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【目的】构建反义c-myb 重组逆转录病毒载体并建立其包装细胞株。【方法】采用RT-PCR 方法, 获取目的基因, 通过TA 克隆方法克隆入pUC19, 再反向亚克隆入逆转录病毒载体pDOR 中。采用DOTAP 法将重组逆转录病毒载体转入包 装细胞, 以NIH3T3 细胞为靶细胞测定产病毒滴度。【结果】序列测定结果与GenBank 中序列一致。c-myb 基因片段已定向 克隆入pDOR。细胞转染表明, 已形成稳定的包装细胞株PA317/ pDOR-my b, 产病毒滴度达5.2 ×104 ~ 9 ...
马会慧 +5 more
doaj
[Angioimmunoblastic T-cell lymphoma with monoclonal B cell and plasma cell hyperplasia]. [PDF]
Yan WW +8 more
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【目的】克隆并测定恶性疟原虫海南株(FCC1/ HN)肝期抗原1 基因(LS A-1 )3′端序列, 比较FCC1/ HN 株与国 外分离株LS A-1 3′端序列的差异。【方法】应用PCR 技术从FCC1/HN 株基因组DNA 中扩增LS A-1 3′端序列, 用T-A 克隆 法将其克隆入pMD18-T 载体。阳性克隆的重组质粒经酶切及PCR 扩增鉴定后, 用双脱氧链末端终止法进行基因序列测定。 应用DNAS TAR 软件进行不同分离株LS A-1 3′端序列的同源性分析。【结果】PCR ...
单志新 +5 more
doaj
[Clonality relatedness and molecular characteristics of Richter transformation]. [PDF]
Sha YQ +15 more
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目的利用噬菌体展示肽库筛选技术获得模拟人晚期氧化蛋白产物(advanced oxidation protein products,AOPP)表位的序列,探索该表位的分布与表达。方法以抗晚期氧化蛋白产物多克隆抗体为靶,对噬菌体随机12肽库进行免疫亲和筛选,ELISA鉴定阳性噬菌体克隆特异性;对阳性克隆进行DNA测序并推导其氨基酸序列,利用生物信息学技术检索其分布与相似性。结果经3轮亲和筛选获得18株与靶分子特异结合的阳性噬菌体克隆,阳性率为62.07%。竞争ELISA结果表明 ...
侯晓睿 +4 more
doaj
[Progress in clonal evolution of multiple myeloma]. [PDF]
Wang Y, An G, Qiu LG.
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人DNA 聚合酶β 全长cDNA 的克隆、鉴定及真核表达载体的构建
【目的】克隆人类DNA 聚合酶(pol-β)基因全长cDNA, 构建该基因的真核高效表达载体。【方法】抽提人胚肺纤 维细胞HLF 总RNA 进行RT-PCR 扩增, 用pGEM-T 载体经T/A 克隆、DNA 测序确定后, 用双酶切将pol-β 全长cDNA 定向 克隆到绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-C1 , 转染大肠杆菌DH5α, 筛选阳性克隆, 双酶切鉴定重组质粒。【结果】经RT-PCR 获 得1.03 kb 的产物, 经DNA 测序, 确定所扩增片段为人类pol-β 基因全长cDNA ...
杜柳涛, 高 昆, 何 云
doaj
[Effect of clonal hematopoiesis in remission on hematopoiesis recovery in patients with NPM1 mutated acute myeloid leukemia after chemotherapy]. [PDF]
Wang LL, Chen SN.
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【目的】研制抗人BLyS 单克隆抗体, 以进一步探讨人BLyS 与自身免疫性疾病的关系。【方法】将人BLy S 基因 克隆到融合蛋白原核表达载体pGEX-4T-1 中, 构建重组质粒pGEX-4T-1/hBLyS , 用此重组质粒转化大肠杆菌BL21, 加IPTG 诱导大肠杆菌表达GST-hBLy S 融合蛋白, 用此融合蛋白免疫BALB/c 鼠, 取鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合, 用ELISA 法筛选阳 性克隆, 用免疫印迹和流式细胞仪进一步鉴定抗体的特异性。【结果】重组质粒双酶切结果和DNA ...
张志方
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MiR-133b regulates the proliferation, colony formation, and invasion of bladder cancer cells via inhibiting SOX4. [PDF]
Zhong M, Jiang F, Song L, Nie M, Lan G.
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