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大鼠血清的4种处理方法对2-DE效果的影响

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2012
目的比较大鼠血清样本的4种制备方法对血清蛋白质双向凝胶电泳(2-DE)分离效果的影响。方法分别用直接溶解法、试剂盒沉淀除杂质、改良的TCA/丙酮法和采用去白蛋白及免疫球蛋白试剂盒预处理大鼠血清样本,双向电泳分离血清蛋白;硝酸银染色;image master5.0软件分析所得蛋白质斑点。结果对直接溶解法、试剂盒沉淀除杂质、改良的TCA/丙酮法和采用去白蛋白及免疫球蛋白试剂盒预处理的大鼠血清样本进行双向电泳分离,经3次重复性检测,凝胶的平均蛋白质点数分别为610±54,683±46,735±42和865 ...
张彬, 谭岩
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双向电泳技术研究镉诱导后牙鲆肝的差异蛋白质组 [PDF]

open access: yes, 2008
采用改良的TCA/丙酮法直接提取牙鲆肝脏蛋白质组,并采用双向凝胶电泳技术予以分离.实验结果表明:经氯化镉诱导后,牙鲆肝表达出16个差异蛋白质(斑点),其中4个斑点上调,2个斑点下调,6个斑点消失,新增4个斑点;并且蛋白质斑点在凝胶上的分布表现出较高的重复性.一旦这些差异蛋白质点在双向凝胶电泳图谱上实现标准指纹化后 ...
朱金勇   +4 more
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Strategy for Absolute Quantification of Proteins Using Organic Mercurial as an MS-Tag [PDF]

open access: yes, 2010
由于蛋白质组是一个在空间和时间上动态变化着的整体,因此蛋白质组学研究的核心内容是蛋白质的动态变化和动态行为,并从整体的角度分析其内部蛋白质组成成分、表达水平与修饰状态,从而了解蛋白质之间相互作用与联系,揭示蛋白质功能与细胞生命活动规律。这不仅包括能对整个细胞、组织或完整生物体中所拥有的全部蛋白质进行准确地识别与鉴定,更重要的是能够对蛋白质的表达水平及其存在形式的变化给出定量的描述,毕竟几乎所有重要的生命现象如发育、代谢、信号传导、体内能量转换、神经活动等都关联到众多蛋白质数量或其丰度上的改变 ...
郭逸飞
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急性脊髓损伤蛋白质的双向电泳分析和质谱鉴定

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2006
目的建立急性脊髓损伤双向凝胶电泳图谱,初步观察急性脊髓损伤组织中蛋白质组的变化与差异表达,为进一步探讨急性脊髓损伤分子机制奠定了基础。方法采用双向凝胶电泳分离脊髓总蛋白,银染显色,Image Master图象分析系统分析,从胶中选取分离蛋白质点,基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析获取肽质量指纹图谱(PMF),Mascot软件搜索MSDP、SWISS-PROT数据库鉴定蛋白质。结果获得重复性和分辨率较好的脊髓双向凝胶电泳图谱。质谱分析了12个蛋白质点,获取6张肽质量指纹图谱 ...
赵宝林   +6 more
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兔脊髓缺血再灌注损伤与正常组蛋白质组的差异分析

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2010
目的建立脊髓缺血再灌注损伤双向凝胶电泳图谱,对照观察蛋白质的差异表达。方法建立脊髓缺血再灌注损伤模型,获取损伤和正常脊髓的蛋白质组双向电泳荧光图谱,观察差异蛋白的不同时间点的变化规律,建立缺血再灌注24 h与正常脊髓蛋白质组的匹配差异图谱,鉴定差异蛋白。结果成功建立损伤和正常的双向电泳荧光图谱和肽质量指纹图谱,比较再灌注损伤24 h组与正常组可检测到46个蛋白差异点,鉴定出10个差异蛋白。结论损伤24 h组较其他组变化明显,与正常脊髓的蛋白质组存在明显差异。
朱本清, 杨小玉, 顾锐, 邱宾涛
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Protomic analysis of the cholangiocarcinoma [PDF]

