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【目的】研究观察间充质干细胞(MSC)在体外培养体系对B细胞增殖和免疫调节作用的影响。【方法】采用密度梯度离心法分离健康捐献者来源的骨髓30mL。用含100mmol/L胎牛血清的L-DMEM培养基对分离出的MSC进行贴壁培养。培养至第6代时,进行多向分化和细胞表型鉴定。获取健康供者外周血单个核细胞,并通过流式细胞仪分选出CD19+B细胞,进行荧光染料CFSE标记,然后分成单独培养组(CD19+B细胞)和共培养组(按CD19+B∶MSC:=5∶1的比例共培养),两组均采用CpG+CD40L刺激 ...
刘秋莉 +5 more
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多核白细胞弹性蛋白酶对人角膜基质细胞MMP-2、MMP-9表达的影响
目的观察多核白细胞弹性蛋白酶与白细胞介素-1α对人角膜基质细胞表达的MMP-2、MMP-9的影响,进而探讨角膜溃疡的发生机理。方法体外培养人角膜基质细胞,在培养液中添加或不添加多核白细胞弹性蛋白酶或白细胞介素-1α,培养5天,通过明胶酶谱分析的方法测定培养上清中的MMP-2和MMP-9的表达。结果体外培养的人角膜基质细胞无任何刺激下可释放MMP-2;白细胞介素-1α可加强并激活MMP-2的表达,同时可诱导MMP-9前体的释放;多核白细胞弹性蛋白酶在白细胞介素-1α诱导下可完全激活前体MMP ...
刘泊明, 张冰洁, 杨贲, 郝继龙
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目的研究HCV对NKT细胞的作用,探讨NKT细胞在HCV患者体内的免疫学功能。方法选择丙型肝炎患者25例,健康志愿者25例,应用流式细胞仪检测外周血中NKT细胞的含量。分离出外周血中单个核细胞并在不同刺激物作用下培养,用流式细胞仪检测NTK细胞的含量,将培养前结果和培养后结果进行对比分析,同时检测健康人群组和丙型肝炎患者组外周血中IL-4的含量。结果丙型肝炎患者组外周血中NKT细胞的含量明显低于健康人组外周血中NKT细胞的含量,两者结果比较有显著差异 ...
赵大力 +5 more
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目的证实体内和体外培养的胶质瘤细胞是否均可分泌exosome,为测定其蛋白质组成提供实验基础,为进一步利用exosome对胶质瘤进行免疫治疗提供理论依据。方法收集U251胶质瘤培养上清液和Ⅲ级星形胶质瘤囊液,利用差速离心法提取exosome,并用液相载网法在电镜下观察胶质瘤源性exosome的形态。结果20U251胶质瘤和Ⅲ级星形胶质瘤细胞均可以产生exosome,其平均直径约10020nm。结论证实了胶质瘤细胞像其他多数细胞一样,体内和体外培养均可分泌exosome。
李超, 于金录, 杨偲, 黄海燕
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【目的】 研究对比体外受精-单精子卵胞浆内注射(IVF-ICSI)周期所获生殖泡期(GV)不成熟卵母细胞以及体外成熟(IVM)周期所获GV期卵母细胞体外培养成熟后的胚胎发育情况65377;【方法】 163个IVF-ICSI周期中所获987个成熟卵为Ⅰ组,所获GV期卵进行体外培养后成熟的132个卵为Ⅱ组, 另有37个IVM周期中所获GV期卵体外培养后成熟的235个卵为Ⅲ组65377;对3组均进行ICSI,并对其受精率65380;卵裂率及胚胎发育进行比较65377;【结果】 Ⅰ组的受精率65380 ...
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目的对孕中期羊水标本进行体外分离、培养、扩增,研究孕中期羊水来源干细胞(AFC)的生长特性、细胞表面标记。方法采用贴壁法体外分离孕中期羊水来源干细胞,绘制细胞生长曲线;流式细胞仪检测细胞表面标记。结果原代培养细胞生长潜伏期4-6d,对数增殖期7-13d,生长平台期14-18d;传代培养细胞生长潜伏期1-2d,对数增长期3-6d,生长平台期7-10d。AFCs均一表达CD44,不表达CD45。结论从人孕中期羊水中成功分离具有干细胞性质的细胞群,在体外可迅速扩增。
常颖 +4 more
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目的观察在体外培养的经GDNF基因诱导的骨髓间充质干细胞(BMSCs)向神经细胞分化的表达。方法体外培养大鼠骨髓间充质干细胞,选取第3代细胞,应用GDNF基因诱导BMSCs分化两周,观察诱导后细胞的形态学变化,免疫荧光方法验证及鉴定神经元特异性烯醇化酶(NSE)及髓磷脂酸性蛋白2(MAP-2)的表达。结果镜下观察细胞形态学以及特异性荧光可见BMSCs向神经细胞分化明显。结论 GDNF基因转染的BMSCs在体外培养情况下可转化为神经细胞,并表达特定神经细胞标志蛋白。
顾加祥 +6 more
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Epstein-Barr病毒血清抗体阳性健康人外周血体外培养“自发性”转化的研究
Epstein-Barr virus(EBV)的感染广泛存在于健康人群中,一旦感染之后可以终生携带该病毒。文献报道:几乎可以从所有血清抗体阳性健康人淋巴组织的体外培养中,建立EBV基因阳性的淋巴母细胞株,但外周血培养中“自发性”转化的阳性率则很低。本文作者之一Yao等通过改进实验方法,使用了免疫抑制剂环胞菌素A(Cyclosporin A),大大提高了外周血培养中“自发性”转化的阳性率。本文是根据这一方法,对一组35名血清EBV抗体阳性健康人进行了研究,目的在于深入了解体内EBV的携带状况 ...
黄玫玲
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【目的】对成人视网膜前体细胞进行体外分离、培养和鉴定。【方法】成人眼球 12 只,“机械分离联合酶消化法”分离出睫状上皮层的色素性细胞, 10 ng/mL 碱性成纤维细胞生长因子(bFGF) +10 ng/mL 表皮生长因子(EGF) 的无血清 DMEM/F12 培养液中培养, 并从三方面鉴定其神经干细胞特性: A. 免疫荧光染色检测神经干细胞特异性抗原神经巢蛋白 Nestin 的表达 ; B. 自我更新能力 : 原代神经球消化传代后 , 继续培养观察新神经球的形成; C. 多向分化潜能: 原代细胞培养
唐仕波, 林少芬
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目的 培养符合实验要求的人绒毛膜滋养层细胞。方法 胰蛋白酶、胶原酶消化绒毛组织 ,进行原代培养 ,胰蛋白酶消化法传代培养 ,光镜、免疫细胞化学染色进行细胞鉴定。结果 原代培养滋养层细胞 3h后开始贴壁 ,18h后全部贴壁 ,3天可传代 ,角蛋白、波形蛋白染色细胞纯度达 95 %以上。结论 胰蛋白酶、胶原酶消化法简便易行 ,可获得符合实验要求的人绒毛膜滋养层细胞 ,建立了稳定的人类绒毛膜滋养层细胞体外培养体系。
韩丽英 +4 more
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