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大鼠血清的4种处理方法对2-DE效果的影响

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2012
目的比较大鼠血清样本的4种制备方法对血清蛋白质双向凝胶电泳(2-DE)分离效果的影响。方法分别用直接溶解法、试剂盒沉淀除杂质、改良的TCA/丙酮法和采用去白蛋白及免疫球蛋白试剂盒预处理大鼠血清样本,双向电泳分离血清蛋白;硝酸银染色;image master5.0软件分析所得蛋白质斑点。结果对直接溶解法、试剂盒沉淀除杂质、改良的TCA/丙酮法和采用去白蛋白及免疫球蛋白试剂盒预处理的大鼠血清样本进行双向电泳分离,经3次重复性检测,凝胶的平均蛋白质点数分别为610±54,683±46,735±42和865 ...
张彬, 谭岩
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Strategy for Absolute Quantification of Proteins Using Organic Mercurial as an MS-Tag [PDF]

open access: yes, 2010
由于蛋白质组是一个在空间和时间上动态变化着的整体,因此蛋白质组学研究的核心内容是蛋白质的动态变化和动态行为,并从整体的角度分析其内部蛋白质组成成分、表达水平与修饰状态,从而了解蛋白质之间相互作用与联系,揭示蛋白质功能与细胞生命活动规律。这不仅包括能对整个细胞、组织或完整生物体中所拥有的全部蛋白质进行准确地识别与鉴定,更重要的是能够对蛋白质的表达水平及其存在形式的变化给出定量的描述,毕竟几乎所有重要的生命现象如发育、代谢、信号传导、体内能量转换、神经活动等都关联到众多蛋白质数量或其丰度上的改变 ...
郭逸飞
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Protomic analysis of the cholangiocarcinoma [PDF]

open access: yes, 2010
胆管癌(cholangiocarcinoma)是一种难于早期诊断和治疗的恶性肿瘤。目前,大多数的胆管癌病人发现时病程已进入晚期,多已失去手术机会。而目前尚缺乏敏感的放疗、化疗手段,能否早期诊断并进行根治性治疗成为影响本病预后的最主要因素。近年来,胆道肿瘤的发病率和死亡率逐年上升,已引起越来越多的学者重视。因此,加强胆道肿瘤的生物学特性研究,深入探讨胆道肿瘤的发生机制,并寻求有效的早期诊断指标和治疗方法,对于提高胆道肿瘤的疗效和预后具有重要意义 ...
练惠辉
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急性脊髓损伤蛋白质的双向电泳分析和质谱鉴定

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2006
目的建立急性脊髓损伤双向凝胶电泳图谱,初步观察急性脊髓损伤组织中蛋白质组的变化与差异表达,为进一步探讨急性脊髓损伤分子机制奠定了基础。方法采用双向凝胶电泳分离脊髓总蛋白,银染显色,Image Master图象分析系统分析,从胶中选取分离蛋白质点,基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析获取肽质量指纹图谱(PMF),Mascot软件搜索MSDP、SWISS-PROT数据库鉴定蛋白质。结果获得重复性和分辨率较好的脊髓双向凝胶电泳图谱。质谱分析了12个蛋白质点,获取6张肽质量指纹图谱 ...
赵宝林   +6 more
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兔脊髓缺血再灌注损伤与正常组蛋白质组的差异分析

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2010
目的建立脊髓缺血再灌注损伤双向凝胶电泳图谱,对照观察蛋白质的差异表达。方法建立脊髓缺血再灌注损伤模型,获取损伤和正常脊髓的蛋白质组双向电泳荧光图谱,观察差异蛋白的不同时间点的变化规律,建立缺血再灌注24 h与正常脊髓蛋白质组的匹配差异图谱,鉴定差异蛋白。结果成功建立损伤和正常的双向电泳荧光图谱和肽质量指纹图谱,比较再灌注损伤24 h组与正常组可检测到46个蛋白差异点,鉴定出10个差异蛋白。结论损伤24 h组较其他组变化明显,与正常脊髓的蛋白质组存在明显差异。
朱本清, 杨小玉, 顾锐, 邱宾涛
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蛋白质组学技术筛选与鉴定鲤鱼嗅脑急性创伤后的应激蛋白质 [PDF]

