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结核分枝杆菌Ag85A/MPT-64融合基因DNA疫苗的构建及免疫研究中ELISPOT技术的应用
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2012 目的构建结核分枝杆菌蛋白Ag85A/MPT-64融合基因为基础的DNA疫苗,并利用ELISPOT技术检测其免疫原性。方法利用PCR和基因克隆技术从结核分枝杆菌H37Rv基因组中扩增出Ag85A/MPT-64编码基因,构建真核表达载体,用酶切和双向DNA测序进行鉴定。鉴定正确的阳性克隆重组质粒,肌注免疫小鼠,3周后用ELISPOT法检测抗体滴度。结果 构建到真核载体中的结核分枝杆菌H37Rv株Ag85A/MPT-64融合基因经序列测定证实无突变。ELISPOT法检测几何平均滴度为1∶1 000 ...
张娟 +5 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2012 结核是当今世界最重要的致病和致死因素之一,据WHO估计,全球已有近20亿人感染结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis,MTB）,结核患者约2000万人,每年新发患者约800-1 000万人[1]。近年来,由于AIDS的发病率呈上升趋势,而AIDS患者又极易感染结核病,另外近几年结核分枝杆菌隐性感染或亚临床感染持续增多。因此,结核病诊断尤其是快速检测对于及时正确开展抗结核治疗和控制结核病的传播显得尤为重要和迫切。本文就结核病的实验室诊断技术进展综述如下。
蒯守刚, 裴豪
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BacT/ALERT 3D检测系统在快速检测结核分支杆菌中的应用
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2013 目的评价BacT/ALERT 3D检测系统在快速检测结核分枝杆菌中的应用价值。方法对336例结核患者的痰液,胸腔积液,病灶组织,脑脊液等标本同时采用BacT/ALERT 3D检测系统和涂片法进行检测。结果 BacT/ALERT 3D检测系统快速培养分支杆菌的阳性率为39.9%,阳性检测时间为14.1天,涂片法阳性率为14.7%,阳性检测时间为1天。结论 BacT/ALERT 3D检测系统能快速,准确的检测分支杆菌,是一种值得推广的分支杆菌快速检测方法。
陈昕, 赵雷, 杨亚丽
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2006 目的制备针对牛分枝杆菌热休克蛋白65（HSP65）的单克隆抗体（mAb）并进行鉴定。方法以CpGODN1826/Alum为佐剂,不同的HSP65融合蛋白为免疫抗原和检测抗窄,用聚乙二醇（PEG）法制备杂交瘤细胞,ELISA检测杂交瘤细胞分泌抗体的效价和类型,Western blot分析抗体的特异性。结果获得5株稳定分泌抗HSP65蛋白的McAb,3株细胞分泌的mAb为IgG1亚类,2株为IgG2a。ELISA和Western blot结果显示,mAb能特异性结合HSP65-PSA-tag、HSP65 ...
尹晓光 +6 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2006 目的探讨结核病（TB）患者血清肿瘤坏死因子（TNF）的可溶性受体（sTNFRⅠ）水平与细胞模型转录谱研究中肿瘤坏死因子受体Ⅰ水平的关系。方法用ELISA法检测37例TB患者及25名正常人血清中sTNFRⅠ水平。用DNA芯片分析结核分枝杆菌感染前后人巨噬细胞TNFRⅠ的表达水平。结果①37例TB患者的sTNFRⅠ浓度均高于正常对照组（x—±s值分别为1 080.4±174.1 ng/L和653.2±65.3 ng/L ...
梁莉, 谢建平, 乐军, 肖和平
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2008 目的评价荧光定量PCR（FQ-PCR）和结核菌（MTB）L型检测的临床价值。方法收集61例痰阴性肺结核患者痰、血标本分别进行分枝杆菌及其L型培养,并采用染色、免疫组化和FQ-PCR技术进行检测和鉴定,部分标本透射电镜观察。结果痰MTB及其L型检测的阳性率为72.4%,血液阳性率为28.3%,而痰血检测总的阳性率为75.4%。痰直接FQ-PCR33.3%,培养后FQ-PCR40.4%,总阳性率45.5%。血直接FQ-PCR0/35,培养后FQ-PCR 22.5%。痰血FQ-PCR阳性率比较,χ2=5 ...
朱明利 +5 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2011 目的研究结核分枝杆菌重组Ag85A（rAg85A）和/或Ag85B（rAg85B）蛋白与母牛分枝杆菌菌苗（Mycobacteri-um vaccae,MV）联合免疫的免疫原性。方法 60只雌性BALB/c小鼠随机分为下列6组:（1）阴性对照组:磷酸盐缓冲液（PBS）组,（2）阳性对照组:卡介苗（BCG）组,（3）阳性对照组:MV组,（4）实验组:rAg85A-MV组,（5）实验组:rAg85B-MV组及（6）实验组:rAg85A-rAg85B-MV组。每2周免疫1次,共免疫3次 ...
尹文东 +9 more
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ESAT-6、INF-γ、IL-10联合ADA检测在结核性脑膜炎早期诊断中的意义
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2017 结核病是因机体免疫功能减弱导致结核分枝杆菌感染而出现的传染性疾病。结核性脑膜炎（TBM）是因结核分枝杆菌侵袭脑膜所致,由于脑脊液标本较难留取,且细胞数量较少,导致TBM早期诊断存在一定难度[1]。随着结核病防治及卡介苗广泛接种工作进行,TBM发病率有所降低,但部分地区仍较为常见 ...
赵玉 +4 more
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1995 应用嵌套式聚合酶链反应（ｎｅｓｔｅｄＰＣＲ）法检测结核菌ＤＮＡ，所用内、外两对寡核苷酸引物衍生于３７．７ｕ（３８ｋＤａ）蛋白抗原ｂ的编码（Ｐａｂ）ＤＮＡ序列。对６种抗酸分枝杆菌和１０种非分枝杆菌ＤＮＡ进行扩增，经琼脂糖凝胶电泳和溴化乙锭染色证实，只有人型结核杆菌、牛型结核杆菌和卡介苗（ＢＣＧ）出现３２２ｂｐ特异扩增带，而其他菌种未见此种扩增。第１步和第２步ＰＣＲ分别检测到的最低限量为１０ｐｇ和１０ｆｇ的靶ＤＮＡ。采用此法检测７２份临床标本，结果显示：该技术具有特异性强、敏感性高、快速简便的优点 ...
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2012 结核病是由结核分枝杆菌引起的一种慢性传染病,主要侵犯肺脏。在某些经济欠发达地区,许多结核病患者因为得不到全程,合理的救治而产生结核耐药,这使得控制结核病的发生发展成为世界性问题。
荣爱红, 赵蓬波, 侯晓杰
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