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Effects of Jiangu Granules on the proliferation of osteoblasts through G_1/S phase cell-cycle regulated proteins [PDF]
目的观察健骨颗粒对成骨细胞G_1/S期调控的影响,探讨健骨颗粒促进成骨细胞增殖的作用机制。方法制备健骨颗粒血清组、模型血清组和雌二醇血清组。采用酶消化法培养SD大鼠成骨细胞,健骨颗粒含药血清干预,以模型血清和雌二醇血清为对照。运用流式细胞术检测成骨细胞增殖周期,荧光定量PCR法检测成骨细胞G_1/S期调控蛋白Cyclin E、CDK2、p21和转录因子E2F-1 m RNA的表达。结果 15%的雌二醇血清与健骨颗粒血清干预48 h,成骨细胞增殖速度均明显快于模型血清组 ...
吴银生 +6 more
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Molecular Detection of Angiostrongylus cantonensis and Cloning and Expression of HSP70 Gene [PDF]
广州管圆线虫病(Angiostrongyliasis)是由广州管圆线虫(Angiostrongyluscantonensis)感染而引起的。作为一种新发的食源性传染性疾病,广州管圆线虫病在全球的流行都呈现出上升的趋势,对人类的威胁也越来越大。传统的广州管圆线虫检测对检测者的形态学知识背景要求高,且幼虫期形态很小,不易辨别。因此,建立一种操作简单、快速、灵敏度高的广州管圆线虫检测方法对广州管圆线虫病的防控很重要。 本文采用通用引物成功克隆了广州管圆线虫的rDNAITS序列(包括部分18S,ITS1,5 ...
刘江
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目的构建携带人肝癌细胞CDK2基因的重组腺相关病毒(rAAV)载体;方法设计能表达CDK2特异性的小干扰RNA(siRNA),构建pAKD-shRNA-CDK2重组质粒,采用磷酸钙共转染法将重组质粒pAKD-shRNACDK2、包装质粒pAAV-RC和辅助质粒pHelper共转染AAV-293细胞,采用定量PCR方法对病毒进行滴度测定;结果三质粒共转染AAV-293细胞48h后,荧光显微镜下检测到GFP绿色荧光,表明共转染成功,测定病毒平均滴度为3.56×1012v.g/ml ...
于水澜, 姜颖, 于英君, 宋高臣
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The effect of overexpressing SNX8 on the phenotype of Alzheimer’s mice [PDF]
阿尔茨海默病(Alzheimerdisease,AD)是最为常见的神经退行性疾病。神经元胞外Aβ(Amyloidβ,Aβ)聚集形成的淀粉样斑是AD的一个重要的病理特征,而Aβ是由淀粉样前体蛋白APP(AmyloidPrecursorProtein,APP)经β-分泌酶(β-secretase)和γ-分泌酶(γ-secretase)依次切割后生成的(即淀粉样蛋白途径),而APP的另一条剪切途径是α-分泌酶(α-secretase)和γ-分泌酶依次对其进行剪切,释放有神经保护作用的sAPPα ...
纪成香
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【目的】探讨采用荧光定量PCR 技术检测脑源性神经营养因子(BDNF)基因转染细胞(PcDNA3.1(+)/BDNF/ CHO)中BDNF 的拷贝数。【方法】分别以同等质量的PcDNA3.1(+)/BDNF/CHO , PcDNA3.1(+)/CHO(空载体转染细胞) 及CHO 细胞的DNA 为模板, 在PE5700PCR 仪上进行荧光定量PCR 分析。每个样本共检测30 次, 结果采用q 检验分析。 【结果】PcDNA3.1(+)/ BDNF/CHO 细胞、PcDNA3.1(+)/ CHO ...
李 影 +3 more
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Host location behavior of Aedes albopictus and Empoasca vitis: olfactory and visual effects on their orientation [PDF]
在昆虫宿主定位行为中,嗅觉与视觉究竟哪个更为重要至今尚无定论。本研究选择福建地区广泛分布、并且具有重大危害的白纹伊蚊(Aedesalbopictus)和假眼小绿叶蝉(Empoascavitis)为研究对象,以干扰害虫对宿主生物的定向通讯行为为研究思路,整合形态学、分子生物学和行为学方法试图揭示嗅觉和视觉在昆虫宿主定位行为中的作用。以期深入理解昆虫的宿主定位行为机制并为害虫防治提供新思路。研究结果如下: (1)应用RACE技术获得白纹伊蚊嗅觉共受体基因(AalbOrco)全长编码序列 ...
章旭日
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: 【目的】构建PET28a-TAT-RabGEF1重组质粒载体,在E.coli Rosetta(DE3)菌株中高效表达并纯化融合 蛋白,研究TAT-RabGEF1融合蛋白对肥大细胞的跨膜转导活性。【方法】以小鼠组织cDNA为模板,设计上游和下游 含有限制性酶切位点和TAT序列的引物,PCR扩增目的片段TAT-RabGEF1,并通过双酶切构建PET28a-TAT-Rab?
方虹仪, 邢纪斌, 罗晨芳
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目的确定低剂量力达霉素可诱导小鼠胚胎癌P19细胞分化,并探讨其可能的作用机制。方法体外培养P19细胞,分别加入力达霉素和维甲酸(retinoiacid,RA),观察细胞形态,并分别行PCR和免疫荧光染色检测巢蛋白(Nestin)和微管相关蛋白2(MAP2)的表达。Western blot检测低剂量力达霉素和维甲酸处理该细胞后Oct4的表达。分别用慢病毒Oct4和si-Oct4感染P19细胞,使其过表达和下调Oct4,观察细胞形态,并行PCR和免疫荧光染色观察Nestin和MAP2的变化。结果 ...
周娟 +5 more
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目的探索TSGF和hMAM表达指标对乳腺癌细胞外周血微转移诊断的应用价值。方法分离受检者外周血单个核细胞,TRIZOL液提取总RNA,作RT-PCR并用-βactin监控;确认的cDNA先作普通PCR扩增,再作荧光定量PCR扩增。血清作TSGF检测。结果64例标本有63例确认转录为cDNA,其中乳腺癌43例、良性乳腺肿瘤和正常对照各10例。经普通PCR后再作荧光定量PCR,乳腺癌hMAM表达阳性率为53.3%、良性乳腺肿瘤和正常对照均无阳性,乳腺癌组与良性乳腺肿瘤或正常对照组间hMAM表达有显著差异 ...
董学君 +6 more
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实时荧光定量PCR方法检测乳腺癌患者外周血中uPA基因表达水平及其临床意义
目的探讨人外周血中尿激酶型纤溶酶原激活物(urokinase-type plasminogen activator,uPA)基因表达水平与乳腺癌临床分期和转移的关系,评价其对乳腺癌辅助诊断及判断预后的临床意义。方法采用实时荧光定量PCR方法检测71例正常人和90例乳腺癌患者外周血中uPA mRNA表达水平。结果97.8%的乳腺癌病人外周血中有uPA基因表达,在正常人外周血中的表达率为40.8%;基因表达水平与临床分期和肿物转移情况相关 ...
刘俊泽 +3 more
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