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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2012 【目的】 探讨小分子药物(N-乙酰半胱氨酸,NAC)对CD4+中央记忆性T细胞(TCM)体外扩增的影响从而改善过继免疫治疗的效果?【方法】 体外分离人类的外周血CD4+ T淋巴细胞,将细胞分为两组(实验组和对照组)进行细胞培养,实验组加入N-乙酰半胱氨酸后,通过流式细胞仪和细胞计数仪对两组细胞中的CD4+ TCM的扩增情况进行检测?【结果】 在CD4+ T细胞体外扩增实验中,10 mmol/L的NAC为促进细胞扩增的最佳浓度;NAC对TCM在CD4+ T细胞中的比例无明显的影响;在CD4 ...
doaj
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2007 目的观察不同龄小鼠骨髓间充质干细胞在体外分离、培养、扩增的过程,并对其生物学特性进行初步比较分析,为下一步实验提供依据。方法选取出生1周、8周、16周的健康昆明小鼠,分成新生、青年、成年三组,采用贴壁法分离培养骨髓间充质干细胞,进行细胞形态学和贴壁率观察,绘制生长曲线。结果各组细胞约在9-12天80%-90%长满培养瓶底,融合成单层,传代后的骨髓间充质干细胞形态更加单一,为排列更加有序的成纤维细胞样细胞。贴壁率的观察和生长曲线显示,在相同的培养条件下,新生小鼠细胞增殖最快,细胞可扩增能力最强 ...
杨光 +4 more
doaj
, 2009 大多数肝脏疾病终末期并发严重肝功能障碍,肝移植是治愈的唯一办法。但是临床可供移植肝来源短缺、移植伦理以及移植后排异问题,限制了肝移植在临床的广泛应用。细胞疗法的出现为肝脏疾病治疗提供了另一种可选途径。干细胞替代治疗或者刺激体内肝脏细胞再生是细胞治疗的主要目标[1]。哺乳动物肝脏可以自身修复或再生,卵圆细胞在肝脏修复过程中扮演重要作用。他们可以向肝实质细胞以及向胆管细胞分化[2]。但在损伤超过肝脏自身修复能力时,我们就希望其他来源的干细胞能替代卵圆细胞修复受损肝脏。到目前为止,其他非肝来源的间充质干细胞 ...
殷莉波, 王效民
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, 2002 报告作者1998 年至2000 年有关日本血吸虫(大陆株)成虫基因表达谱研究的结果, 主要包括:已测定551 条 EST , 其中519 条EST 已送入国际基因数据库(GenBank/ dbEST), 并获得了GenBank 的登录号。经同源整合后, 519 条EST 序列归类为388 个基因序列, 其中, 24 条(6.19%)为日本血吸虫已知基因序列;18 条(4.64%)EST 与曼氏血吸虫已知基因序 列同源, 90 条(23.19 %)EST 与其它生物的已知基因序列同源 ...
余新炳 +10 more
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野生动物学报, 2012 由于火烈鸟在外观上雌雄极为相似,很难用常规方法对其性别进行鉴定。本试验首次确立了利用PCR技术对火烈鸟性别进行鉴定的分子标记方法。从火烈鸟血液中提取总基因组DNA,针对性染色体上的CHD基因和EE0.6序列,筛选了4对引物进行特异性扩增,其中3对引物组合成2个组（A/B和B/C）进行多重PCR。结果表明,3组引物都在雄性个体中扩增出1条片段,在雌性中扩增出2条片段;待测群体中雄性个体11只,雌性个体6只。经检验,利用3组引物都能准确鉴定火烈鸟性别,为该物种在分子水平上的性别鉴定奠定了基础。
李文斌 +5 more
doaj
Research of Pfu polymerase improvement for Real-time fluorescent quantitative PCR [PDF]
, 2017 自从1988年Saiki等将耐热性的Taq聚合酶引入PCR反应后，极大地推动了PCR技术的推广，也带动了实时荧光定量PCR（qPCR）技术的兴起，分子生物学发展日新月异。随着技术的推广与应用，人们也逐渐发现了Taq聚合酶自身存在的缺点，其保真性差不适合高保真的PCR，复杂样本扩增能力差需要对样本进行处理以及体系的优化等等。而B族的Pfu聚合酶具有高保真性、高行进性和强耐干扰能力，但是不具有5’-3’外切活性且强3’-5’外切活性会水解游离探针影响荧光增益信号检测而不能用于qPCR ...
陆龙飞
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The study of Angiopoietin -1 gene-modified endothelial progenitor cells transplantation in repairing rat balloon injury artery [PDF]
, 2011 目的：体外培养大鼠血管生成素－1(Angiopoeitin-1，Ang-1)基因修饰内皮祖细胞(endothelialprogenitorcell，EPC)，即(Ang-1-EPCs)。构建股动脉球囊损伤的大鼠模型。探讨Ang-1基因修饰的EPCs对大鼠急性球囊损伤动脉血管的修复作用。 方法：大鼠股动脉经球囊损伤后2天，扫描电镜观察其内皮损伤情况。动物实验分三组：对照组、单纯损伤组、细胞移植组；细胞移植组包括EPCs移植组（n=16），PNL-EPCs移植组（n=16）及Ang1-EPCs移植组（n ...
韩潇
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Effect of Graphene on Polymerase Chain Reaction and Its Mechanism [PDF]
, 2012 聚合酶链式反应（PCR）是现代分子生物学核心技术之一，它能够在体外扩增DNA，并能使微量的模板在数小时内以指数形式扩增数百万倍。但在实际运用中，PCR技术还存在一定的限制，如复杂背景下的非特异性产物、扩增效率等问题。随着纳米技术的发展，纳米技术和生物技术的融合引起了人们的关注，为解决生物技术难题提供了契机。石墨烯具有高比表面积、良好的热传导性和生物相容性，在生物医学领域已经得到了广泛的应用。本论文研究了石墨烯对PCR反应的影响，并探讨其影响机制。主要研究结果如下： 1.石墨烯的制备：以天然石墨为原料 ...
贾静
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Generation of Corneal Epithelial-like Cells from Human Induced Pluripotent Stem Cells (iPSCs) Derived from Ocular Surface Cells [PDF]
, 2011 目的诱导患者来源的眼表细胞产生iPS细胞，并诱导这种病人特异的iPS细胞向角膜上皮干细胞定向分化。 方法采用患者来源的翼状胬肉基质成纤维细胞（PSF）和人结膜上皮细胞（HCjE），通过逆转录病毒载体介导将OCT4、SOX2、c-MYC和KLF4等4种转录因子导入细胞中，经过一系列的条件诱导过程，诱导这两种细胞转化成iPS细胞。然后采用碱性磷酸酶染色、RT-PCR检测、免疫荧光染色、基因芯片分析等方法对所诱导的iPS细胞进行鉴定。最后采用IV型胶原加KSFM培养基单独培养 ...
方小为
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2005 【目的】构建人神经营养素-3(neurotrophin-3,NT-3)受体(即酪氨酸蛋白激酶受体C, tyrosine protein kinase C, TrkC)基因重组的腺病毒表达载体。【方法】从人脑组织mRNA 中扩增TrkC 基因全长cDNA, 定向克隆于穿梭质粒pShuttle 中, 获得一个带有CMV 启动子的表达盒。再将表达盒与腺病毒骨架DNA ( Adeno-X viral DNA) 体外连接, 形成重组腺病毒质粒(pAd-TrkC)。用pAd-TrkC 转染人胚肾293 ...
王俊梅 +6 more
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