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定量RT-PCR测定冠心病患者外周血中Toll样受体4的基因表达水平
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2005 目的建立检测人Toll样受体4（Toll like receptor4,TLR4）mRNA含量的实时荧光定量RT-PCR的方法,并用来测定冠心病患者外周血单个核细胞（PBMCs）中TLR4的基因表达水平,探讨TLR4基因表达水平与冠状动脉粥样硬化发生发展的关系。方法基于TaqMan荧光探针技术,构建克隆载体pGEM-T-TLR4作为定量模板,建立实时荧光定量RT-PCR方法。在GeneAmp5700型检测仪上测定了50例冠状动脉粥样硬化性心脏病患者和40名健康对照者外周血中TLR4mRNA的含量 ...
耿红莲 +6 more
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端粒酶逆转录酶启动子热点突变的ARMS-LNA-qPCR检测方法建立
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2020 目的建立一种定量检测端粒酶逆转录酶（TERT）启动子区-124bp（C/T）和-146bp（C/T）位点突变率的实时荧光定量PCR方法。方法以常规PCR扩增含有TERT热点突变位点的纯化产物作为检测标本,采用等位基因扩增阻滞原理（ARMS）的引物,并结合锁核酸（LNA）探针作为野生等位基因抑制子,建立实时荧光定量PCR的TERT启动子热点突变率检测方法（ARMS-LNA-qPCR）。在30例表观健康人确定检测下限。结果所建方法的突变率标准曲线为:-124bp（C/T）突变率%=10（0.262×ΔCt ...
张洁, 李方, 齐长海, 梁国威
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2023 目的 分析质谱快速鉴定法、选择肉汤培养后涂平板法、实时荧光PCR法和胶体金免疫层析法在孕妇B群链球菌(GBS)定植筛查中的应用效果。方法 同时采用质谱快速鉴定法、选择肉汤培养后涂平板法、细菌培养法、实时荧光PCR法和胶体金免疫层析法对278例孕35-37周孕妇阴道下端或肛周拭子进行GBS筛查。以细菌培养法作为金标准方法，评价质谱快速鉴定法、选择肉汤培养后涂平板法、实时荧光PCR法和胶体金免疫层析法的诊断性实验性能。结果 细菌培养法阳性率9.4%,选择肉汤培养后涂平板培养法阳性率10.4 ...
周新荣 +4 more
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Adenosine Monophosphate-Activated Protein Kinase (AMPK) and Calreticulin (CRT) Genes in the Mud Crab, Scylla paramamosain: cDNA Cloning and Profiles under Low Temperature Stress [PDF]
, 2016 低温胁迫会影响生物体内多个生理过程，如能量代谢和免疫应答等；而生物体内有多种物质参与低温胁迫调节。AMP活化蛋白激酶(AMP-activatedproteinkinase，AMPK)的主要功能为促进ATP产物的积累和减少ATP的消耗，使得机体内积累大量的ATP以供生命活动的能量需要。钙网蛋白(calreticulin，CRT)主要存在于内质网和肌浆网，不仅作为细胞内质网的分子伴侣参与新生蛋白的折叠及调节细胞内Ca2+平衡，而且具有促进细胞黏附、调节免疫应答等重要作用。为探讨这2个基因在拟穴青蟹 ...
黄陈翠
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荧光定量PCR检测HBV DNA与血清HBV标志物和preS1相互关系研究
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2005 目的探讨荧光定量PCR法检测乙型肝炎病毒（HBV）DNA与HBV血清免疫学标志（HBVM）模式,preS1之间的相互关系及临床意义。方法采用实时荧光定量PCR法（FQ-PCR）检测801例血清的HBVDNA,用ELISA方法对其免疫学标志,preS1同时进行检测。结果HBVDNA的总检出率为67·0%,preS1的总检出率为74·9%。其中,在模式HBsAg（+）,HBeAg（+）,HBcAb（+）中血清HBVDNA含量明显高于HBsAg（+）,HBeAb（+）,HcAb（+）及HBsAg ...
