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人体外周血CD3+CD4-CD8-双阴性T细胞体外扩增的实验研究

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2017
目的探讨人体外周血CD3+CD4-CD8-双阴性T细胞(DNT细胞)在体外进行分离和扩增的方法。方法取健康的成人外周血20ml,应用Rosettesep抗体吸附法去除CD4+T细胞和CD8+T细胞;再将DNT细胞放入anti-CD3mAb包被的培养板中,并加入rhIL-2、rhIL-4,共同培养,第10天和第14天计数细胞扩增倍数及记录扩增曲线;利用Easysep免疫磁珠法纯化,采用流式细胞仪检测其纯度。结果经分选、纯化后的DNT细胞,纯度可达94%以上;体外培养第10天和第14天 ...
王新梅, 王雪野, 韩梅, 肖中平
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人垂体腺瘤细胞原代培养的纯化及其激素的表达与分泌

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2006
【目的】探讨原代培养垂体腺瘤的细胞纯化方法及其激素表达与分泌的特点。【方法】采用三种原代培养方法对垂体腺瘤细胞进行培养,方法Ⅰ为目前常用的垂体瘤细胞培养方法,方法Ⅱ结合使用右旋颉氨酸(D-valineDMEMD-valine)培养液,方法Ⅲ采用反复贴壁法结合DMEMD-valine培养液培养。观察其细胞形态变化和生长特征,放射免疫法测定不同培养时间培养液中相应激素的水平。免疫组织化学染色法检测培养细胞生长激素(growthhormone,GH)、泌乳素(prolactin,PRL)的表达。【结果 ...
徐伟光   +5 more
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胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞分离、原代培养与鉴定

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2006
【目的】探讨胎鼠肺泡Ⅱ型细胞原代培养及鉴定方法 , 建立肺泡Ⅱ型细胞培养模型 , 为体外研究肺泡Ⅱ型细胞及胎儿肺发育提供实验手段。【方法】采用低浓度胰酶消化 20 d 胎鼠肺组织, 经差速离心和特异性免疫吸附后, 分离、纯化胎鼠肺泡Ⅱ型细胞, 进行原代培养; 根据细胞生长特点、形态特征、细胞表型和肺表面活性特异蛋白 A 的分泌, 用免疫细胞化学染色、透射电镜及酶联免疫吸附法对分离的细胞进行形态学和功能鉴定。【结果】原代培养的肺Ⅱ型细胞 12 h 开始贴壁, 外观呈多边形, 岛状生长。培养的 24~48 ...
王振花, 张建平, 杨冬梓
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Caco-2细胞与肠道菌共培养初建体外模拟肠道共生模型

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2012
【目的】构建体外模拟肠道共生系统,用于评价食源性抗菌药及其耐药菌作用于肠道菌群时对人体健康造成的危害风险。【方法】21d体外培养构建Caco-2细胞三维肠上皮,分成无菌对照组、混合的正常菌群组、沙门氏菌组、混合菌群-沙门氏菌组4组,制备混悬液,各组分别单独和混合培养4h,荧光定量PCR法测试共培养前后各菌16SrDNA菌量变化,电阻仪测试跨膜上皮电阻(TEER)数量;免疫荧光染色观察紧密连接蛋白ZO-1变化,评价三维肠上皮屏障功能的改变。【结果】 在体外共培养模型内 ...
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细粒棘球蚴细胞系培育及其免疫研究

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2001
从细粒棘球蚴病人体内获取生发层和原头节作为培养材料, 采用改良DMEM 培养液和鼠胶原蛋白包被的培养 瓶进行细胞培养, 建立了适合人源细粒棘球蚴细胞体外培养的方法, 并探讨棘球蚴细胞培养的制约因素。首次成功培育出一 株人源细粒棘球蚴细胞系(13G-5), 至1997 年3 月1 日为止该细胞系已培养了140 d, 其间传了21 代。该细胞系主要以成纤 维型细胞为主, 呈贴壁生长;用该细胞系细胞接种于昆明(Km)小鼠腹腔内, 能形成具包囊样结构的类似包囊;接种鼠产生对 囊液抗原的特异性抗体;ELI
陆家海, 李德昌, 程维兴
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乳腺癌患者外周血干细胞诱导为树突细胞的实验研究

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2013
目的乳腺癌患者经动员后采集外周血干细胞,通过体外培养的方法诱导为成熟树突细胞。方法乳腺癌患者注射G-CSF进行干细胞动员3天,血细胞分离机采集外周血干细胞悬液,用Ficoll分离,收集单个核细胞,RP-MI-1640培养基重悬静置30min,贴壁细胞用含GM-CSF 1 000U/ml、IL-4 500U/ml、10%FBS的RPMI-1640培养基继续培养,第4天2/3量换液,补足GM-CSF、IL-4,并加入TNF-α500U/ml,第7天换液,补足细胞因子。结果培养至第9天,收集培养的1-2 ...
韩光宇   +5 more
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人类神经干细胞的长期培养和传代

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2002
【目的】探讨人类神经干细胞的体外培养条件及其传代的方法。【方法】采用机械方法从胎脑中分离神经细胞, 应用N2 培养基进行培养, 碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和表皮生长因子(EGF)刺激细胞扩增;传统方法和对神经球切割 的方法进行传代培养;应用免疫组织化学染色对培养的细胞及其分化的细胞进行鉴定。【结果】从流产胎脑当中成功培养出 人类的神经干细胞, 培养条件下呈悬浮状态生长, 形成神经球, 绝大多数的细胞表达波形蛋白和Musashi1 两种神经干细胞的 标志物 ...
郑佳坤
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SD 大鼠颌下腺腺泡细胞培养及胶原海绵的细胞相容性

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2009
【目的】 研究SD大鼠颌下腺腺泡细胞体外培养方法以及和胶原海绵的细胞相容性,探讨胶原海绵应用于涎腺组织工程支架材料的可行性65377; 【方法】 取新生SD大鼠颌下腺组织,胰酶消化后将细胞于适宜的体外环境培养65380;纯化65380;鉴定,并将鉴定好的颌下腺腺泡细胞移植到胶原海绵上,采用DAPI进行特异性的核染色,荧光显微镜下观察腺泡细胞与胶原海绵的相容情况,评价腺泡细胞与胶原海绵的相容性65377; 【结果】 体外培养的颌下腺腺泡细胞经纯化后能够分泌特异性的淀粉酶,免疫细胞化学淀粉酶抗体阳性染色 ...
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成肌细胞培养的重复肌块法

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2002
【目的】改进体外成肌细胞培养方法。【方法】取20 只小鼠分4 组, 取股骨肌用肌块法进行成肌细胞原代培养, 并重复利用肌块6 次。对培养的成肌细胞进行生长状态观察及免疫的组化鉴定。【结果】重复6 次使用肌块培养的成肌细胞 生长、分化良好;一次差速贴壁纯化后, 经免疫组化方法鉴定, 96 %以上的细胞呈肌细胞特异抗体阳性反应。【结论 ...
陈松林   +3 more
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[Expansion and identification of primary rat aortic vascular stem cells in vitro]. [PDF]

open access: yesNan Fang Yi Ke Da Xue Xue Bao
Ma H   +5 more
europepmc   +1 more source

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