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人苯丙氨酸羟化酶基因克隆及其原核表达质粒的构建

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2007
[目的]克隆健康人苯丙氨酸羟化酶基因全长cDNA序列,构建并鉴定其原核表达质粒pTrcHisB/PAH。[方法]采用RT-PCR方法从人肝组织中扩增PAH基因全长cDNA,T/A克隆到pMD18-T载体中,双酶切后将cDA亚克隆入pTrcHisB载体,构建pTrcHisB/PAH质粒,经限制性内切酶鉴定并测序。[结果]人PAH基因cDNA正确克隆入pTrcHisB表达载体,与Genebank中PAH基因序列一致。[结论]成功构建pTrcHisB/PAH表达质粒 ...
张志   +8 more
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克隆浅释 附视频

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 1997
克隆浅释于永利作者单位:130021长春,白求恩医科大学免疫学教研室关于克隆羊的报道在全世界引起了轩然大波,一时间“克隆”成了一个十分风行的词。本文将从医学的角度对克隆做一简要的解释。克隆(clone)一词来源于希腊文(Klon),指从一个个体经无性...
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人H-FABP单克隆抗体制备和纯化及其特性鉴定

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2008
目的制备人心肌型脂肪酸结合蛋白(Heart type fatty acid-binding protein;H-FABP)单克隆抗体。方法(1)应用淋巴细胞杂交瘤技术,将重组人H-FABP腹腔注射免疫BALB/C小鼠。(2)将鼠脾细胞与鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)融合、培养。通过HAT和间接ELISA法筛选、鉴定制备稳定分泌抗人H-FABP单克隆抗体的杂交瘤细胞株。(3)利用Protein G Sepharose 4 Fast Flow亲合纯化体内诱生法制备的腹水抗体,并对抗体特性进行鉴定 ...
许淑芬   +5 more
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单克隆多克隆抗体不同标记ELISA技术对HBeAg/抗-HBe检测评估

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1993
采用抗-HBe单克隆和多克隆抗体进行生物素或酶标记作酶免疫试剂检测HBeAg及抗-HBe,结果显示单克隆抗体(McAb)敏感性高于多克隆抗体(PcAb)。生物素试剂在检测HBeAg的稀释度为1:5000,比酶标法ELISA高1倍多,与RIA相当,且稳定性优于RIA。生物素标记抗体至少1年内保持效价不变,1年内批间变异系数为5.8%,相同标本重复检测变异系数为5.94%,是一种较理想的检测e系统的方法之一。另外,研究发现一孔一期法同时测HBeAg/抗-HBe时,无论标记抗体为单克隆或多克隆 ...
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肾移植受者多反应性抗体与HLA抗体的相关性研究

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2016
目的从单克隆抗体水平研究同种异体肾移植受者多反应性抗体与HLA抗体的相关性,探讨多反应性抗体是否为HLA抗体尤其是非供体特异性抗体产生的原因之一。方法从肾移植患者外周血细胞及手术切除的移植肾组织中分离出B淋巴细胞,并于体外永生化培养获得单克隆B细胞,分别检测B细胞分泌的抗体对HLA抗原及凋亡细胞的反应性。结果共获得107个B细胞克隆,检测发现每个B细胞克隆在体外培养过程中均分泌抗体。其中有4个单克隆B细胞分泌的抗体可以与多种HLA抗原发生反应,而这些HLA抗原之间并非都有共用的抗原决定簇。进一步研究发现,
荣春书, 王伟刚, 连鑫, 高宝山
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DMD基因第50号和第51号内含子的克隆和测序

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1996
提要用D M D c l 〕N A S 探针从假肥大型肌营养不良( uD e h e n n e m u s e u la r d y s t r o p h犷, D M D ) 基因的Y A C 克隆的c o s m id 亚克隆库中筛选到9 个阳性e o s m id 克隆, S o u t he r n 杂交鉴定e o s m id c O4 61 含D M D 基因的第51 号外显子, 将该c os m 记亚克隆于p V C l ls 中, 获得含D M D 基因第50 和51 ...
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tTS/rtTA系统下调目的基因基础表达的细胞模型研究

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2006
[目的]构建带有肝脏特异性启动子和tTS沉默子的四环素调控系统,观察其在人HepG2细胞内的表达,建立严密型四环素调控系统的HepG2细胞模型.[方法]通过二次分子克隆构建重组真核表达质粒载体pliv7-rtTA-tTS-Neo,用脂质体法将质粒pliv7-rtTA-tTS-Neo及pliv7-rtTA-Neo转染人HepG2细胞,经G418筛选后的克隆用有限稀释法进行单克隆化,克隆扩增后瞬时转染pTRE-Luc质粒,强力霉素(1 mg/L)诱导表达后检测荧光素酶活性 ...
张若霜, 帅丽芳, 赵勇, 陈系古
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日本血吸虫成虫抗原基因的克隆和序列分析

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1997
摘 要 本实验在用感染兔血清和单克隆抗体对日本血吸虫(大陆株)成虫cDNA 表达文库进行筛选的基 础上, 对筛选出的阳性克隆插入片段DNA 进行了亚克隆和序列分析。
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呼吸道合胞病毒多克隆抗体的制备及临床意义

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2006
目的制备呼吸道合胞病毒(RSV)多克隆抗体,为RSV的检测提供条件。方法用RSV颗粒抗原免疫新西兰家兔3只,采用细胞病变中和实验检测RSV多克隆抗体。结果细胞病变中和实验结果显示,本研究制备的RSV多克隆抗体在1∶1102的稀释度能保护50%的Hela细胞免受RSV的攻击,而阴性对照血清不能保护细胞对病毒的感染。结论RSV颗粒抗原免疫新西兰家兔可成功制备RSV多克隆抗体,1∶1102稀释的血清可保护50%的细胞不产生病变。
范清, 李洪源, 田文静
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抗H7N9流感病毒的单克隆抗体与胃组织的交叉反应研究

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue
目的 筛选鉴定与胃组织交叉反应的抗H7N9流感病毒的单克隆抗体,初步探讨流感病毒感染会引发肠道相关疾病的可能致病机制。方法 利用H7N9流感病毒制备了大量的单克隆抗体,对制备的单克隆抗体运用ELISA方法进行亚型和效价测定,免疫组化对制备的单克隆抗体与组织的反应性进行筛选,巢式PCR分子生物学技术克隆单克隆抗体轻重链可变区序列。结果 制备的单克隆抗体H7N9-71和H7N9-78均能与H7N9抗原特异性结合,抗体效价达1∶10~5,免疫组化结果表明H7N9-71、H7N9 ...
孙晶莹   +6 more
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