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绿色荧光蛋白基因 gfp 真核表达载体 pcTKGFP 的构建
目的: 构建携带绿色荧光蛋白基因( gfp)的真核表达载体 pcTKGFP,为利用绿色荧光蛋白标记在实验动物体内进 行自杀性基因治疗的研究和转基因动物打靶载体的构建提供基因材料。方法: 采用 PCR 技术从商品质粒 pEGP -C1 中扩增出 gfp( 799 bp) ,PCR 产物用 XbaⅠ和 BamH Ⅰ双酶切后定向克隆至真核表达载体 pcTK, 重组质粒 pcTKGFP 用限制性内切酶和 DNA 序列分析进行鉴定。结果: 部分 DNA 序列分析证明 PCR 产物为 gfp, 成功筛选到携带 ...
doaj
单纯疱疹病毒胸苷激酶与绿色荧光蛋白基因 真核共表达质粒的构建
【目的】 构建含有人巨细胞病毒(CMV)调控表达的单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-tk)与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因真核表达质粒pCMV-TK-IRES-EGFP。【方法】 设计HSV-tk cDNA的特异引物,PCR扩增获得HSV-tk基因序列, 将PCR产物进行T载体克隆获得重组质粒pMD18T-TK,测序分析选定序列正确的克隆提取质粒,用限制性内切酶SalⅠ和BamHⅠ分别酶切pMD18T-TK和pCMV-IRES-EGFP质粒,将HSV-tk基因定向亚克隆至pCMV-IRES-EGFP载体,
doaj
目的调查青少年抑郁障碍患者非自杀性自伤(NSSI)行为的情况,分析相关影响因素,为NSSI的防治提供理论基础及参考。方法选取95例青少年抑郁障碍患者,根据DSM-5关于NSSI的诊断标准,将患者分为伴有NSSI行为组(NSSI组)和不伴有NSSI行为组(nNSSI组)。采用青少年非自杀性自伤行为问卷(ANSAQ)、抑郁自评量表(SDS)、焦虑自评量表(SAS)、简易应对方式问卷(SCSQ)、亲密关系体验-关系结构量表(ECR-RS)、儿童期创伤问卷简表(CTQ-SF)对患者进行评估 ...
苗懿 +5 more
doaj
最优化细胞因子诱导杀伤细胞/自然杀伤细胞 少因子培养体系的探索
【目的】 尝试使用IL-2、IL-7和IL-12的单因子双因子和三因子组合进行杀伤细胞/自然杀伤细胞(CIK/NK)细胞扩增培养,探讨最优化CIK/NK细胞少因子培养体系的建立方法】 采用Ficoll-Hypaque法分离脐血单个核细胞并分成6组,每组分别加入IL-2(80 ng/mL) IL-7(40 ng/mL)及IL-12(40 ng/mL)的单因子双因子和三因子组合(IL-7组;IL-12 组;IL-7+IL-12组;IL-2 + IL-7组;IL-2 + IL-12组;IL-2 + IL-7 +
doaj
8-Br-cAMP联合HSV-TKGCV治疗舌鳞癌移植瘤的研究
(目的]探讨8-Br-cAMP联合单纯疮疹病毒胸昔激酶基因(HSV-TK)币了氧鸟旮(GCV)对舌鳞癌移植瘤的治疗作用。【方法]舌鳞癌Tca8113细胞接种于28只裸鼠右侧腋下,随机分成4组进行治疗:对照组,8-BrcAMP组,HSV-TK/GCV组,8-Br-cAMP联合HSV-TK/GCV组;观察肿瘤的生长状态、计算抑瘤率和群体倍增时间;观察肿瘤的组织病理学及超微结构改变。【结果]与对照组比较,8-Br-cAMP和HSV-TK/GCV单独应用时肿 瘤的生长明显受到抑制(P
doaj
【目的】 观察骨髓MSC联合NK细胞输注对小鼠异基因骨髓移植后aGVHD的影响,初步探讨其作用机制?【方法】 分离C57BL/6小鼠骨髓细胞,体外培养MSC;取C57BL/6小鼠脾脏细胞,磁珠分选NK细胞;建立C57BL/6→BALB/c小鼠异基因骨髓移植模型,接受移植小鼠随机分为4组,每组10只小鼠,MSC和NK细胞移植组,MSC移植组,NK细胞移植组和培养基对照组?根据aGVHD分值,肝?脾?小肠aGVHD病理损害和平均存活时间,评价aGVHD的程度?ELISA法检测小鼠血清中IFNγ和IL ...
doaj
由于临床治疗剂量对正常组织造成严重损伤,使得放疗存在一些不足。刚刚兴起的肿瘤基因治疗同样存在一些弊端,如对肿瘤组织缺乏特异性,治疗基因表达水平有限,有潜在的生物危险性等。在一定程度上,辐射靶向诱导自杀基因和p53基因及p53靶基因靶向基因治疗可弥补以上两种疗法的不足。该治疗方法不仅可以弥补单独放疗或单独基因治疗的不足,而且可在降低各自治疗剂量的基础上提高疗效。目前已有几种符合要求的表达载体进入临床试验 ...
刘兵,张红
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一种自动合成并可靶向释放的抗癌药物的方法,其特征在于:所述药物使用作为运算介质的生物分子,通过生化反应,对与癌症相关的各种基因之一或其组合的表达情况进行计算,并在计算结果符合要求时,自动合成并靶向释放有效的抗癌药物:完整的自杀基因;在其所述的计算过程中,所述作为运算介质的生物分子具体是DNA分子和/或酶。本发明首次提出一种新型的应用于癌症治疗的能够自动合成并可靶向释放的抗癌药物及其制备方法,在条件成立时合成并释放功能性的药物:完整的自杀基因。该方法与纳米技术和微加工技术相结合,有助于提高癌症的靶向治疗 ...
于浩, 张宇, 林炳承, 秦建华
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基于微流控芯片的能自动合成的抗癌药物的制备方法:使用作为运算介质的生物分子,通过生化反应,对与癌症相关的各种基因之一或其组合的表达情况进行计算;计算结果符合要求时自动合成并靶向释放抗癌药物:完整的自杀基因。作为运算介质的生物分子是DNA分子和/或酶;所述制备方法的载体为微流控芯片:具体分为输入单元、计算单元和输出单元共三个功能单元;三个单元之间液体流路顺序联接,并在电场作用下可以形成特定物质的定向移动控制。本发明首次提出一种基于微流控芯片的能自动合成的抗癌药物的制备方法 ...
于浩, 张宇, 林炳承, 秦建华
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[Adolescent depressive disorder: prevalence, risk factors, current status of diagnosis and treatment, and challenges]. [PDF]
Cong EZ.
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