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The role of EGFR/ERK signaling for the self-renewal of germinative cells of Echinococcus multilocularis and its molecular mechanism [PDF]

open access: yes, 2016
多房棘球绦虫(Echinococcusmultilocularis,Em)中绦期幼虫(泡球蚴)在人体内以类似肿瘤的方式进行不断的增殖发育,引发严重的人兽共患泡球蚴病(Alveolarechinococcosis,AE)。泡球蚴不断增殖发育的基础是其生发细胞的自我更新和分化能力,这一特性类似于干细胞。表皮生长因子受体(EGFR)介导的EGFR/ERK信号通路是调控各种干细胞自我更新的主要通路之一,在进化上具有高度的保守性。 本文利用RealtimePCR、WesternBlot、免疫组化荧光和EdU ...
戴梦雅
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人脐静脉内皮细胞分离培养及鉴定技术

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2010
目的探讨人脐静脉内皮细胞(HUVEC)体外分离原代培养的方法,并总结对培养的细胞鉴定方法。方法通过胰酶灌注法从人脐带获取内皮细胞进行分离培养,并采用免疫组化法及光镜和透射电镜观察超微结构鉴定所获得的细胞系。结果分离的HUVEC在体外7-10天左右可长成单层,光镜下胞体为单层铺路石状排列。第VⅢ因子相关抗原的检测为阳性。透射电镜下观察培养的内皮细胞胞浆内可见Weibel-Palade小体。结论用胰酶灌注法是获得脐静脉内皮细胞的有效方法。本方法为血管内皮细胞的研究提供了实验模型。
吴金义, 张蕾, 张秀英, 曲丽梅
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组织工程心脏:电生理特性及长期安全性? [PDF]

open access: yes, 2018
背景:由于供体心脏严重短缺并受制于伦理道德,很多需要心脏移植的患者最终因缺乏供体心脏而死亡。理论上组织工程心脏是解决供体心脏不足的重要手段。目的:回顾分析组织工程心脏构建用的支架材料、种子细胞及细胞接种培养方法,为后期组织工程心脏的构建做参考。方法:由作者检索2004年至2016年Pub Med数据库及SCI(web of science)数据库关于组织工程心脏构建方法研究的文献,共检索文献2 921篇,按照纳入和排除标准进行筛选,共纳入53篇。结果与结论 ...
仝彩玲, 李鸣晖, 齐忠权
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间充质干细胞对B细胞增殖及免疫调节功能的影响

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2019
【目的】研究观察间充质干细胞(MSC)在体外培养体系对B细胞增殖和免疫调节作用的影响。【方法】采用密度梯度离心法分离健康捐献者来源的骨髓30mL。用含100mmol/L胎牛血清的L-DMEM培养基对分离出的MSC进行贴壁培养。培养至第6代时,进行多向分化和细胞表型鉴定。获取健康供者外周血单个核细胞,并通过流式细胞仪分选出CD19+B细胞,进行荧光染料CFSE标记,然后分成单独培养组(CD19+B细胞)和共培养组(按CD19+B∶MSC:=5∶1的比例共培养),两组均采用CpG+CD40L刺激 ...
刘秋莉   +5 more
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Ex vivo expansion and differentiation of rat Meibomian gland progenitor cells [PDF]

open access: yes, 2017
目的:睑板腺功能障碍(Meibomianglanddysfunction,MGD)尚无有效的药物治疗方法,通过优化大鼠睑板腺祖细胞(ProgenitorcellsofMeibomiangland)的培养方法,研究睑板腺祖细胞体外克隆培养、扩增、分化的特点及表型,可提供一种有效的体外药物筛选工具。 方法:从8周龄大鼠的眼睑中分离出睑板腺,通过酶消化法将其消化成为睑板腺单个细胞,与丝裂霉素处理过的3T3-L1细胞混合均匀后接种,用含激素的上皮培养基 ...
左程友
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多核白细胞弹性蛋白酶对人角膜基质细胞MMP-2、MMP-9表达的影响