open access: yes, 2008
优化建立鲤鱼(cyprinus carpio,CC)嗅觉端脑(嗅脑)全蛋白提取技术。联用低渗透裂解和液氮冻溶法破碎鲤鱼嗅脑组织(rhinencephalon tissue of cyprinus carpio,CCRT)、低速离心提取CCRT全蛋白,并采用双向凝胶电泳(2D-PAGE)技术进行有效分离。经分析与统计,每张CCRT的2D-PAGE图谱中的蛋白质斑点数目约为1200个。分别分离CCRT的脂溶性和水溶性全蛋白,并获得高分辨率的2D-PAGE图谱。选用差异蛋白质组学技术筛选经10 ...
包晓东, 蔡宗苇, 黄河清, 黄琳
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优化分离与鉴定蓝斑背肛海兔口腔神经节蛋白质组 [PDF]

open access: yes, 2006
采用双向凝胶电泳技术优化分离蓝斑背肛海兔(Notarcus leachii cirrosusStimpson,NLCS)口腔神经节(Buccal Ganglion,BG)蛋白质组,并获得约300个蛋白质斑点.用组合基质辅助激光解吸电离化飞行时间(MALD I-TOF)质谱技术和胶内酶解技术测定BG蛋白质组中的96个蛋白质斑点的肽指纹(Peptide m ass fin-gerprint,PMF)图谱.经数据库检索与比对后,发现96种蛋白质中仅有4种蛋白质可获得较高的匹配率,它们分别是微管蛋白(Tubu ...
吴韩志   +3 more
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髓母细胞瘤与室管膜瘤脑脊液差异凝胶电泳方法的建立

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2014
目的建立脑脊液双向差异凝胶电泳方法,寻找髓母细胞瘤脑脊液、室管膜瘤脑脊液与正常脑脊液三者之间的差异蛋白表达。方法选取3例已确诊髓母细胞瘤患者脑脊液等体积混合为髓母细胞瘤组(M);3例已确诊室管膜瘤患者脑脊液等体积混合为室管膜瘤组(E);3例正常脑脊液等体积混合为正常对照组(CON);分别采用10%TCA/冰丙酮沉淀法除盐提取蛋白;蛋白等量混合为内标组(S);将各组蛋白分别经花青染料Cy2、Cy3和Cy5标记,混合后进行双向差异凝胶电泳(2D-DIGE),分别在波长488nm ...
李文臣   +4 more
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胆管癌血清双向凝胶电泳技术的优化 [PDF]

open access: yes, 2008
本研究为筛选胆管癌癌变的标志物,开发相应的药物研究,通过对胆管癌血清双向电泳的样品处理、pH范围、上样量的选择、电泳参数的设置和SDS凝胶电泳染色方法等进行比较优化.确定了样品预处理后通过Millpore公司推出的Montage Albumin Deplete kit去除血清中高丰度的白蛋白,再经丙酮沉淀,用裂解液溶解后,采用pH3.5~10与pH5~8的两性载体电解质以体积比1∶4混合使用,100μg的上样量,12.5%的SDS-PAGE胶,16 mA/胶进行双向电泳的电泳体系 ...
康劲翮   +7 more
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视网膜光感受器细胞外基质蛋白质SPACR的分离纯化

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2011
目的建立视网膜光感受器细胞外基质(Interphotoreceptor matrix,IPM)蛋白质sialoprotein associated with cones and rods(SPACR)分离和纯化方法。方法分离视网膜IPM,提取蛋白质组份,通过离子交换、凝胶过滤层析等技术分离纯化SPACR,并通过双向电泳及western blot技术验证。结果通过双向电泳技术及western blot结果显示分离纯化后仅有等电点在5-5.5,分子量约在150 kDa的单一条带和SPACR抗体反应 ...
赵劲松, 黄岚峰, 王淑荣
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