张峻梅 +4 more
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Isolation and identification of algicidal substances produced by Brevibacterium sp. BS01 and algicidal mechanism of algicidal compound against Alexandrium tamarense [PDF]
, 2012 赤潮的控制与防治对于保证海洋环境安全和海洋生态健康是至关重要的。本论文主要研究了海洋杀藻放线菌BS01的种属关系；根据BS01杀藻活性物质的基本理化性质，分离纯化得到一个具有杀藻活性的化合物；同时探讨了塔玛亚历山大藻在BS01胞外分泌物胁迫下生理生化水平的响应；考察藻细胞死亡过程中细胞形态变化；氧化压力下藻细胞光合系统损伤情况；综合运用real-timePCR技术研究了藻细胞在杀藻活性物质作用下靶功能基因psbA、psbD、hsp、cox和cob转录水平变化。主要研究结果如下： （1 ...
安新丽
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2007 【目的】建立TaqMan实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测肝细胞再生磷酸酯酶2（PRL-2）mRNA表达水平，并应用该法检测原发性肝细胞癌中PRL-2基因的表达。【方法】构建含PRL-2基因开放阅读框架的T载体．制作标准曲线。提取手术切除12例人肝癌、门静脉癌栓（PVTT）和癌旁组织总RNA并逆转录为cDNA。应用实时荧光定量PCR法观察人肝细胞癌组织和门静脉癌栓及癌旁组织中PRL-2的表达水平。【结果】线性检测范围达5个数量级，最低检测下限为1×10^2拷贝，最高检测上限为1×10 ...
程超 +4 more
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野生动物学报, 2016 为了确定引起广东环尾狐猴(Lemur catta)呼吸困难、厌食和出血性肺炎症状的病原,从2只死亡的环尾狐猴体内无菌采集心肝肺肾组织样本。通过病原形态学观察,鉴定为弓形虫(Toxoplasma sp.)后,另外采集在狐猴笼舍出现的2只老鼠和1只猫4份组织样本。所有样本分别采用荧光定量PCR及一步法PCR技术进行弓形虫的检测与529 bp重复序列分析。以弓形虫B1基因片断为扩增对象的荧光定量PCR检测显示6份样本的CT为25.84～30.29,溶解曲线中均出现明显峰值,核酸定量峰值均大于阳性对照 ...
单 芬 李康信 徐春忠 陈 武 彭仕明 李婉萍 李国清
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Study on the Roles of Long Noncoding RNA HCAL in Hepatocellular Carcinoma [PDF]
, 2016 【背景】 原发性肝癌是最常见的恶性肿瘤之一，是我国发病率和死亡率均排名第二的恶性肿瘤。原发性肝癌中，大部分为肝细胞肝癌（简称肝癌）。虽然肝癌的诊断及手术切除、放化疗等治疗手段取得了很大的进步，但肝癌患者总体的生存率仍不理想。近年来，对肝癌的分子生物学机制进行了多方面的研究，并证实肝癌的发生发展伴随着一系列分子表达的失调及信号通路的异常。因此，从分子水平深入探讨肝癌发生发展及转移的机制，对寻找早期诊断、预测预后的生物标志物和治疗的分子靶点具有重要的临床意义。 长链非编码RNA ...
谢程融
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实时荧光定量PCR检测血清miR-7方法的建立及临床初步应用
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2016 目的建立ploy（A）聚合酶加尾的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法检测血清miR-7,并作临床初步应用。方法用Trizol试剂提取血清总RNA。miR-7ploy（A）聚合酶加尾逆转录获得cDNA,进行SYBR Green Ⅰ实时定量PCR扩增检测。制作C.elegans-miR-39模拟物浓度梯度稀释的标准曲线,绝对定量血清中miR-7的表达水平。结果该方法能定量检测血清miR-7表达水平,熔解曲线呈单峰,PCR扩增产物特异,在103copies/uL至106copies ...
陈鑫 +5 more
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