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2010
目的观察多核白细胞弹性蛋白酶与白细胞介素-1α对人角膜基质细胞表达的MMP-2、MMP-9的影响,进而探讨角膜溃疡的发生机理。方法体外培养人角膜基质细胞,在培养液中添加或不添加多核白细胞弹性蛋白酶或白细胞介素-1α,培养5天,通过明胶酶谱分析的方法测定培养上清中的MMP-2和MMP-9的表达。结果体外培养的人角膜基质细胞无任何刺激下可释放MMP-2;白细胞介素-1α可加强并激活MMP-2的表达,同时可诱导MMP-9前体的释放;多核白细胞弹性蛋白酶在白细胞介素-1α诱导下可完全激活前体MMP ...
刘泊明, 张冰洁, 杨贲, 郝继龙
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Entry and Molecular Regulation of White Spot Syndrome Virus (WSSV) into Crayfish Hpt cell [PDF]

open access: yes, 2014
白斑综合征病毒(Whitespotsyndromevirus,WSSV)是对虾的主要病原,该病毒致死率高、传染性强、宿主范围广,是水生甲壳类动物中最为严重的病毒性病原之一。因此,加深对WSSV感染致病机理的理解,寻找高效抗病毒防治方法,意义重大。培养细胞是病毒感染研究的有力工具,在甲壳动物原代细胞培养研究中,螯虾造血组织干细胞(Haematopoietictissuestemcell,Hptcell)—Hpt细胞培养较为稳定,是WSSV感染研究的首选。本研究以红螯螯虾 ...
陈荣元
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ES细胞源表皮样干细胞与胶原海绵体外构建组织工程化皮肤 [PDF]

open access: yes, 2006
【目的】 探讨以ES细胞源表皮样干细胞构建组织工程皮肤的方法,为构建新的组织工程皮肤奠定基础。【方法】 先把成纤维细胞放置于胶原海绵真皮支架内,体外培养2d,再放置ES细胞源表皮样干细胞,体外培养3d,观察其形态和进行免疫组化检测。【结果】 成纤维细胞与ES细胞源表皮样干细胞均在真皮支架内黏附,免疫组化表明ES细胞源表皮样干细胞仍呈Bl整合素强阳性和CK15、CK19阳性。【结论 ...
李海标, 程树军, 黄锦桃
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HCV对NKT细胞作用的研究

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2006
目的研究HCV对NKT细胞的作用,探讨NKT细胞在HCV患者体内的免疫学功能。方法选择丙型肝炎患者25例,健康志愿者25例,应用流式细胞仪检测外周血中NKT细胞的含量。分离出外周血中单个核细胞并在不同刺激物作用下培养,用流式细胞仪检测NTK细胞的含量,将培养前结果和培养后结果进行对比分析,同时检测健康人群组和丙型肝炎患者组外周血中IL-4的含量。结果丙型肝炎患者组外周血中NKT细胞的含量明显低于健康人组外周血中NKT细胞的含量,两者结果比较有显著差异 ...
赵大力   +5 more
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体外培养大鼠耻骨联合软骨细胞的生物学特性 [PDF]

open access: yes, 2006
[目的]通过对大鼠耻骨联合软骨细胞的分离及体外培养,观察其生长、表型等一般生物学特点.[方法]采用胰蛋白酶、Ⅱ型胶原酶序贯消化法,从SD大鼠耻骨联合软骨组织中分离出软骨细胞,用含150mL/L胎牛血清的DMEM/F-12培养液原代和传代培养.分别以2g/L胶原酶消化2、6、12 h,分析不同消化时间获取的细胞数量及生长情况.对6 h消化组细胞进行Ⅱ型胶原免疫组化染色,并观察第1、4、7代的生长曲线.[结果]经胶原酶消化2、6、12 h后,平均每100mg耻骨联合软骨获取的原代细胞数之间有统计学显著差异 ...
张志光, 葛成, 项鹏
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