枝杆菌进行破壁 ...
崔文彬
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结核感染T细胞检测(T-SPOT.TB)应用于结核诊断的临床意义
由结核分枝杆菌(mycobacterium tuberculosis,MTB)感染所引发的结核病是全球人民都必须重视的疾病。根据相关数据,全世界有将近三分之一的人感染了结核分枝杆菌,并且每年大约有两百万人死于结核[1]。早在2000年,国家卫生部第4次结核流行病学调查中显示,我国全年龄组结核分枝杆菌(MTB)感染率已达到44.5%,全国大约有5 ...
范伟光 +4 more
doaj
在被圈养的4只四爪陆龟(Testudo horsfieldii)中,发现了全身性非结核分枝杆菌(nontuberculous mycobacteria,NTM)病。症状表现为厌食、虚弱和嗜睡,后肢和尾巴发炎和水肿。对患病个体,通过穿刺获得血样和关节抽吸物用于评估。对死亡个体,通过尸检、组织病理学观察以及细菌培养和聚合酶链反应(PCR)进行分枝杆菌检测。结果表明:血液学和血液生化分析结果不一致。在关节抽吸物中,观察到具有吞噬细菌结构的单核细胞,抗酸染色表明存在耐酸细菌。在肝、肺、脾、心脏、肌肉 ...
陈谭子芃植广林单芬黄润基
doaj
Molecular beacon probe melting curves analysis for rapid screening of Ethambutol drug resistance in Mycobacterium tuberculosis clinical isolates [PDF]
本论文发展了一种利用改良分子信标的熔解曲线分析技术对肺结核的乙胺丁醇耐药和多药耐药突变进行快速筛查的方法。应用该方法完成了84份结核分枝杆菌培养标本和23份痰标本的检测。标本由厦门市疾病防治控制中心、深圳市慢性病防治中心、北京大学医学院提供。结果证明该体系能够检测出单拷贝的结核分枝杆菌基因,并且能识别不同的碱基错配的情况,从而筛选出突变类型。所有野生和突变的检测结果均通过DNA测序验证。本系统对结核分枝杆菌的检测特异性达到100%。如果本方法能够应用于对耐药病人的治疗 ...
NABAGOU Yenhame
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目的确定杂交信号放大方法(HSAM)检测结核分枝杆菌的灵敏度和特异性,进而探讨该方法用于检测临床标本的可行性。方法HSAM法检测合成的IS6110靶基因、结核分枝杆菌标准菌株、大肠埃希菌和表皮葡萄球菌,确定该方法的灵敏度和特异性,并与PCR法进行比较。结果HSAM最少能检测到10合成的靶基因和结核分枝杆菌,与PCR方法灵敏度相近,标准菌株检测结果阳性,大肠埃希菌和表皮葡萄球菌均为阴性,该方法具有较高的特异性。结论HSAM具有高灵敏度、高特异性及操作简便快速等特点,可作为结核分枝杆菌临床标本检测方法。
王海河, 赵春燕, 李凡
doaj
A new Diagnostic Test for Detecting Infection of Mycobacterium Tuberculosis based on in vitro IFN-γ Release Assay by Whole Blood Culture: its Establishment and Primary Application [PDF]
结核病是由结核分枝杆菌(mycobacteriumtuberculosis,MTB)感染所致的以呼吸系统感染为主的慢性传染病,严重威胁着人类健康。目前结核病呈现出扩大蔓延的趋势。统计显示,全球1/3的人感染过结核分枝杆菌,但现有的用于诊断结核感染的方法都存在或多或少的缺陷,突出问题是灵敏度、特异性低下。因此需要一种新的诊断技术以袮补现有方法的不足。 结核分枝杆菌感染人体后能激活机体免疫系统,产生针对结核分枝杆菌的效应性T淋巴细胞和记忆性T淋巴细胞,当这些特异性T淋巴细胞再次遇到结核分枝杆菌抗原时 ...
林春鑫
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目的分析吉林省耐多药结核分枝杆菌临床分离株rpoB、katG基因突变特点,为建立本省快速耐多药检测方法提供参考。方法对吉林省耐多药结核分枝杆菌菌株扩增rpoB、katG基因测序后比对分析。结果耐多药结核分枝杆菌rpoB、katG基因的突变率分别为83.53%和70.6%,突变类型包括点突变、联合突变和缺失。在rpoB基因中,82.30%突变发生在RRDR区域,最常见突变位点为rpoB 531、rpoB 526、rpoB 516。KatG基因突变率为70.6%,最常见突变位点为katG315 ...
张炜煜 +4 more
doaj
Investigation on binding ligands of hRKIP and recombinant preparation of Esp proteins from M. tuberculosis [PDF]
1、人Raf1激酶抑制蛋白(hRKIP)可以通过其保守的配体结合口袋结合Raf1激酶,从而抑制细胞中的MAPK(Ras/Raf1/MEK/ERK)信号通路,这对于细胞正常的增殖及分化起着至关重要的作用。最近的研究表明,人类许多疾病都与hRKIP的异常表达有关,因此,hRKIP抑制剂或激动剂方面的研究有助于设计和开发新的药物来治疗hRKIP相关疾病。 在本实验室的前期工作中,已经从DrugBank药物库中虚拟筛选到三个能够与hRKIP相结合的小分子药物,分别为普仑司特,氯法齐明和苯唑西林 ...
孙涛
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目的探讨结核分枝杆菌km基因突变的情况。方法通过传统梯度药敏试验和聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)分析248株分枝杆菌临床分离株耐药情况和km基因的变化。结果药敏试验耐药率为32.7%(81/248),248株分枝杆菌临床分离株的16S rDNA SSCP电泳图谱均与结核分枝杆菌标准株相同。81株耐卡那霉素分离株中,24株(29.6%)km基因SSCP泳动异常。结论其部分耐药原因可能是由于T.M耐KM药物的km基因突变所致。
王金河 +4 more
doaj
荧光PCR探针熔解曲线法检测结核分枝杆菌耐利福平突变研究 [PDF]
目的对荧光PCR熔解曲线法检测结核分枝杆菌耐利福平突变方法进行临床研究,评价检测能力及在国境口岸的应用价值。方法应用荧光PCR熔解曲线法检测结核病人临床分离结核分枝杆菌,以传统药物敏感性试验为标准,获得该方法的灵敏性、特异性。结果对347例结核病人临床分离培养样本,传统药物敏感性试验检出271例利福平敏感标本,76例利福平耐药标本。荧光PCR熔解曲线法检出269例利福平敏感标本,78例利福平耐药标本,灵敏性为93.42%,特异性为97.42%,符合率为96.54%。结论荧光PCR熔解曲线法检测速度快速 ...
李庆阁 +4 more
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