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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2013 目的构建人Shh基因过表达慢病毒载体,转染293T细胞,建立稳定转染人Shh基因的293T的细胞系。方法设计引物引入AgeⅠ酶切位点,使用PCR方法从质粒中扩增Shh基因的编码区序列,对所扩增出的目的片段回收纯化。将AgeⅠ内切酶消化后目的片段交换连接入pGC-FU载体,构建Shh慢病毒表达载体pGC-FU-Shh。酶切验证并测序正确后,将质粒pGC-FU-Shh与携带GFP的慢病毒辅助包装载体共转染293T细胞,荧光显微镜检测慢病毒载体转染细胞的结果,重组质粒pGC-FU-Shh的测序,Western
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doaj
Studies of lentiviral system for gene transferring and its expansile application [PDF]
, 2010 慢病毒载体因为具有能感染分裂和未分裂的宿主细胞，并且带给宿主细胞轻微的免疫原性的优点，而在转基因改造、基因功能分析和基因治疗中得到了广泛的应用。但是，慢病毒载体的整合特性，尤其是它整合到基因组的转录活性区域或邻近活性区域的特性，使基因功能分析的结果产生未知干扰，并给实际应用带来风险。慢病毒的整合可能会引起突变，或者改变非目的基因的表达从而对目的基因的功能研究产生影响，而且病毒序列整合到宿主细胞基因组中可能会在转基因操作中带来长期和有害的影响。我们的研究旨在利用慢病毒的优良特性的同时 ...
刘宽灿
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2010 目的探讨慢病毒载体在CD34+脐血细胞（CBCs）中的基因转导效率,为基因治疗的临床应用提供关键材料。方法应用1型人类免疫缺陷病毒（HIV-1）改造而成的第三代自身失活（self-inactivating,SIN）慢病毒载体（lentiviralvector）系统,通过流式细胞术检测基因导入细胞百分比,评价该载体系统在人CBCs中的基因转导效率。结果 HIV载体的转导效率在95%以上。结论基于慢病毒载体基因转导的高效性,该载体系统可作为CD34+CBCs基因转导的极好工具。
卢振霞, 白元松, 林玉梅
doaj
Investigation of the molecular mechanism used by the necroptosis pathway to suppress apoptosis [PDF]
, 2016 细胞凋亡和细胞坏死是最主要的两种细胞程序性死亡方式，在个体生长发育、内环境稳态维持以及众多生理和病理过程中发挥着重要作用。由于细胞坏死和细胞凋亡具有截然不同的特征，它们会造成截然不同的生物学结果，因此，细胞死亡方式的选择受到极其严密的调控。这两种死亡方式不是相互孤立的，而是存在着相互联系、相互竞争的关系，在特定的条件下还可以相互转化。大量遗传学的证据表明，细胞凋亡可以抑制细胞坏死，这对胚胎的正常发育至关重要；然而人们对于细胞坏死如何抑制细胞凋亡却一无所知。 肿瘤坏死因子（TNF ...
杨章华
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Function and mechanism of Repulsive Guidance Molecule RGMb/Dragon during Colorectal Cancer progression [PDF]
, 2016 结直肠癌是我国甚至全球范围内最常见的肿瘤之一，也是肿瘤相关死亡的主要原因之一。及时而有效的诊断是降低结直肠癌死亡率的重要措施。除了临床上常规的诊断及治疗方法外，人们也在不断致力于新型肿瘤标志物的研究，以进一步明确结直肠癌发生发展的机制。排斥导向分子(RGM)家族成员RGMb，又名Dragon，作为骨形态发生蛋白(Bonemorphogeneticprotein，BMP)通路的辅助受体，不但承载着胚胎发生、神经修复和肾脏正常生理功能，还与各种上皮来源肿瘤的发生发展密切相关。然而，RGMb ...
施颖
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The effects of miR-30c-1-3p regulating group ⅡA secretory phospholipase A2（sPLA2-ⅡA）expression on the pathogenic mechanism of atherosclerosis [PDF]
, 2015 动脉粥样硬化（Atherosclerosis，AS）是急性冠脉综合症、脑卒中等众多心脑血管疾病共同的病理基础。sPLA2-ⅡA在动脉粥样硬化病变处含量明显增多、活性显著增强，同时伴随中性粒细胞的增多。sPLA2-ⅡA以酶的催化水解作用和作为致炎因子的促炎症反应双重生物学作用参与AS发生发展的各个阶段。 MicroRNA（miRNA）是近年发现广泛存在于真核细胞中的高度保守的、非编码单链小分子RNA，具有最广泛的基因调节功能，参与机体多种生理、病理过程的调控。 我们运用miRNA靶基因预测软件发现miR ...
夏小春
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, 2015 为了建立在姜黄素诱导肿瘤细胞凋亡过程中以Nucleophosmin为中心的分子调控网络，阐明Nucleophosmin的表达和定位变化在肿瘤细胞诱导凋亡过程中的调控作用机制，本论文在成功制备Nucleophosmin兔多克隆抗体的基础上，运用Westernblot和免疫荧光标记技术（IF）分析Nucleophosmin在姜黄素诱导凋亡前后的人肝癌SMMC-7721细胞中的表达和定位变化，同时构建带有Flag标签的正常定位（pBobi-cmv-NPM）以及核仁定位信号突变（pBobi-cmv-NPM ...
李晓
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FBW7α inhibits the proliferation of CCA cells by decreasing the protein expression of c-myc and cyclinE [PDF]
, 2016 胆管癌（Cholangiocarcinoma，CCA）是仅次于肝细胞癌的第二大肝脏常见恶性肿瘤，预后差，胆管癌患者的五年生存率仅为5%，而且，近年来其发病率和死亡率呈逐年上升趋势，但是目前对胆管癌发生发展机制的研究还不够深入。 FBW7α（F-boxandWDrepeatdomain-containing7）是一种E3泛素连接酶，可以通过介导底物蛋白的泛素化降解而调控细胞增殖、分化、凋亡、基因组稳定性等细胞进程。FBW7α是一种肿瘤抑制蛋白，在很多肿瘤中发现FBW7的表达减少或者功能缺失，其中 ...
向丹
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2012 目的研究靶向沉默增殖诱导配体（aproliferation-inducing ligand,APRIL）基因对人胃癌MGC803细胞增殖及细胞周期的影响。方法构建含有APRIL的siRNA序列的慢病毒载体并转染人胃癌MGC803细胞,以非特异性序列nonsilencing siRNA作为对照。通过Real-time PCR（RT-PCR）评价APRIL的沉默效率;MTT法检测沉默A-PRIL基因后,细胞增殖的变化;流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果 RT-PCR测序证实,成功构建APRIL siR ...
蒿姗姗, 李薇, 王畅, 崔久嵬
doaj
Searching for the novel mediators of LPS/TLR4/MyD88 signalling [PDF]
, 2016 TRAF6蛋白在LPS/TLR4介导的MyD88依赖型的信号通路中起核心的作用，目前已有报道TAK1作为TRAF6的下游底物，与TAB1/TAB2/TAB3形成复合物，进而激活NF-kB、MAPK信号通路，促进细胞炎症因子的释放。但是，随后有实验室利用最新基因敲除技术在小鼠或细胞水平敲掉TAK1、TAB1、TAB2，MEKK3等基因后，用LPS刺激诱导MyD88依赖型信号通路，发现对NF-kB和MAPK信号通路均没有影响。因此，在LPS诱导的LPS/TLR4/MyD88信号通路中 ...
李婉芸
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