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乌鳢免疫球蛋白M重链和免疫球蛋白轻链的克隆与特征分析 [PDF]
应用RACE-PCR方法克隆并鉴定了乌鳢免疫球蛋白M(i mmunoglobulin M,Ig M)重链(H)和免疫球蛋白轻链(L)全长cDNA。乌鳢IgH cDNA全长1 912个核苷酸(nt),包含1 797 nt的开放阅读框,编码598个氨基酸(aa)。IgH恒定区(CH)均包含1对保守的半胱氨酸残基形成链内二硫键,其中CH1区氨基末端存在保守的半胱氨酸残基与轻链形成链间二硫键,4个推测的N-糖基化位点(NXT和NXS)则分别位于CH1、CH2和CH4 ...
周秀霞, 贾伟章
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目的: 制备从尖吻蝮蛇蛇毒中分离的纤溶因子的单克隆抗体, 为克隆基因提供特异性的探针。方法: 将纤溶因 子免疫 Balb/C 小鼠,取脾细胞与 SP 2/0 骨髓瘤细胞融合, 筛选稳定分泌抗体的细胞株。采用血纤维蛋白平板法,观察单克隆 抗体能否抑制纤溶因子的纤溶作用。结果: 获得 2 株稳定分泌单克隆抗体的细胞株。 Western 印迹显示该单克隆抗体能特异 地与纤溶因子结合,与其它蛋白无交叉反应, 此外,这 2株单克隆抗体具有抑制纤溶因子溶解人血纤维蛋白的作用。结论: 这 2 ...
邱鹏新 黎明涛 苏兴文 陈家树 颜光美
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The establishment of arsenite-transformed cells (TLECs) and the study on methylation of non-CpG island promoter repressing NQO1 expression in TLECs [PDF]
摘 要 砷及其衍生物广泛分布自然环境并对人类健康构成危害。虽然流行病学研究已经证实长期的砷暴露能诱发多种癌症,但对砷致癌的确切机制目前远未被阐明,需要进一步深入地探索。砷诱导肿瘤形成是一个长期和复杂的过程,相关研究工作首先需要一个合适的细胞模型。为此,我们以低浓度亚砷酸钠长时间处理正常的大鼠肺上皮细胞系(LECs)诱导其转化,再通过一系列的指标实验验证,成功地建立砷转化细胞模型TLECs(Arsenite-transformedLECs),从而为下一步的研究奠定基础 ...
黄宁宇
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Cloning and Stress Response of the Cold-Regulated Genes of Adenine Nucleotide Translocase 2, the Chaperonin Containing Tailless Complex Polypeptide α and Stearoyl-CoA Desaturase in the Mud Crab, Scylla paramamosain [PDF]
腺苷酸转移酶(adeninenucleotidetranslocase,ANT),属于线粒体转运蛋白超家族,是线粒体中最丰富的蛋白质之一,主要作用是介导ADP/ATP在细胞质和线粒体基质之间的运输。伴侣素包含T型复合体(thechaperonincontainingtaillesscomplexpolypeptideα,CCTα)是几乎存在所有生物体中的一类分子伴侣,负责细胞内蛋白的组装和折叠。内质网内的硬脂酰去饱和酶(stearoyl-CoAdesaturase,SCD),是一类含铁离子的限速酶 ...
于坤
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中国水产养殖的成就已被认为是中国对当今世界发展的一个重大贡献.近20年来,基因组学和其他遗传技术的进步显著推动着水产动物分子生物学和遗传育种学基础研究的发展.进入21世纪后,一些主要水产动物的全基因组测序已经完成或接近完成.本文综述了包括基因组技术、体细胞核移植和干细胞技术在内的水产遗传改良技术的一些重要突破性进展,概述了包括生殖、性别、生长、抗病、耐寒和耐低氧这些重要经济性状的分子基础,列出了一系列与这些经济性状相关的候选基因.最后,介绍了几个特别是中国水产动物遗传改良在水产养殖中的应用事例 ...
朱作言, 桂建芳
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目的制备针对超嗜热古菌组蛋白HPhA的单克隆抗体并进行鉴定。方法以重组纯化蛋白HPhA为抗原,用聚乙二醇(PEG)法制备杂交瘤细胞,ELISA检测杂交瘤细胞分泌抗体的效价和类型,Western blotting分析抗体的特异性。结果获得3株稳定分泌抗HPhA蛋白的单克隆抗体(MAb),3株单克隆抗体1A12、3C11、3B4分别属于IgG1、IgM和IgG2b亚类。ELISA和Western blotting结果显示,单克隆抗体3B4能特异性结合HPhA及PEA-HPhA重组蛋白 ...
张玲, 郑艳军, 朱平, 张国利
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New Devices for Droplet Generation and Their Application in Single-Molecule Amplification and Single Cell Manipulation [PDF]
单分子、单细胞是生物体系的最基本单位。分子之间的不同决定了其引发反应的不同,细胞之间的不同决定了生命活动的不同。因此,深入研究单分子和单细胞对人们探索生命活动本质是十分必要的。与传统研究对象不同,单个分子、单个细胞的研究需要更加精准的研究平台,从而避免大背景的干扰,提高信噪比。微流控芯片,是一种将常规反应小型化、集成化新型的技术。其具有反应迅速、反应体积小、信噪比高、通量高、结果精准、试剂节约等特点,这些优点十分符合目前对单分子、单细胞研究的要求。因此在近些年来,微流控芯片技术在单分子 ...
李星锐
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【目的】扩增日本血吸虫26 ku 谷胱甘肽硫-转移酶(Sj26GST)基因片段, 构建其重组原核载体, 以研制SjGST 重 组克隆。【方法】根据已知基因序列设计一对引物, 运用RT-PCR 技术扩增Sj26GST 目的基因cDNA 片段, 将其克隆到pBluescript( KS)质粒中, 并经酶切、PCR 和测序鉴定。【结果】获得GS T-pBluescript(KS)重组克隆。【结论】本实验获得Sj26GST 重 组克隆, 为进一步研制基因工程蛋白疫苗作准备。
李 焱 +7 more
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采用生物信息学方法首次对非洲爪蟾短型肽聚糖识别蛋白(xePGRP-S)基因进行了克隆,并对其在胚胎发育和成年爪蟾各组织中的表达状况进行了分析。xePGRP-ScDNA全长720bp,开放阅读框为549bp,编码182个氨基酸。序列比对显示xePGRP-S与其他物种PGRP-S的序列相似性在42.4%—50.5%之间。RT-PCR显示在非洲爪蟾胚胎发育至3d时可以明显检测到xePGRP-S的表达,之后呈持续性表达,且在所检测的心、肝、脾、肺、肾 ...
昌鸣先 +4 more
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Preparation and Preliminary application of Dextran Quantitative Detection Kit [PDF]
右旋糖酐(Dextran),又名葡聚糖,由Leuconostocmesenteroides等微生物产生的酶聚合葡萄糖而成或葡萄糖通过化学聚合而成。右旋糖酐广泛应用于医药、食品、化工等领域。在医学领域的应用主要包括:作为血浆体积扩张剂,作为抗凝剂,以及作为渗透压调节剂用于相关的疾病治疗。一般机体组织细胞并不能直接利用右旋糖酐,主要从尿液排出,右旋糖酐使用过量会引起急性肾衰竭、充血性心衰竭、肺水肿及血小板减少等毒副作用。因此,监测血液、尿液的右旋糖酐含量是指导右旋糖酐用量的重要指标 ...
王生育
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