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目的探讨吉林省先天性耳聋散发病例GJB2基因的突变状况。方法抽取静脉血,应用酚-氯仿抽提法进行基因组DNA的提取,GJB2基因的PCR扩增,琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物是否有异常带型。结果扩增的PCR产物经琼脂糖凝胶电泳表明均获得了约为724 bp的特异扩增条带,41例NSHI患者中GJB2基因的PCR扩增产物无呈异常带型者。结论吉林省内先天性耳聋散发病例中GJB2基因的突变频率较低,可能低于国内其他地区。
金慧 +6 more
doaj
【目的】 探讨小分子药物(N-乙酰半胱氨酸,NAC)对CD4+中央记忆性T细胞(TCM)体外扩增的影响从而改善过继免疫治疗的效果?【方法】 体外分离人类的外周血CD4+ T淋巴细胞,将细胞分为两组(实验组和对照组)进行细胞培养,实验组加入N-乙酰半胱氨酸后,通过流式细胞仪和细胞计数仪对两组细胞中的CD4+ TCM的扩增情况进行检测?【结果】 在CD4+ T细胞体外扩增实验中,10 mmol/L的NAC为促进细胞扩增的最佳浓度;NAC对TCM在CD4+ T细胞中的比例无明显的影响;在CD4 ...
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目的探讨耐链霉素(Sm)结核分支杆菌的编码基因rpsL和rrs的扩增以及突变情况。方法采用PCR扩增技术对23株敏感株,32株耐药株,25例临床结核病人痰标本进行rpsLr、rs基因扩增;并利用寡核苷酸探针反相斑点杂交技术对23株敏感株,32株耐药株,25例临床结核病人痰标本进行rpsLr、rs基因突变检测。结果23株敏感株、32株耐药株rpsLr、rs基因扩增均阳性,阳性率100%;25例临床结核病人痰标本中rpsL基因扩增阳性率为72%,rrs基因扩增阳性率为56%;rpsL基因突变率依次分别为4 ...
潘敏 +7 more
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白纹伊蚊和致倦库蚊Wolbachia 16S rRNA 序列测定与分析
【目的】PCR 法扩增与测定白纹伊蚊和致倦库蚊的细胞内共生菌Wolbachia 16S rRNA 序列, 分析其种系发生关 系及传播方式。【方法】从单只雌蚊中提取DNA , PCR 法扩增16S rRNA 序列, 扩增产物进行克隆及测序。【结果】从白纹伊 蚊和致倦库蚊分别扩增出Wolbachia 16S rRNA 序列, 并克隆入pGEM-T 载体, 测序证明两序列长度分别为897 bp。【结论】 成功克隆了白纹伊蚊和致倦库蚊Wolbachia 16S rRNA 序列。测序和同源性分析表明 ...
葛春喜 +5 more
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【目的】 探讨有效的体外培养扩增CD4+CD25+Treg的方法。【方法】 收集健康志愿者外周血5例,免疫磁珠法分选出CD4+CD25+Treg。将实验分为三组,第一组在CD4+CD25+Treg中加入100 nM rapamycin (1μg/ml)和包被了CD3/CD28单抗的磁珠培养3周,第8 天开始加入1000U/mL的IL-2,第二组培养条件除不加rapamycin外其余与第一组相同,第三组培养细胞为CD4+CD25-T细胞,培养条件同第一组。培养第7、14、21天收集细胞计数 ...
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摘 要 用长片段高保真度PC R扩增系统( expandTM hi gh fid eli ty PCR sys t em)从鼻咽癌( N PC)体外传代 细胞株SUNE中扩增出EB病毒( EBV )潜伏膜蛋白( LM P1 )全基因, 经凝胶电泳分析和DN A斑点杂交进行鉴 定。扩增片段长度为3. 43 kb, 相当于B95- 8细胞EBV基因序列位置为170 033~ 166 608 nt ,包括LM P1基因的 上游启动子/增强子序列、LM P1 编码序列的3个外显子、两个内含子及下游pol ...
陈宜芳 郭辉玉 汪慧民 李满枝
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【目的】采用多重置换扩增建立一种可靠、准确的植入前遗传学诊断方法,应用于X-连锁严重联合免疫缺陷病 (X-SCID)的植入前遗传学诊断(PGD)。【方法】选择5个位于致病基因IL-2受体γ链(IL2RG)基因两侧的短串联重复序列 (STR)位点对X-SCID家系进行单体型分析,采用多重置换扩增(MDA)对单细胞进行全基因组扩增,对扩增产物采用在家 系分析中具有多态性的STR位点进行单体型分析,结合位点Amel进行性别诊断,STR位点均采用单重荧光PCR,同时对 ...
吴海涛 +7 more
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紫色土中存在的岩屑显著影响土壤水分扩散。以往研究主要集中在 > 2 mm岩屑上而忽视了 < 2 mm岩屑的作用。因此,探讨 > 2 mm岩屑对紫色土水分扩散的影响基础上,明确 < 2 mm岩屑的作用对完善含岩屑紫色土水分扩散规律的研究具有重要的意义,从而为土壤水动力学模型的构建提供理论依据。以四川盆地紫色页岩发育的暗棕紫泥土和泥岩发育的红棕紫泥土为研究对象,设置3种岩屑粒径(0.25~2,2~5,5~10 mm)和4种岩屑含量(0,30%,50%,70%),利用水平土柱吸渗法测定含岩屑土壤湿润锋变化特征、
李江文 +4 more
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最优化细胞因子诱导杀伤细胞/自然杀伤细胞 少因子培养体系的探索
【目的】 尝试使用IL-2、IL-7和IL-12的单因子双因子和三因子组合进行杀伤细胞/自然杀伤细胞(CIK/NK)细胞扩增培养,探讨最优化CIK/NK细胞少因子培养体系的建立方法】 采用Ficoll-Hypaque法分离脐血单个核细胞并分成6组,每组分别加入IL-2(80 ng/mL) IL-7(40 ng/mL)及IL-12(40 ng/mL)的单因子双因子和三因子组合(IL-7组;IL-12 组;IL-7+IL-12组;IL-2 + IL-7组;IL-2 + IL-12组;IL-2 + IL-7 +
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目的: 检测细胞培养中支原体的污染, 建立支原体通用的 PCR 方法。方法: 根据已出版的序列设计并合成一对 支原体(柔膜体纲) 16S rRNA 基因组特异引物。对实验室所存的12 种支原体、大肠杆菌、变形杆菌及无支原体污染的组织培养 细胞进行了 PCR 扩增。以 PCR 与分离培养比较检测了 33份细胞培养标本。结果: 12种支原体均出现了约 620 bp左右的特异 性扩增带,敏感性为 100~ 1 000个支原体细胞, 且常见的 6种细胞培养污染支原体的扩增片段均能被 H indⅢ切成 280 与
赖小敏 方国源 李彩霞 王传恩
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