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hCAP-18/LL-37全长肽真核表达产物对树突状细胞分化成熟的影响

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2010
目的研究人源阳离子抗菌肽(hCAP)-18/LL-37全长肽真核表达产物对树突状细胞分化成熟的影响。方法将已构建的hCAP-18/LL-37全长肽真核表达载体pcDNA4/Myc-His-hCAP-18转染Hela细胞株,在转染后48 h收获培养上清;人外周血单个核细胞分离,体外定向诱导分化成树突状细胞(DC);将转染后收获的培养上清与体外培养的DC共同孵育,48 h收获DC,经流式细胞仪检测DC表面分子CD83、CD86、CD40及HLA-DR的表达。结果FCM结果显示:pcDNA4/Myc-His ...
袁红艳, 许娜, 王凤丽, 常雅萍
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Study on techniques of tissue culture and germplasm conservation in vitro of Astilbe tabularis (Hemsl.) Engler(山荷叶离体培养和种质试管保存技术研究)

open access: yesZhejiang Daxue xuebao. Lixue ban, 2011
以山荷叶新生嫩叶为外植体,基于均匀设计法筛选其最适宜的离体培养和种质试管保存各阶段培养基.结果表明,最适合愈伤组织诱导的培养基为MS+6-BA 1.00 mg • L-1+IBA 0.08 mg • L-1,诱导率为99.7%;愈伤组织再分化培养基为MS+6-BA2.80 mg • L-1+IBA 0.02 mg • L-1+GA30.90 mg • L-1,分化率为99.5%;生根培养基为1/6MS+IAA 0.02 mg • L-1+IBA 0.04 mg • L-1,生根率达99.2%以上 ...
GUDi-zhou(顾地周)   +3 more
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胎鼠皮肤间充质干细胞体外增殖特性的研究

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2008
目的探讨胎鼠皮肤间充质干细胞的体外增殖特性。方法取昆明小鼠胎鼠皮肤体外培养胎鼠皮肤间充质干细胞,MTT法检测所培养细胞对表皮生长因子(EGF)、角朊细胞生长因子(KGF)和碱性或纤维细胞生长因子(bFGF)的反应,观察其在体外培养条件下的增殖与生长特征。结果胎鼠皮肤间充质干细胞具有很强的增殖活性,传代培养潜伏期为24-48 h,对数增殖期为3-5 d,然后进入平台期。经过15代连续培养的细胞其增殖能力未见明显改变。应用MTT法检测发现,培养的细胞对bFGF具有良好的反应性,并在1.0μg.L ...
杨婧   +4 more
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大鼠胚胎肝干细胞的分离方法比较

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2006
目的比较两种体外分离培养原代大鼠胚胎肝干细胞(EHSCs)方法,并对其进行鉴定。方法用胶原酶灌注法及剪碎消化法分离不同年龄的大鼠胚胎肝干细胞,用含10%优等胎牛血清的H-DMEM培养液培养。利用免疫细胞化学方法在激光共聚焦扫描显微镜下观察该细胞表面抗原的表达情况,进行鉴定。结果两种方法分离的大鼠胚胎肝干细胞体外培养24 h贴壁,5 d左右可长成单层,光镜下为致密圆形细胞,边缘清楚。8 d后细胞铺展,呈上皮样。表达甲胎蛋白(AFP)抗原、细胞角蛋白(CK)18、19 ...
胡小波, 曲丽梅, 李玉林
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大鼠骨髓间充质干细胞向神经元样细胞定向诱导分化及免疫组化鉴定

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2010
目的建立体外分离、培养大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的方法,体外诱导其向神经元样细胞方向分化。方法应用细胞培养技术从大鼠股骨、胫骨中分离、纯化骨髓间充质干细胞并在体外进行培养,以形态学方法鉴定间充质干细胞,在倒置显微镜下观察细胞的形态特征,利用含10 ng/ml bFGF的LG-DMEM及含200μmol/L BHA、2%DMSO的无血清DMEM诱导其向神经元样细胞分化,并通过免疫组化方法鉴定。结果经原代及传代培养的骨髓间充质干细胞呈梭形,类似于成纤维细胞;成神经元诱导24 h后 ...
于音   +7 more
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冷冻后人胚卵巢细胞团对hMG作用的内分泌与形态学反应

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1994
妊娠20~24周人胚胎卵巢经改进的超速冷冻仍具有内分泌功能。这种冷冻后的胚胎卵巢细胞团体外培养时,培养无数与细胞团的E2分泌能力呈负相关,形态学检查与此结果相吻合。冷冻后人胚胎卵巢的细胞团体外培养时培养位中人绝经期促性腺激素(hMG)最适浓度为50IU/L,培养的最适天数为1~3d。这对人胚胎卵巢细胞团同种异体移植时受体促性腺激素水平内及培养时间的选择与设定有重要指导意义。
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肝衰竭大鼠血清诱导间充质干细胞向肝细胞分化的实验研究

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2007
目的观察肝衰竭大鼠血清诱导骨髓间充质干细胞向肝细胞分化的作用,探讨大鼠骨髓间充质干细胞分离培养、体外扩增及其向肝细胞分化的体外培养条件和方法。方法从股骨胫骨分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,体外扩增培养、鉴定,并采用肝衰竭大鼠血清血清诱导培养,分别在诱导培养0、7、14、24、28天时留取细胞,观察细胞形态的变化,并采用免疫细胞化学方法检测肝特异性标记物(AFP、Alb、CK-18)、用PAS进行糖原染色实验,以验证诱导分化结果。结果诱导后5天间充质干细胞表现为肝细胞样,随着诱导培养时间的延长 ...
孙庆国   +3 more
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贴壁型树突细胞的分离培养及鉴定

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2010
目的探索树突细胞的生长状态,建立鉴别树突细胞的简便方法。方法从正常人外周血分离获得单个核细胞,常规培养2 h,取贴壁细胞,用含细胞因子的培养液进行培养,于第1、2、5、7天在光镜下对其进行形态鉴别,然后检测其促淋巴细胞增殖和诱导免疫反应的功能。结果实验中所培养的树突细胞始终处于贴壁状态,未见悬浮生长现象,其形态与理论相符,可在体外促进淋巴细胞增殖,并诱导免疫反应。结论树突细胞体外培养至发育成熟的过程中,树突细胞可能始终处于贴壁生长状态。
刘朋飞   +4 more
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原发性肝癌肿瘤浸润性淋巴细胞的特性

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1995
10例原发性肝癌手术切除的肿瘤标本用于分离培养肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)。分离制备TIL采用机械剪切,酶消化和用Ficoll-Hypaque分离结合的方法。分离制得的TIL以一定浓度于含rIL-21000U/ml,PHA20μg/ml的RPMI1640完全培养液中,在5%CO2,37℃条件下培养30~40d。实验观察了TIL悬液中的细胞组成、TIL的体外扩增及肿瘤细胞的消失情况;用透射电镜观察了培养前后TIL的超微结构变化;实验采用免疫组化和单克隆抗体技术(ABC法 ...
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