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目的探索乳鼠视网膜细胞体外诱导骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞的可行性。方法以大鼠BMSCs为研究对象,利用分层共培养的乳鼠视网膜细胞作诱导剂,进行增殖培养、分化诱导;免疫组化法进行细胞性质鉴定。结果加入乳鼠视网膜细胞共培养第7天有神经元样细胞形成,经nestin、NF鉴定为神经元样细胞。结论BMSCs在体外培养条件下,经过新生乳鼠视网膜细胞诱导,可以分化为神经元样细胞。
徐春玲, 苏冠方, 牟大鹏
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CpG ODN增强人外周血单个核细胞对肝癌细胞系HepG-2杀伤活性的实验研究
目的探讨CpG ODN在体外对人外周血单个核细胞的活性和肿瘤杀伤作用的影响。方法用CpG ODN刺激在体外分离培养的人外周血单个核细胞,检测其活性和对肝癌细胞系HepG-2杀伤作用。结果CpG ODN组PBMC培养上清IFN-γ显著高于对照组 ...
韩刚, 刘庆功, 贾明库
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【目的】 探讨有效的体外培养扩增CD4+CD25+Treg的方法。【方法】 收集健康志愿者外周血5例,免疫磁珠法分选出CD4+CD25+Treg。将实验分为三组,第一组在CD4+CD25+Treg中加入100 nM rapamycin (1μg/ml)和包被了CD3/CD28单抗的磁珠培养3周,第8 天开始加入1000U/mL的IL-2,第二组培养条件除不加rapamycin外其余与第一组相同,第三组培养细胞为CD4+CD25-T细胞,培养条件同第一组。培养第7、14、21天收集细胞计数 ...
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体外及裸鼠体内培养对甲状腺HLA Ⅱ类 抗原阳性细胞数的影响
目的: 探讨空气、高氧、60钴照射后体外培养及裸鼠体内培养对甲状腺 HLA Ⅱ类抗原阳性细胞数的影响。方法: 采用免疫组织化学方法测定 HLA Ⅱ类抗原阳性细胞数, 并进行相互比较。结果: HLA Ⅱ类抗原阳性细胞数减少以60钴照射后 裸鼠体内培养组最明显,空气、高氧、单纯60钴照射后短时间体外培养对 HLA Ⅱ抗原阳性细胞数无显著影响。结论: 经60钴照 射后裸鼠体内培养对甲状腺 HLA Ⅱ抗原阳性细胞数的减少作用较其它方法为佳, 且具有操作简单、不易被污染等优点, 值得 推广应用。
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摘要:【目的】利用细胞膜片具备的良好的流动性,以及纤维蛋白胶的可塑性为其塑形,构建具备空间立体结构的软 骨块。【方法】采用兔耳软骨细胞在培养瓶中进行体培养形成细胞膜片,刮取后剪碎,另取离散软骨细胞,用纤维蛋白胶两种 组分混悬细胞膜片和离散软骨细胞,滴加到48孔板中,在体外构建出圆片状的结构,经过体外培养后进一步植入裸鼠体内,培 养8周后取材。采用大体观察及组织学、免疫组织化学等方法观察分析体内外培养的结构。【结果】获得成熟的圆片状组织工 程软骨结构,组织学表现为成熟的软骨组织 ...
周丽斌 +7 more
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目的建立小鼠胸腺CD4+CD25+双阳性T细胞发育调控的模型,为天然调节性T细胞调控研究提供基础平台。方法采用14.5天龄胚鼠胸腺进行体外培养,以FACS检测不同时间点胸腺CD4+CD25+细胞的变化,同时计数每个胸腺小叶的细胞数变化。结果体外胸腺培养的第1-6天胸腺细胞比例、细胞数量趋势变化与胸腺体内发育的第14.5、15、16、17、18、19天CD4+CD25+双阳性T细胞的比例、细胞数量的趋势变化相似;在胸腺体外培养的第1-6天,CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞的比例分别为58.29 ...
邵先安 +6 more
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摘要: 【目的】 探讨人诱导多能干细胞(hiPS细胞)在体外向外周神经元分化的能力。【方法】人诱导多能干细胞在无饲养层培养条件下维持培养,然后在神经培养基中悬浮培养分化为神经球,通过把神经球贴壁在多聚赖氨酸和层粘连蛋白包被的培养板上,利用流式分选细胞方法获得神经嵴干细胞(NCSC),通过把神经嵴干细胞在外周神经诱导培养基中诱导分化,获得外周神经元,利用免疫荧光染色的方法检测神经嵴干细胞和外周神经元的标记物。【结果】贴壁的神经球出现特征性的神经花环(Neural rosettes)结构 ...
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目的探索无血清培养系统用于结膜上皮杯状细胞培养的可行性。方法用不含血清培养液进行组织块培养,通过倒置相差显微镜观察细胞形态,并应用特殊组化染色和免疫组化方法对培养杯状细胞进行鉴定。结果倒置相差显微镜下可见在无血清培养液中杯状细胞形态与活体组织中相似,免疫组化法证实部分细胞PAS和MUC5AC呈阳性染色。结论兔结膜杯状细胞可通过无血清培养法在体外培养,并保持活体细胞特性,为进一步研究杯状细胞相关的眼表疾病及药理毒理作用提供有效的细胞模型。
杜园园, 苏冠方, 刘早霞, 王聪
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目的: 检测细胞培养中支原体的污染, 建立支原体通用的 PCR 方法。方法: 根据已出版的序列设计并合成一对 支原体(柔膜体纲) 16S rRNA 基因组特异引物。对实验室所存的12 种支原体、大肠杆菌、变形杆菌及无支原体污染的组织培养 细胞进行了 PCR 扩增。以 PCR 与分离培养比较检测了 33份细胞培养标本。结果: 12种支原体均出现了约 620 bp左右的特异 性扩增带,敏感性为 100~ 1 000个支原体细胞, 且常见的 6种细胞培养污染支原体的扩增片段均能被 H indⅢ切成 280 与
赖小敏 方国源 李彩霞 王传恩
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目的探讨人脐静脉内皮细胞(HUVEC)体外分离原代培养的方法,并总结对培养的细胞鉴定方法。方法通过胰酶灌注法从人脐带获取内皮细胞进行分离培养,并采用免疫组化法及光镜和透射电镜观察超微结构鉴定所获得的细胞系。结果分离的HUVEC在体外7-10天左右可长成单层,光镜下胞体为单层铺路石状排列。第VⅢ因子相关抗原的检测为阳性。透射电镜下观察培养的内皮细胞胞浆内可见Weibel-Palade小体。结论用胰酶灌注法是获得脐静脉内皮细胞的有效方法。本方法为血管内皮细胞的研究提供了实验模型。
吴金义, 张蕾, 张秀英, 曲丽梅
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