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【目的】为探索XIAP 相关因子1( Xaf1) 调节肿瘤细胞凋亡的机制, 利用基因开关调节系统( Teton) , 拟建立由doxycycline 调控表达的Xaf1 诱导细胞株。【方法】将pTREHA-Xaf1 和pWZL-Hyg 质粒用基因 转染技术转入稳定表达rtTA 的Saos-2 细胞中。经过hygromycin 的抗性筛选, 挑出并扩增表达Xaf1 的细胞株。 在8 例实验组中加入doxycycline, 和不加doxycycline 的8 例对照组比较, 重复3 ...
夏焱 +6 more
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铁蛋白普遍存在于生物体内,具有铁离子解毒和储存等功能。在构建脂多糖刺激的中华绒螯蟹cDNA文库的基础上,获得了中华绒螯蟹铁蛋白基因EsFer的cDNA序列,其全长为1118bp,包含480bp的开放阅读框,推测编码的蛋白质为159氨基酸,其5′和3′端的非编码区分别为178bp和461bp,预测的分子量为18.3ku,理论等电点为5.81,在15~37aa处有一个跨膜螺旋。在5′非编码区核甘酸序列的135~162的位置有个特殊的结构,即铁反应元件(iron response element,IRE ...
付建平 +5 more
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放射诱导启动子的合成与鉴定及质粒pcDNA3.1(+)/E-CDglyTK 的构建
【目的】合成放射诱导启动子序列并构建其调控双自杀基因的真核表达质粒pcDNA3.1 (+)/ECDglyTK 。【方法】利用人工寡核苷酸片段合成放射诱导启动子, 以绿色荧光蛋白(GFP) 作为报告基因转染 Tca8113 细胞, 经流式细胞仪鉴定其辐射诱导特性。将pCEA-CDglyTK 中双自杀基因CDglyTK 亚克隆到 pcDNA3.1(+), 然后把合成启动子插入到CDglyTK 上游构建质粒pcDNA3.1(+)/E-CDglyTK 并酶切鉴定, 阳离子 ...
余东升 +4 more
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pJAK2 polypeptide,an antagonist of suppressors of cytokine signaling-1,can enhance the antitumor effect of dendritic cells [PDF]
目的:探讨细胞因子信号转导抑制因子-1(SuPPrESSOrS Of CyTOkInE SIgnAlIng1,SOCS1)拮抗物PJAk2多肽(氨基酸序列号为1001-1013)参与树突状细胞(dEndrITIC CEllS,dCS)的体外诱导培养后对dCS抗肿瘤作用的影响。方法:采集健康人外周血,离心获得单个核细胞,用重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rECOMbInAnT HuMAn grAnulOCyTE-MACrOPHAgE COlOny STIMulATIng fACTOr,rHgM-CSf ...
丁园 +8 more
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【目的】研究巨噬细胞移动抑制因子(MIF)对人血管内皮细胞表达血管生成相关基因的诱导作用。【方法】通过亚克隆,构建原核表达质粒pET22b-MIF,并转化人工程菌B121(DE3)。用Ni-亲合柱分离纯化BL21(DE3)中经IPTG诱导表达的重组MIF。用巨噬细胞移动抑制试验鉴定复性的重组MIF的活性。分别用0、30、60、120ng/mL的重组MIF处理人血管内皮细胞12h,通过Real-time定量PCR检测人血管内皮细胞中VEGF165、FGFR3、MMP9、TGF-α、PDGF ...
单志新 +8 more
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The effects of axon guidance factor Slit3 on metastasis of human fibrosarcoma [PDF]
我们通过在纤维肉瘤细胞HT1080过表达Slit3基因,分析Slit3对肿瘤细胞侵袭转移作用.Transwell侵袭实验中,Slit3过表达后抑制HT1080的迁移侵袭,在裸鼠皮下成瘤实验中,肿瘤体积明显变小、重量明显降低,Slit3过表达后抑制HT1080肿瘤细胞的侵袭转移。此外肿瘤切片HE染色后发现GFP组有病灶点,而slit3过表达则少见,这个结果说明,Slit3显著抑制HT1080细胞转移。slit3过表达后MMP2,MMP9的表达明显降低,而MMP3,MMP13表达量上调 ...
刘咏梅
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肾癌G250/MN/CAIX 抗原基因在酿酒酵母中的 诱导表达及意义
【目的】 观察G250 抗原基因编码区cDNA 全长基因片段在酿酒酵母中诱导表达情况,并初步探讨其作为肿瘤治疗中的意义。【方法】 应用基因重组技术将人G250 cDNA序列克隆入酿酒酵母穿梭诱导表达载体pYES2/NT C,构建重组酵母真核表达质粒pYES2/NT C-G250并转化酿酒酵母菌株INVSc1,筛选阳性克隆转化子,经半乳糖诱导表达后进行菌体全蛋白的Western blot检测。【结果】 成功构建pYES2/NT C-G250 重组酿酒酵母诱导表达质粒,证实其能够在酿酒酵母中诱导表达 ...
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NCT监测用于七氟醚麻醉下气管内插管时麻醉深度变化的可行性研究
目的探讨NTC监测七氟醚麻醉下气管内插管时麻醉深度变化的临床研究。方法选取我院2014年1月至2015年1月的150例择期行全麻下气管插管妇科手术患者,SASⅠ级或Ⅱ级,随机分为A、B两组,每组75例,A组单纯七氟醚诱导,B组七氟醚联合罗库溴铵诱导。采用多功能心电监护仪及Narcotrend麻醉深度监测仪对两组患者进行监测,观察麻醉过程中的NCT、BIS(脑电双频谱指数)、MAR(平均动脉压)、HR(心率)等。结果两组患者的MAP、HR在插管前的差异无统计学意义(P>0.05)。插管后A组(单药组 ...
马丁雷 +4 more
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目的探索乳鼠视网膜细胞体外诱导骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞的可行性。方法以大鼠BMSCs为研究对象,利用分层共培养的乳鼠视网膜细胞作诱导剂,进行增殖培养、分化诱导;免疫组化法进行细胞性质鉴定。结果加入乳鼠视网膜细胞共培养第7天有神经元样细胞形成,经nestin、NF鉴定为神经元样细胞。结论BMSCs在体外培养条件下,经过新生乳鼠视网膜细胞诱导,可以分化为神经元样细胞。
徐春玲, 苏冠方, 牟大鹏
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通过对不同生长时期的卡介苗及耻垢分枝杆菌以不同组合和浓度的D-环丝氨酸(cyc)和氨苄青霉素(AMP)进行L型诱导,综合染色镜检、菌落形态观察及计数,以及对十二烷基磺酸钠(SDS)敏感性测定的结果,发现在对数生长晚期(卡介苗为OD600=0.25~0.30,耻垢菌为OD600=1.0~1.4)开始诱导,cyc和AMP的浓度分别为1.0mg/ml及0.lmg/ml时诱导效果最好,诱导率可达80%左右。
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