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基于蛋白质组学技术探讨7-羟乙基白杨素防治高原脑水肿的作用靶点 [PDF]

open access: yes浙江大学学报. 医学版
目的 研究7-羟乙基白杨素(7-HEC)治疗大鼠高原脑水肿的作用靶点及机制。 方法 54只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型对照组和7-HEC组,每组18只。后两组于实验第4天置于模拟7000
张 冬梅   +5 more
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病毒感染诱导细胞衰老的机制及意义 [PDF]

open access: yes浙江大学学报. 医学版
病毒诱导的衰老(VIS)是一种重要的生物学现象,对机体产生多方面影响,包括免疫系统功能下降、衰老相关疾病的发生发展以及机体的加速老化。多种常见RNA病毒(严重急性呼吸综合征冠状病毒2型)、DNA病毒(疱疹病毒、乙型肝炎病毒等)以及蛋白质病毒(朊病毒)均能诱导宿主细胞发生VIS,主要涉及cGAS-STING信号通路的异常激活及DNA损伤应答等机制,也可能与细胞内相分离引起的整合应激反应相关。研究发现,病毒感染与细胞衰老之间的作用是相互的。细胞衰老是宿主细胞限制病毒复制和传播的一种防御机制 ...
常 允闯   +4 more
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漆酶基因LACC1经腺苷酸活化蛋白激酶/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3加重脑梗死缺血再灌注损伤的机制研究 LACC1 Aggravated Ischemia Reperfusion by Phosphorylate AMP-activated Protein Kinase/Nucleotide-binding Oligomerization Domain-like Receptor Protein 3 in Cerebral Infarction

open access: yesZhongguo cuzhong zazhi, 2023
目的 探讨漆酶基因LACC1对脑梗死后缺血再灌注损伤的影响及其机制。 方法 ①采购C57BL/6J LACC1基因敲除(LACC1-/-)小鼠20只,野生型小鼠20只,建立大脑中动脉闭塞/再灌注(middle cerebral artery occlusion/reperfusion,MCAO/R)模型各15只,比较两组小鼠的脑梗死体积。采用蛋白质免疫印迹实验检测脑组织中磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(phosphorylate AMP-activated protein kinase,p-AMPK ...
焦俊萍,鲍军强,史慧敏,高超,田书娟
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RNA干涉与卵巢癌化疗药物敏感性的相关性研究

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2008
目的设计应用含有T7-启动子的Oligo-DNA合成发夹RNA,并应用T7-ShRNAs对卵巢癌SKOV3细胞株的C-erbB2基因进行RNAi,继而进行与卡铂相关的化疗敏感性研究。方法自行设计并应用体外转录法合成并筛选出3条T7-ShRNAs,脂质体转染卵巢癌SKOV3细胞,分为非转染组、无关RNA组、shRNA(a,b,c)组,免疫细胞、RT-PCR观测干涉结果,应用CCK-8进行干涉与化疗敏感性的监测。结果体外转录。结果合成后电泳检测shRNA(a,b,c)纯度符合实验标准 ...
萧丽娟, 朱宇
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人肝癌细胞N-ras基因RNA干涉有效靶点的确定

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2006
目的寻找人肝癌细胞N-ras基因的RNA干涉有效靶点。方法利用计算机网络资源及Oligo6.0、BlastResearch等生物学软件在N-ras基因编码区寻找RNAi有效靶点,并设计用于体内转录形成以U6启动子的siRNA发夹结构的DNA。结果成功筛选出RNA干涉的有效序列14个,并设计出siRNA发夹结构的DNA。结论这种对人肝癌细胞N-ras基因的RNAi有效靶点的筛选为进一步研究奠定了理论基础。其工作的开展将在RNAi治疗、肝癌N-ras基因功能研究、新药开发等方面发挥重要作用。
徐凯成   +4 more
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细胞内氯通道4基因siRNA表达载体的构建及其沉默效应

