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[目的]构建带有肝脏特异性启动子和tTS沉默子的四环素调控系统,观察其在人HepG2细胞内的表达,建立严密型四环素调控系统的HepG2细胞模型.[方法]通过二次分子克隆构建重组真核表达质粒载体pliv7-rtTA-tTS-Neo,用脂质体法将质粒pliv7-rtTA-tTS-Neo及pliv7-rtTA-Neo转染人HepG2细胞,经G418筛选后的克隆用有限稀释法进行单克隆化,克隆扩增后瞬时转染pTRE-Luc质粒,强力霉素(1 mg/L)诱导表达后检测荧光素酶活性 ...
张若霜, 帅丽芳, 赵勇, 陈系古
doaj
Genetic Analysis on Grain Shape and Mapping, Cloning and Characterizing of Major Grain length Gene in rice [PDF]
水稻是世界上最重要的禾谷类作物之一,提高水稻产量和改善稻米品质是水稻遗传与育种研究的永恒主题。水稻粒形是粒长、粒宽、长宽比及粒厚的综合性状,是稻米外观品质的重要指标,同时对稻米的碾磨品质、食味品质及产量均有重要影响。厦门大学水稻遗传育种研究室长期致力于大粒优质水稻新品种的遗传与育种研究,前期采用60Co-γ射线辐照水稻成熟花粉诱变方法,获得了一批遗传上稳定的长粒大粒水稻种质材料并广泛应用于优质籼稻育种中。为了解这些大粒材料谷粒性状的遗传基础,本研究选择其中的三个大粒品系JF171、JF178 ...
黄荣裕
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窖蛋白-1(Cav-1)是胞膜窖的主要结构蛋白,可与多种信号分子相互作用,调节细胞的增殖、分化和凋亡,其异常表达与多种人体疾病的发生和发展密切相关,而在斑马鱼发育中的功能尚不很清楚。研究克隆出斑马鱼窖蛋白-1基因两个亚型的全长cDNA,与其他物种窖蛋白-1的氨基酸序列进行比较,发现该蛋白在脊椎动物中非常保守。利用逆转录多聚酶链反应检测发现,在斑马鱼多个成年组织中窖蛋白-1的两个亚型均有转录表达。利用胚胎整体原位杂交检测组织或器官特异基因的时空表达变化发现,过表达或利用Morpholino反义寡聚核苷酸(
厉洁 +4 more
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摘 要 本实验在用感染兔血清和单克隆抗体对日本血吸虫(大陆株)成虫cDNA 表达文库进行筛选的基 础上, 对筛选出的阳性克隆插入片段DNA 进行了亚克隆和序列分析。
doaj
目的制备呼吸道合胞病毒(RSV)多克隆抗体,为RSV的检测提供条件。方法用RSV颗粒抗原免疫新西兰家兔3只,采用细胞病变中和实验检测RSV多克隆抗体。结果细胞病变中和实验结果显示,本研究制备的RSV多克隆抗体在1∶1102的稀释度能保护50%的Hela细胞免受RSV的攻击,而阴性对照血清不能保护细胞对病毒的感染。结论RSV颗粒抗原免疫新西兰家兔可成功制备RSV多克隆抗体,1∶1102稀释的血清可保护50%的细胞不产生病变。
范清, 李洪源, 田文静
doaj
Construction of CHO cell lines for high-efficient expression of recombinant proteins [PDF]
作为抗体药物的主力军,单克隆抗体(Monoclonalantibodies,简称mAbs)已成为世界生物制药行业的研究热点。本实验室已研制出具有开发为创新药物潜力的抗体需要进行大量表达用于临床前研究。抗体药物在开发阶段以及产业化阶段需要以稳定表达的方式进行生产,因此建立一个高效快速的稳定细胞株筛选平台对推进抗体药物的研发进程具有重要意义。 本研究首先构建了真核细胞表达质粒pNIDVD-GFP&mCherry,以绿色荧光蛋白GFP与红色荧光蛋白mCherry为荧光报告蛋白,将细胞株筛选流程可视化;以CHO-
杨奕
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The Expression and Biological Significance of PD-L1 on Lung Cancer Cell Lines [PDF]
Background and objective Tumor-associated PD-L1 expression was recently shown to promote T-cell apoptosis and proposed as a potential mechanism of immune evasion by tumors. On the basis of the ability of tumor-associated PD-L1 to mediate activated T-cell
Cheng CHEN +6 more
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Host location behavior of Aedes albopictus and Empoasca vitis: olfactory and visual effects on their orientation [PDF]
在昆虫宿主定位行为中,嗅觉与视觉究竟哪个更为重要至今尚无定论。本研究选择福建地区广泛分布、并且具有重大危害的白纹伊蚊(Aedesalbopictus)和假眼小绿叶蝉(Empoascavitis)为研究对象,以干扰害虫对宿主生物的定向通讯行为为研究思路,整合形态学、分子生物学和行为学方法试图揭示嗅觉和视觉在昆虫宿主定位行为中的作用。以期深入理解昆虫的宿主定位行为机制并为害虫防治提供新思路。研究结果如下: (1)应用RACE技术获得白纹伊蚊嗅觉共受体基因(AalbOrco)全长编码序列 ...
章旭日
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目的 筛选鉴定与胃组织交叉反应的抗H7N9流感病毒的单克隆抗体,初步探讨流感病毒感染会引发肠道相关疾病的可能致病机制。方法 利用H7N9流感病毒制备了大量的单克隆抗体,对制备的单克隆抗体运用ELISA方法进行亚型和效价测定,免疫组化对制备的单克隆抗体与组织的反应性进行筛选,巢式PCR分子生物学技术克隆单克隆抗体轻重链可变区序列。结果 制备的单克隆抗体H7N9-71和H7N9-78均能与H7N9抗原特异性结合,抗体效价达1∶10~5,免疫组化结果表明H7N9-71、H7N9 ...
孙晶莹 +6 more
doaj
果糖-1,6-二磷酸酶(EC 3.1.3.11)是糖异生中的关键限速酶之一,在糖代谢中起重要作用。哺乳动物存在肝脏型和肌肉型两种果糖-1,6-二磷酸酶同工酶,分别由Fbp1和Fbp2编码。银鲫作为我国重要的经济养殖鱼类,尚无果糖-1,6-二磷酸酶基因的有关资料,其组织分布特征和胚胎发育模式亦不清楚。本研究采用RACE方法从银鲫原肠胚SMART cDNA文库中扩增了果糖-1,6-二磷酸酶基因的全长cDNA,其长度为1170 bp,编码337个氨基酸残基,多重序列比对和系统发育分析表明该基因为肝脏型果糖 ...
桂建芳, 王锐, 肖青
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