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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2008 目的建立大鼠骨髓间质干细胞（rat mesenchymal stemcells,rMSCs）体外分离、纯化及扩增的方法及诱导rM-SCs向成骨分化,并进一步研究,提供理想的种子细胞。方法采用贴壁筛选法分离rMSCs,并通过不断传代进行纯化和扩增培养,检测rMSCs生长周期,绘制细胞生长曲线。检测碱性磷酸酶活性,钙结节的形成。结果rMSCs在体外分离培养扩增,rMSCs形态呈长梭形,细胞周期显示第3代MSCs约有81.48%的细胞处于G0/G1期,细胞生长曲线呈S形。经地塞米松、β-甘油磷酸钠 ...
罗宗键 +4 more
doaj
On Teaching Reform and Practice at Biochemical Engineering Experiments [PDF]
, 2010 本文从工科专业实验课教学的重要性入手,阐述了进行生物工程专业实验课教学改革的必要性和重要意义,介绍了生物工程实验教学改革的相关体会。This article,based on the importance of the engineering experiments teaching,expounds the necessity and importance of the reform in Biochemical Engineering Experiments Teaching,and also ...
曹志凯 +3 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2003 目的 制备人TRAIL配体胞外区基因工程蛋白。方法 应用RT PCR技术从激活的人外周血淋巴细胞总RNA中扩增TRAIL配体胞外区cDNA ,克隆入PCR2 .1 载体 ,测序验证后用基因重组法构建了TRAIL配体胞外区和组氨酸盒的原核表达质粒pQE hTRAIL。将重组质粒转入大肠杆菌M15中表达 ,经 1mmol LIPTG在 37℃条件下诱导 4h ,亲和层析柱纯化。用SDS -PAGE电泳和Westernblot鉴定表达产物。结果 所表达融合蛋白为人TRAIL配体胞外区分子 ,分子量 30kD ...
路丽明 +8 more
doaj
成人骨髓间质干细胞分化为神经元样细胞及与凋亡的关系 [PDF]
, 2004 【目的】探讨体外诱导成人骨髓间质干细胞(humanmesenchymalstemcells,hMSC)向神经元样细胞分化过程中分化与凋亡的关系,为进一步研究延长神经元样细胞的存活时间提供基础。【方法】从成人骨髓分离MSC,培养扩增。以β-巯基乙醇和参芪液诱导分化,于诱导后1、3、5h分别进行免疫组化鉴定神经元烯醇化酶(NSE)、神经丝蛋白(NF)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达,计数神经元样细胞,计算分化率。采用TUNEL方法分别检测诱导后1、3、5h的细胞凋亡率,并分析两者是否相关。【结果 ...
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2000 【目的】为探索共刺激分子 B7-1 增强 HBsAg 真核表达载体基因免疫的效果,并用于消除乙肝免疫耐受。【方法】 用高保真 PCR 法扩增目的基因片段 B7-1 及带接头和启动子的 IRES-HBs 基因片段,亚克隆到 pBluescript KS+载体中测序,再 克隆到逆转录病毒载体 PLXSN 中。【结果】所扩增的目的基因片段经测序证实, 未发现序列有改变。先将 B7-1 通过 EcoR Ⅰ 、Xho Ⅰ插入 plxsn 中,构建成 plxsn-B7-1, 再用 Xho Ⅰ 、 BamHⅠ将 ...
周 智 +4 more
doaj
, 2002 摘 要:【目的】用三七总皂甙(total Panax notoginseng saponins)在体外定向诱导SD 青年鼠骨髓间质干细胞(mesenchymal stem cell , rMSC)分化为神经元样细胞。【方法】用低糖DMEM 冲洗骨髓腔, 收集骨髓细胞悬液, 接种在塑料培养瓶中。 经体外扩增、纯化, 选用第5 代后的间质干细胞进行诱导分化。用10 μg/ L bFGF 预诱导24 h, 更换成含三七总皂甙的无血清 培养基DMEM 诱导间质干细胞分化为神经元样细胞。用免疫组化SABC ...
撒亚莲, 李海标
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Guangtongxin yanjiu, 1982 IaGaAs和InGaAsP异质结雪崩光电二极管的性能受到隧道效应、微等离子体和杂质等的严重影响。采用光吸收区电倍增区分离的结构。以宽能隙的InP为电倍增区,窄能隙的IaGaAs或InGaAsP为光吸收区,P型扩散杂质低于临界值ND+,以及雪崩区的适当厚度,就能减小或避免隧道效应产生。器件的微等离子体可以通过采用低位错或无位错的衬底,生长质量优良的外延层。扩散杂质均匀,选用平面保护环或倒台面型来减少或消除。从而得到高性能的雪崩光电器件。现在雪崩增益高于3000,暗电流为2pA（0.5VB ...
胡永林
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胎肝造血期胎肝间充质干细胞的分离、培养及生物学特性 [PDF]
, 2005 【目的】分离、培养人胎肝造血期胎肝间充质干细胞(MSC) , 研究其生长特性及表面标记的表达。 【方法】取孕16～20 周人胚胎肝脏, 分离培养胎肝MSC, 传代培养成系并检测其增殖能力, 应用流式细胞术、免 疫荧光方法检测其造血相关表面标记和细胞蛋白表达。【结果】人胎肝MSC 呈成纤维样形态, 指数生长期倍增 时间约为16h, 细胞增殖26.5 倍。传代15 次仍有94.18%的细胞处于G0/G1 期。流式细胞仪检测结果显示人胎 肝MSC 表达CD29、CD44、CD105、CD106
吴北燕 +4 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2008 目的克隆EB病毒早期蛋白p54的编码基因BMRF1,构建原核表达载体,为相应蛋白的表达和应用奠定基础。方法以含EB病毒的B95-8细胞培养上清为模板,PCR扩增出BMRF1基因。PCR产物经BamHⅠ和XhoⅠ双酶切后克隆至原核表达载体pGEX-5T,用双酶切和DNA测序鉴定重组质粒。结果PCR扩增的特异性片段长度为1 233bp,以此构建的重组质粒pGEX-5T-BMRF1双酶切的片段大小与预期符合,重组克隆外源基因的测序结果与GenBank中的EB病毒BMRF1基因cDNA序列一致 ...
伊强 +4 more
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Feasibility study on lentiviral RNAi therapy for HIV/AIDS [PDF]
, 2008 艾滋病（AIDS）是一种危害极大的全球性疾病，在全世界范围内严重危害人类的健康。因此，对AIDS防治研究就具有极其重要的意义。随着耐药型艾滋病病毒（HIV）病毒株的大量出现及现有治疗方式一些难以克服的缺陷，近年来对HIV/AIDS基因治疗的研究得到了越来越广泛的重视及发展。以慢病毒载体系统结合RNA干扰（RNAi）等新兴技术的HIV基因治疗目前还存在着一系列亟待解决的问题：难以测定治疗性慢病毒滴度；缺乏有效的用于治疗效果验证的动物模型；治疗靶细胞的选择尚存在一定争议。针对这些治疗过程中重要的问题及难点 ...
许辰煜
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