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2009
目的构建针对细胞内氯通道4(CLIC4)的短链干涉RNA(siRNA)及其表达载体,转染细胞后观察其对CLIC4基因的干涉作用。方法设计CLIC4靶向的发夹状siRNA,据此设计合成两条互补的寡核苷酸链,退火后连接到pSilencer3.1-H1载体,转化扩增后进行序列测定。用脂质体转染法转染大鼠神经胶质瘤细胞C6,通过RT-PCR检测CLIC4基因表达水平的变化。结果酶切鉴定与DNA测序分析证明CLIC4基因的siRNA载体构建正确,RT-PCR结果表明CLIC4基因的表达水平明显降低 ...
袁兆新   +8 more
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FRAT1基因真核表达质粒的构建与鉴定

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2013
目的构建FRAT1siRNA真核干涉表达载体pSINsi-FRAT1,并测序鉴定证实克隆正确。方法设计以FRAT1基因为靶标的RNAi序列和阴性对照片段序列,并克隆入载体pSINsi-hU6,用基因测序进行重组克隆验证。结果 PCR检测证实siRNA插入pSINsi-hU6质粒,测序分析证实插入序列正确。结论成功构建FRAT1基因的RNAi载体,为研究FRAT1基因对结肠癌细胞增殖凋亡侵袭的影响提供了稳定转染的RNA干扰质粒。
于庆功   +4 more
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大鼠全脑缺血再灌注损伤后海马CA1区基因表达动态变化研究(Study on Dynamic Changes of Gene Expression in the Hippocampus CA1 Region after Global Cerebral Ischemia-Reperfusion Injury in Rats)

open access: yesZhongguo cuzhong zazhi
目的 全脑缺血再灌注损伤后海马CA1区神经元死亡最为显著,但其原因尚不明确。本研究分析大鼠全脑缺血再灌注损伤后海马CA1区的基因组变化,寻找可能的干预靶点。 方法 将Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组和模型组。采用四血管法制作大鼠全脑缺血再灌注损伤模型。假手术组及模型组大鼠在全脑缺血再灌注后的5个时间点(6、12、24、48、72 h)取海马CA1区脑组织进行RNA测序。测序结果采用对比分析、基因本体论(gene ontology,GO)富集分析,以及京都基因和基因组数据库(Kyoto
贾瑞琪,翟华筝,张晨,汪敬业(JIA Ruiqi, ZHAI Huazheng, ZHANG Chen, WANG Jingye)
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RNA干扰抑制人肝癌细胞N-ras基因表达的研究

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2010
目的研究RNA干扰(RNAi)对BEL7402细胞的N-ras基因表达的干扰效应。方法建立装载靶向N-ras基因小干扰性RNA(siRNA)的表达载体;用脂质体法将此表达载体转染BEL7402细胞株,以转染空载细胞作为对照;采用RT-PCR和Western blot检测N-ras基因的表达;流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果转染siRNA的表达载体可以抑制内源N-ras基因在转录和转译上的表达。N-ras基因的表达抑制与BEL7402细胞的凋亡相关联。结论转染siR ...
赵岳   +4 more
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沉默HeLa细胞端粒酶活性对其在裸鼠体内移植瘤生长的影响

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2009
目的沉默HeLa细胞人端粒酶催化亚单位(human telomerase catalytic subunit,hTERT)基因、抑制细胞端粒酶活性,观察细胞生长状态和其对裸鼠体内移植接种成瘤能力的影响。方法RNAi技术,脂质体转染,筛选沉默hTERT基因稳定转染细胞株和无干扰效果的对照细胞株,端粒重复序列扩增-酶联免疫吸附测定法(TRAP-ELISA)测定所筛选的细胞株端粒酶活性;进一步绘制各细胞株的生长曲线;裸鼠移植接种实验观察各株细胞在裸鼠体内成瘤能力。结果成功获得稳定转染具有沉默hTERT基因 ...
石英爱   +6 more
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