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目的探讨骨髓间充质干细胞体外分离培养和鉴定方法,找到一种能在质和量上均能满足需要的体外培养条件。方法无菌条件下分离处死后取小鼠双下肢骨,低糖DMEM培养液冲出骨髓,离心5mins,用5ml含10%胎牛血清的低糖DMEM培养液重悬细胞。加入等体积密度为1.073g/L percoll分离液离心30mins。取中层云雾状细胞。37℃、5%CO2培养箱中贴壁培养。取5-10代细胞培养至对数生长期后,洗涤离心。取100μl细胞悬液分别加入相应抗体,避光孵育30mins,洗涤离心。流式细胞仪检测 ...
银广悦 +6 more
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众所周知,慢性肾脏疾病已成为全世界范围内重要的公共卫生问题。一般认为,肾小球硬化和肾小管间质纤维化是慢性肾脏疾病进行性发展的共同通路。足细胞又称为肾小球上皮细胞,其足突为肾小球滤过屏障的重要组成部分。近10余年来的研究已证实,足细胞损伤是肾小球硬化的初始事件[1]。同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)是甲硫氨酸和半胱氨酸代谢过程中产生的一种含硫氨基酸,本身并不参加蛋白质的合成。Eikelboom等[2]研究表明 ...
陈颖
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据报道肥大细胞瘤可在人类和动物,诸如猫、马、牛、猪、雪貂身上自然发生[1-3]。研究发现某些化学物或放射辐射可导致小鼠发生肥大细胞瘤[4,5]。研究发现,肥大细胞瘤与遗传及环境因素密切相关。幽门螺杆菌是一种高致病能力的菌株,它在炎症启动及调节中发挥举足轻重的作用[6]。肥大细胞是一种可以清除细菌炎症细胞之一。研究发现幽门螺杆菌感染患者的粘膜肥大细胞数量明显增加 ...
朴瑛, 柳云恩, 谢晓冬
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血管紧张素II对足细胞葡萄糖转运蛋白1的表达及 膜转位的影响
【目的】 观察血管紧张素II(AngII)对体外培养的小鼠足细胞葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)的表达及膜转位的影响?【方法】 AngII对GLUT1mRNA和GLUT1蛋白表达的检测将体外培养的足细胞分为4组:对照组(C)?低剂量组(AngII 10-10 mol/L)?中剂量组(AngII 10-8 mol/L)及高剂量组(AngII 10-6 mol/L),用RT-PCR?Western blot检测GLUT1mRNA和GLUT1蛋白的表达;AngII对GLUT1足细胞胞膜分布检测也将足细胞分为4组:
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糖尿病肾病(DN)是糖尿病最严重的微血管合并症,其早期临床标志物是微量白蛋白尿,而蛋白尿的产生与足突裂孔蛋白nephrin表达异常有关,足细胞功能障碍是糖尿病肾病发生发展的重要因素[1]。有研究表明:Nephrin是由肾小球足细胞表达,定位于肾小球裂孔膜上的跨膜蛋白 ...
张洋 +4 more
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目的 构建重组人Orail基因真核表达载体,观察其在小鼠肾小球足细胞株(MPC5)中的表达。方法 根据GenBank数据库检索到的人Orail基因序列,人工合成法合成Orail基因编码区(coding sequence,CDS)全长序列,克隆至质粒表达载体PG-CMV-IRES-EGFP,构建重组质粒载体PG-CMV-Orail,通过PCR、双酶切及基因测序等方法进行鉴定;以脂质体转染法将重组质粒转染至MPC5细胞,应用荧光显微镜观察绿色荧光检测转染效率,RT-PCR、Western ...
魏冬月
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目的研究分娩发动前后蜕膜及外周血中NK细胞、NKT细胞表面NKG2A和NKG2D受体的表达情况,探讨其在产程发动中的作用。方法选取正常孕足月孕妇分为分娩发动经阴道分娩组(以下简称分娩组20例)和分娩未发动行选择性剖宫产术组(以下简称剖宫产组20例),分离蜕膜及外周血中单个核细胞后采用流式细胞学技术分别检测CD56+细胞、NK细胞、NKT细胞表面NKG2A和NKG2D受体的表达情况。结果外周血单个核细胞中分娩组CD56+NKG2A+细胞构成下降、CD56+NKG2D+细胞构成增加,NK细胞 ...
陈红波 +5 more
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从采集到的微量胎盘绒毛,经过组织细胞培养,获得了大量的绒毛细胞,对其进行了基因组DNA的分离纯化,提取到足够量的DNA。经过0.8%琼脂糖凝胶电泳,结果显示出完整的绒毛细胞DNA带,得到了典型的大分子DNA电泳图谱。
吴文莲, 李建吾, 郑远旗, 张静
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视神经血管母细胞瘤,又称视神经血管网状细胞瘤,目前对视神经血管母细胞瘤起源争论还很大,考虑为软脑膜血管发生或来源于视神经组织的一种良性肿瘤,在临床上极为罕见,并且该病在临床上并没有给予足够重视。笔者收集1例经病理证实为眶尖部视神经血管母细胞瘤病例,结合国内外文献对其影像表现及临床特点进行回顾性分析 ...
岳光红 +4 more
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本文研究β-胡萝卜素和VitC对环磷酰胺诱发的小鼠骨髓嗜多染红细胞微核的影响,观察到预先摄入足量β-胡萝卜素和/或Vit C15d能减低环磷酰胺诱发的嗜多染红细胞微核率;环磷酰胺腹腔注射后摄入足量β-胡萝卜素能促进嗜多染红细胞做核率的恢复,但Vit C对嗜多染红细胞微核率的恢复元帮助。本实验中未见β-胡萝卜素与Vit C有协同作用。
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