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猪小肠与犬食管脱细胞基质(ECM)构建组织工程化人工食管的比较研究
背景骨髓间充质干细胞(BMSCs)具有多向分化潜能,来源广泛、分离方便、增殖迅速,是目前公认的组织工程最佳种子细胞;脱细胞基质膜(ECM)有良好的组织相容性,充足的孔隙率,利于种子细胞的附着、增殖,并诱导细胞沿"模具"的性状生长、分化,是组织工程的理想支架材料。目的为比较研究骨髓间充质干细胞在体外在不同的支架材料上复合生长情况,分别与猪小肠脱细胞基质(IECM);犬自体食管脱细胞基质(EECM)和人工补片(ePTFE)做对比研究。方法使用物理方法和化学方法制备ECM,扫描电镜观察其表面结构 ...
李春霖, 薛锦儒, 崔建华
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目的探讨人骨髓间充质细胞(hMSC)在体内向造血细胞分化的潜能和造血重建能力。方法首先建立hMSC的分离培养扩增体系,以hMSC为供体细胞,亚致死剂量射线照射后的裸鼠为受体,通过病理、免疫组化、流式细胞术等方法观察hMSC在体内向造血细胞分化能力。结果将体外分离扩增的hMSC移植给亚致死剂量照射后的裸鼠,移植后第6周外周血白细胞明显恢复并接近正常水平。移植后8周裸鼠骨髓细胞增生活跃,可见各个阶段的细胞。通过流式细胞术、免疫组化的方法在骨髓中可以检测到CD34和CD45阳性的细胞,且能够形成造血祖细胞集落(
陈晓 +5 more
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Research status and hotspots of traditional Chinese medicine in treatment of pulmonary fibrosis: based on bibliometric analysis [PDF]
MIN Yi
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目的探讨体外诱导人骨髓间充质干细胞(hMSC)向造血细胞分化的可行性及分化条件。方法首先建立hMSC的分离培养扩增体系,制备小鼠胎肝基质细胞条件培养液(FLSC-CM),将hMSC接种在分别含FLSC-CM和IL-6、SCF组合的培养体系中,通过形态学、直接免疫荧光染色检测法、粒-单/巨噬系集落形成细胞培养(CFU-GM)对分化细胞进行鉴定。结果hMSC经FLSC-CM诱导培养9天后,产生较多的悬浮细胞,悬浮细胞瑞士染色后形态类似于单核或小淋巴细胞,表达人CD34和人CD45表面抗原 ...
陈晓 +5 more
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多药耐药基因转染人骨髓间充质干细胞及对其化疗保护作用的实验研究
目的探讨逆转录病毒介导多药耐药基因(mdr1)体外转染人骨髓间充质干细胞(MSCs)能否提高其对化疗药物的耐受性。方法采用percoll密度梯度离心法自骨髓中分离MSC并进行纯化和扩增;脂质体转染法将携带有mdr1基因的逆转录病毒载体导入293T包装细胞,获得的病毒上清感染MSC,流式细胞术测定mdr1基因编码产物P-糖蛋白(P-g170)的表达水平;罗丹明(Rh123)排泌试验检测P-g170的功能活性;MTT法测定转染MSC对化疗药物耐受性。结果mdr1基因导入骨髓MSC后稳定表达P ...
叶明珠, 韩丽英, 岳鑫, 李荷莲
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目的研究5-氮胞苷(5-Aza)对培养人骨髓间充质干细胞(MSCs)的作用,并对分化后的心肌样细胞进行鉴定。方法采用密度梯度离心法分离到骨髓单个核细胞(MB-MNC),用含200 ml/L胎牛血清的低糖型DMEM培养液进行培养。采用差速贴壁法纯化MSCs,用流式细胞仪检测细胞表面抗原。以5-Aza诱导第3代MSCs 24 h后,继续培养。于培养的第4周,采用免疫细胞化学方法检测肌系特异性标记抗原结合蛋白(Desmin),RT-PCR检测心肌早期转录因子GATA-4和心肌特异性蛋白肌钙蛋白T(cTnT ...
曹京燕 +5 more
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Ghrelin 预处理骨髓间充质干细胞来源上清液对内皮细胞增殖、迁移及凋亡的影响
【目的】研究生长激素释放肽(ghrelin)预处理骨髓间充质干细胞(BMSCs)来源上清液对内皮细胞增殖、迁移及凋亡的影响,并初步探索其作用机制。【方法】全骨髓贴壁分离法提取大鼠BMSCs,利用流式细胞术鉴定 BMSCs 表面分子标记。收集 BMSCs 上清液及高、中、低浓度(100 nmol/L、10 nmol/L、1 nmol/L)ghrelin 预处理BMSCs 24 h 后上清液,以无血清培养基为对照,将上清液分别加入人脐静脉细胞融合细胞(EA.hy926)作用24 h, 利用 CCK8 ...
葛珊慧, 张莉珊, 林山, 曾勉
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目的研究人骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)向神经细胞分化的可能性。方法利用Per-coll梯度分离及贴壁筛选法分离培养和扩增MSCs;利用bFGF、化学诱导剂DMSO和BHA联合诱导MSCs向神经元转化,观察分化过程中细胞形态的变化,利用免疫细胞化学和RT-PCR方法检测神经元特异性标志物的表达情况。结果经Percoll梯度分离及贴壁筛选法获得了纯度较高的人MSCs,诱导分化后的细胞呈现双极、多极和锥形的典型神经元细胞的形态 ...
辛颖, 李玉林, 张丽红
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目的诱导人骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化。方法体外分离培养人骨髓间充质干细胞,将其分为对照组和诱导组两组。诱导组加入地塞米松、抗坏血酸和β-甘油磷酸,诱导成骨。采用免疫荧光染色的方法检测碱性磷酸酶(AKP)和骨桥蛋白(OPN)的表达;并通过RT-PCR检测骨桥蛋白mRNA的表达;利用硝酸银染色和茜素红染色两种特殊染色方法检测钙盐沉积。结果经诱导,诱导组细胞在呈典型的成骨细胞形态并有钙结节形成;免疫荧光染色结果显示诱导组细胞AKP和OPN均为强阳性表达,RT-PCR结果也显示诱导组细胞骨桥蛋白mRNA表达;
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目的制备重组人骨形成蛋白-2(rhBMP-2)聚氰基丙烯酸正丁酯纳米微球缓释系统,检测其对兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)的生物学效应。方法采用改良的乳化溶液聚合法制备rhBMP-2纳米微球;采用MTT法检测微球对BMSCs增殖的影响;碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒检测细胞ALP活性。结果该微球缓释系统具有一定的生物活性,可促进BMSCs的增殖,并呈剂量依赖性。其效应高于单纯施加rhBMP-2的效应。结论纳米材料是一种较好的缓释系统,作用效果优于单纯使用rhBMP-2。
季晓风 +3 more
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