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双链探针同步荧光技术快速筛查C282Y点突变 [PDF]

open access: yes, 2003
以荧光染料Fam和Joe分别标记野生型和突变型双链探针作为均相检测探针,以构建的DNA模板作为研究模型,采用固定波长差同步荧光分析法对PCR反应产物进行终点检测。通过对HFE基因C282Y点突变的检测,并以限制性内切核酸酶RsaI证实,该方法是一种廉价、快速、可靠的筛查遗传性血色病基因C282Y突变的方法 ...
张永有   +3 more
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结核分支杆菌链霉素耐药的快速检测

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2002
【目的】探讨用聚合酶链反应-单链构象多态性( PCR-SSCP)方法快速诊断结核分支杆菌链霉素( Sm)耐药的临床意义。【方法】用 PCR-SSCP 技术检测了 30 株Sm 敏感的结核分支杆菌临床分离株, 30 株 Sm 耐药的临床分离株,以结核分支杆菌 H37RV 标准株作对照。先用 PCR 方法扩增 rpsL 基因,随后用SSCP 方法鉴定其扩增产物有无突变。【结果】所有临床分离株均观察到 rpsL 基因 PCR 扩增产物。30 株 Sm 敏感的临床分离株与 H37RV 标准株呈现一样 SSCP ...
吴为群, 谢灿茂
doaj  

ARMS实时PCR基因分型特异性的研究 [PDF]

open access: yes, 2005
以原癌基因Kras基因12位密码子的4种基因型(野生型为GGT,突变型为AGT、TGT、CGT)质粒DNA为研究模型,采用SYBRGreenⅠ为实时PCR指示剂,进行ARMS实时PCR基因分型特异性的研究.结果表明:在和模板匹配的ARMS引物3′端附近引入故意错配碱基,将ARMS引物浓度稀释10倍,并对传统三步PCR循环进行改良,即根据目的产物和引物二聚体的熔点差异,在传统延伸步骤之后增加一步恒温80℃检测荧光步骤,可消除引物二聚体的影响,使ARMS引物的特异性增强,得到清晰的基因分型结果 ...
李庆阁, 梁基选, 郑薇薇
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PCR-SSCP作HLA-DRB基因分型的初步研究

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1994
从20例人类白细胞抗原-DR(HLA-DR)血清学特异性不同的血痕样本中抽提基因组DNA,经PCR扩增HLA-DRB基因第二外显子的高度多态区域。PCR产物在50%甲酰胺存在下加性获得单链DNA片段后,经8%中性聚丙用酰胺凝胶电泳、银染显色分析。结果显示,DR血清学特异性不同的个体具有不同的电泳图型。而DR相同血清不同的个体却具有相同的电泳带型。在稳定条件下,单链电泳图型有着良好的重复性。与聚合酶链反应-制性片段长度多态性(PCR-RFLP)或聚合酶链反应-序列特异寡核苷酸(PCR-SSO)探针法相比 ...
doaj  

中国部分地区结核分支杆菌耐利福平、异烟肼和链酶素耐药基因的检测

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2007
目的研究我国部分地区耐利福平(RFP)、异烟肼(INH)和链酶素(SM)结核分支杆菌临床分离株rpoB基因、KatGr、psL基因突变情况,评价其耐药分子机制。方法采用PCR和聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)对373株结核分支杆菌临床分离株(其中敏感株148株,耐RFPI、NH、SM株共225株)rpoB基因、KatG和rpsL基因进行检测。并对其中19株SSCP阴性的耐RFP株用双脱氧末端终止法进行测序分析。结果安徽省、北京市、上海市、河北省、河南省、辽宁省 ...
包洪   +4 more
doaj  

Diversity of deep-sea hydrothermal vent sediment microorganism and Classification of a thermophilic anaerobic strain in the Eastern Pacific Ocean [PDF]

open access: yes, 2013
东太平洋深海海底热液系统自被发现以来,其热液口处独特的极端生活环境及微生物独特的生理生化特征成为科学家们一直研究的前沿热点区域。对东太平洋深海热液区沉积物中微生物的研究,不仅有助于我们认识热液区未知生物类群的功能和理解微生物对热液生态系统的影响,而且对东太平洋热液区微生物菌种资源开发、新的铁还原菌株的筛选以及揭示微生物在深海热液环境金属元素循环过程中的作用,都具有十分重要的意义。 本实验以研究东太平洋深海热液区微生物多样性、铁还原微生物多样性以及新的菌种资源为主要目的。采取分子生物学方法(PCR ...
谢运标
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银染PCR-SSCP检测大肠癌p53基因突变 附视频

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 1997
采用银染PCR-SSCP法检测肠癌细胞株及30例新鲜肠癌P53基因突变。结果发现LOVO细胞p53基因外显子5、6、7发生突变,LS174T细胞P53基因的外显子5、8发生突变,30例新鲜肿瘤标本p53基因外显子5、6、7、8的突变例数各为4、0、4、4例。大肠癌P53基因突变热点为外显子5、7、8。
欧启水   +9 more
doaj  

银染PCR-SSCP检测大肠癌p53基因突变

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 1997
采用银染PCR-SSCP法检测肠癌细胞株及30例新鲜肠癌P53基因突变。结果发现LOVO细胞p53基因外显子5、6、7发生突变,LS174T细胞P53基因的外显子5、8发生突变,30例新鲜肿瘤标本p53基因外显子5、6、7、8的突变例数各为4、0、4、4例。大肠癌P53基因突变热点为外显子5、7、8。
欧启水   +4 more
doaj  

Studies on Morphological Variations and Population Genetic Diversity of Chiloscyllium plagiosum along Southern China Coast [PDF]

open access: yes, 2012
本论文从形态和分子水平探讨了我国南部海域条纹斑竹鲨5个地理群体(广东雷州群体、海南琼海群体、广西北海群体、福建平潭群体和台湾屏东群体)的形态差异、种内和种间遗传结构,为我国南部沿海条纹斑竹鲨种质资源的保护及合理利用提供了理论依据,主要结果如下: 运用4种多元分析方法对海南琼海,广东雷州,广西北海,福建平潭以及台湾屏东等5个群体条纹斑竹鲨的19项形态性状进行了群体间差异分析和判别分析。分析结果显示:条纹斑竹鲨5个群体间有16项特征变量差异极显著(PPopulation genetic structure ...
李萌
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Microbial diversity investigation of the mangrove sediments from Zhangjiang estuary and the screening of genes ( clusters ) associatedwith secondary metabolite production from metagenomic library [PDF]

open access: yes, 2006
红树林是热带或亚热带海岸潮间带所特有的木本植物群落,具有非常重要的经济和生态学价值。红树林生态系统是世界上生产力最高的生态系统之一,微生物是其中重要的生物组成成份。微生物在推动红树林生态系统中的能量流动,促进红树林生态系统中各营养元素转化和再循环方面起着关键的作用。本报告主要通过红树林沉积物中环境总DNA的16SrDNA文库及宏基因组文库构建及分析的研究,以调查中国福建漳江口红树林湿地自然保护区沉积物中的微生物多样性,并挖掘红树林沉积物中新型的菌株及基因资源。 本报告的主要的研究内容和结果包括: 1 ...
张熙颖
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