open access: yes, 2010
胆管癌(cholangiocarcinoma)是一种难于早期诊断和治疗的恶性肿瘤。目前,大多数的胆管癌病人发现时病程已进入晚期,多已失去手术机会。而目前尚缺乏敏感的放疗、化疗手段,能否早期诊断并进行根治性治疗成为影响本病预后的最主要因素。近年来,胆道肿瘤的发病率和死亡率逐年上升,已引起越来越多的学者重视。因此,加强胆道肿瘤的生物学特性研究,深入探讨胆道肿瘤的发生机制,并寻求有效的早期诊断指标和治疗方法,对于提高胆道肿瘤的疗效和预后具有重要意义 ...
练惠辉
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提取与分离方法影响海兔口腔神经节蛋白质组的分离效果 [PDF]

open access: yes, 2008
选用丙酮沉淀法和直接裂解法分别提取离蓝斑背肛海兔(Notarcus leachii cirrosusStimpson,NLCS)口腔神经节(Buccal Ganglion,BG)全蛋白质,发现采用直接裂解法所获得BG蛋白质种类多于丙酮沉淀法.在第一向等电聚焦电泳(IEF)中,分别选用pH为3.0~9.0,4.0~6.0和5.0~8.0的载体两性电解质,发现载体两性电解质pH范围为5.0~8.0时分离效果最好.使用Melanie 4 Trial软件统计BG蛋白质斑点数目约为290点 ...
朱斌琳   +4 more
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髓母细胞瘤与室管膜瘤脑脊液差异凝胶电泳方法的建立

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2014
目的建立脑脊液双向差异凝胶电泳方法,寻找髓母细胞瘤脑脊液、室管膜瘤脑脊液与正常脑脊液三者之间的差异蛋白表达。方法选取3例已确诊髓母细胞瘤患者脑脊液等体积混合为髓母细胞瘤组(M);3例已确诊室管膜瘤患者脑脊液等体积混合为室管膜瘤组(E);3例正常脑脊液等体积混合为正常对照组(CON);分别采用10%TCA/冰丙酮沉淀法除盐提取蛋白;蛋白等量混合为内标组(S);将各组蛋白分别经花青染料Cy2、Cy3和Cy5标记,混合后进行双向差异凝胶电泳(2D-DIGE),分别在波长488nm ...
李文臣   +4 more
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蛋白质组学技术筛选与鉴定镉诱导下褐云玛瑙螺肝脏的差异蛋白质 [PDF]

open access: yes, 2009
比较丙酮/TCA沉淀法和直接裂解法,优化提取与分离褐云玛瑙螺(Achatina fulica,AF)肝脏全蛋白。采用丙酮/TCA沉淀法,可获得约600个蛋白质斑点。用0.5 mg/L CdCl2溶液浸泡后的去梗小白菜喂养AF,并作为镉盐诱导AF肝脏表达应激蛋白质的实验材料。采用蛋白质组学技术筛选出由镉盐诱导AF肝脏表达的14个差异蛋白质斑点,并用肽质量指纹图谱技术(peptide mass fingerprinting,PMF)和数据库比对法初步鉴定出7种差异蛋白质,其中部分为热激蛋白(heat ...
凌雪萍   +5 more
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视网膜光感受器细胞外基质蛋白质SPACR的分离纯化

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2011
目的建立视网膜光感受器细胞外基质(Interphotoreceptor matrix,IPM)蛋白质sialoprotein associated with cones and rods(SPACR)分离和纯化方法。方法分离视网膜IPM,提取蛋白质组份,通过离子交换、凝胶过滤层析等技术分离纯化SPACR,并通过双向电泳及western blot技术验证。结果通过双向电泳技术及western blot结果显示分离纯化后仅有等电点在5-5.5,分子量约在150 kDa的单一条带和SPACR抗体反应 ...
赵劲松, 黄岚峰, 王淑荣
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