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【目的】探究miR-204-3p 靶向EphB2 基因对非小细胞肺癌增殖、凋亡、侵袭的调控机制。【方法】培养将非小细胞肺癌A549 细胞系分为 5 组 NC mimic 组(miR-204-3p 过表达阴性对照组)、miR-204-3p mimic 组(miR-204-3p 过表达组)、oe-NC 组(EphB2 过表达阴性对照组)、oe-EphB2 组(EphB2 过表达组)、miR-204-3p mimic+oe-EphB2 组(miR-204-3p 与EphB2 均过表达组)。MTT、流式细胞术 ...
谢传华 +7 more
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基于episomal CRISPR/Cas9 载体的基因敲入方法
【目的】研究一种在哺乳动物细胞中高效的基因敲入方法,比较带有oriP-EBNA1 序列的episomal CRISPR/Cas9载体与普通CRISPR/Cas9载体的基因敲入效率是否有差别。【方法】首先利用慢病毒载体构建稳定表达红色荧光蛋白DsRedE2的人胚肾细胞系(293FT)与人诱导多能干细胞系(hiPS);利用CRISPR/Cas9序列设计网站,设计和合成靶向DsRedE2的向导RNA(sgRNA),分别克隆至带有oriP-EBNA1的episomal CRISPR ...
邹征伟, 赖兴强, 李伟强
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放射性药物在肿瘤诊疗领域发挥着日益重要的作用,其核心之一在于螯合剂将放射性核素与靶向分子高效、稳定地结合,并在体内具有高稳定性及良好的药代动力学特性。本文系统综述了经典及新型放射性金属核素的螯合剂标记化学的研究进展,重点探讨了68Ga、177Lu、90Y、225Ac等关键核素的适用螯合剂、标记策略及在生物体内的应用性能。通过分析放射性核素-螯合剂复合物热力学稳定性、标记条件(pH、温度、时间)及体内动力学惰性,揭示了螯合剂结构对放射性药物靶向性、稳定性和疗效的影响 ...
韦 丽雅 +4 more
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锕-225(225Ac)具有高传能线密度、适宜的半衰期、短粒子射程和良好的配位能力等特性,是很有医用前景的α核素之一,在肿瘤的靶向放射性核素治疗中具有重要的研究价值。本文简要介绍了225Ac的物理和化学特性以及常用螯合剂(前列腺特异性膜抗原、奥曲肽、纳米载体等),围绕着以多肽或小分子为靶向分子、以单克隆抗体或蛋白为靶向分子和基于纳米载体的TAT药物,综述了225Ac标记的靶向药物在肿瘤中的应用和纳米材料对225Ac衰变子体的保留作用,分析其应用于治疗的价值,总结了225Ac标记方法和适宜螯合剂的选择 ...
王立琴, 柳江燕
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靶向抑制生长分化因子3减轻内皮细胞炎症反应并抑制脉络膜新生血管
目的揭示靶向抑制生长分化因子3(GDF3)对脉络膜新生血管(CNV)形成及内皮炎症反应的影响。方法构建激光诱导的小鼠CNV模型,通过RNA测序(RNA-seq)筛选差异基因。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot验证GDF3表达水平。通过siRNA及中和抗体拮抗内皮细胞GDF3,采用CCK8实验、划痕实验及成管实验评估内皮细胞增殖、迁移和血管生成能力。检测炎症/黏附分子表达变化,分析免疫细胞黏附和跨内皮迁移实验变化。在CNV模型中,通过玻璃体腔注射shRNA靶向抑制GDF3 ...
唐榕穗, 田壹, 熊振, 李旭日
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【目的】 评价经导管动脉化疗栓塞(TACE)联合微波消融(MWA)治疗中晚期原发性肝癌的远期临床疗效及主要影响因素。【方法】 本研究随访2005年1月至2011年12月间在中山大学孙逸仙纪念医院介入科接受TACE联合MWA治疗的86例中晚期原发性肝癌患者,其中男性76例,女性10例,年龄11 ~ 78(54.97±15.43)岁。利用SPSS17.0版统计软件,单因素分析采用Kaplan-Meier方法及Log-rank检验,多因素分析采用Cox逐步回归方法。【结果】本组患者中位生存时间为21.5个月 ...
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【目的】 构建AFP启动子介导HSV-TK基因表达载体,并对其在肝癌细胞中特异性表达进行分析. 【方法】 采用PCR法扩增人AFP基因启动子?回收纯化后克隆入pBluescript II KDR-TK相同克隆位点,切取AFP-TK片段,然后通过酶联反应插入到pEGFP-C1中,构建成pEGFP-C1-AFP-TK、对获得的片段进行鉴定、细胞靶向和外源基因表达的鉴定。【结果】序列分析表明,该启动子含300 bp核苷酸,与已报道的序列比较,100%相符。限制性酶切分析,重组质粒pEGFP-C1-AFP ...
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为了解决超短半径径向水平井水力钻头破岩效率低的问题,将膛线引入水力学中,利用膛线的螺旋切割产生直旋混合射流,同时根据磨料射流高效破碎靶件的特点,利用岩屑产生磨料射流的优势,设计了A、B 2种结构的自进式岩屑磨料直旋混合射流钻头,并利用数值模拟方法分析了钻头的流场分布规律。分析结果表明,钻头的螺旋切槽能够形成旋转射流,磨料漏斗均能吸入岩屑形成磨料射流;钻头的扩展段和井底两侧均能产生涡漩,该涡漩可以促进岩屑翻滚,进而提高清岩效果,轴向速度分布规律与常规喷嘴圆形射流规律相似 ...
兰起超 +5 more
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运用蛋白质组学技术研究结肠粘膜、腺瘤及腺癌组织蛋白的差异表达
[目的]通过比较结肠正常粘膜、腺瘤、腺癌组织之间的蛋白质组表达差异,寻找结肠腺癌相关的蛋白质,筛选结肠癌早期诊断的分子标志物。[方法]运用比较蛋白质组学技术,对8例结肠癌患者(伴有腺瘤)的正常粘膜、腺瘤、腺癌组织提取的总蛋白进行双向电泳(2-D),分析凝胶图片选择两两间差异表达超过2倍的蛋白质进行MALDI-TOF/TOF质谱分析和生物学信息分析。[结果]成功建立结肠正常粘膜、腺瘤、腺癌的双向凝胶电泳图谱,在凝胶电泳图谱中平均蛋白质斑点数分别为3066 、2986和3289 ...
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目的 探讨转录因子E2F3在上皮性卵巢癌(EOC)中的表达及临床意义。方法 在癌症基因组图谱(TCGA)数据库及基因表达数据库(GEO)中分析E2F家族成员在EOC组织与正常组织中的表达差异及临床意义,同时借助生物信息数据库预测E2F3的转录调控靶点。应用RT-qPCR和Western blot检测EOC及对照组中转录因子E2F3及其靶基因的mRNA及蛋白表达水平。结果 TCGA数据信息结合GEO测序结果提示,与对照组相比在EOC中E2F1、E2F3呈现显著高表达 ...
张晶, 孔丽丽
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