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Expression and Renaturation of a Novel Human Single-chain Fv Antibody Against SARS-CoV
从SARS免疫抗体库获得的一株抗SARS-CoV人源单链抗体H12,亟待鉴定.为了快速制备大量具有生物活性的单链抗体H12,构建了pET28a-H12原核高表达载体,表达量占菌体总蛋白质30%以上.采用稀释复性和分子筛柱复性两种方法对包涵体蛋白进行复性与纯化,结果显示两种方法都能使得单链抗体复性.与稀释复性法相比,柱复性效果更好,其抗原结合活性是稀释复性法的1.51倍.柱复性后的单链抗体亲和力测定的解离常数Kd为73.5nmol/mL ...
王战会 +5 more
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目的探讨自身免疫性肝炎(AIH)与丙型肝炎患者血清中自身抗体的特征,相关性及诊断应用价值。方法间接免疫荧光法,免疫印迹法检测自身免疫性肝炎、丙型肝炎患者血清中出现的ANA、ASMA、AMA及抗SLA/LP、抗LKM-1和抗LC-1等肝脏疾病相关的自身抗体。结果AIH患者自身抗体主要以ANA、ASMA抗体为主,其中抗体合并阳性率占53.3%,而丙型肝炎患者仅占3.6%,此外尚有16.6%和3.3%的AIH患者出现抗SLA/LP和抗LC-1抗体,丙型肝炎患者未检测出。在抗体滴度检测中两种疾病存在极大差异 ...
张利方, 郑山根, 阎有功
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大多数1型糖尿病(Type 1Diabetes,T1DM)被认为是自身免疫性疾病,多种免疫反应导致了体内胰岛素分泌不足,最终引起疾病的发生[1]。新诊断的T1DM患者血清中存在多种针对β细胞的自身抗体,比较重要的有胰岛细胞抗体(ICA)、胰岛素抗体(IAA)、谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)、蛋白质酪氨酸磷酸酶样蛋白抗体(IA-2A及IA-2BA)、锌转运体8抗体(ZnT8A)等[2 ...
解丽然, 张慧慧
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抗体是研究蛋白表达水平与诱导信号相互关系的有力工具,该研究通过构建鼠源天然抗体噬菌体展示文库,用纯化的草鱼IgM从中淘选得到特异识别草鱼IgM的单链抗体,用于草鱼对呼肠孤病毒(GCRV)免疫应答的检测。 鼠源天然抗体噬菌体展示cDNA文库的构建,是从未免疫过的、健康小鼠的骨髓干细胞、外周血淋巴细胞和脾脏细胞中提取和扩增抗体的可变部分基因,与丝状噬菌体M13的P3蛋白基因融合,使抗体以融合蛋白的形式在噬菌体表面展示。由于避免了免疫步骤,收集了骨髓内和骨髓外所有抗体基因,包括自身免疫抗体在内 ...
陈丛琳
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目的探讨肝病患者中抗核仁抗体(ANoAs)出现的特点及其临床意义。方法采用间接免疫荧光法对5506例肝病患者进行抗核抗体(ANA)、抗线粒体抗体(AMA)、抗平滑肌抗体(SMA)等检测,通过镜下ANA的核型筛选出抗核仁抗体。结果 (1)5506例患者中抗核仁抗体阳性患者为264例(4.8%)。其中64.4%为1∶100(170例)、20.1%为1∶320(53例)、15.5%为≥1000(41例)。部分患者伴有其他自身抗体。(2)在264例抗核仁抗体阳性肝病患者中肝炎为155例 ...
马胤雪 +5 more
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目的通过对国产HCV抗体分片段酶联免疫检测试剂与进口第三代抗HCV检测试剂检测丙型肝炎病毒抗体的研究来了解丙肝病毒抗体单片段检测的意义。方法采用国产基因重组表达的丙型肝炎病毒不同区(C、NS3、NS4、NS5)特异性抗原分别包被酶标板,以间接EIA法检测75例丙肝患者血清中不同区特异性抗体,并以Abbott公司第三代抗HCV试剂进行总抗体检测,同时做HCVRNA检测。结果75例血清中HCV不同区抗原片段NS3、HCVC、NS4、NS5的抗体检出率分别为933%(7075)、920%(6975)、707%(
孙雪娟, 王晓宇, 黄淑英
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目的以免疫亲和层析方法纯化重组人促红细胞生成素(rhEPO)并免疫新西兰家兔制备多克隆抗体,用辣根过氧化物酶标记抗体,为进一步建立ELISA检测体系做准备。方法购买rhEPO,用淋巴结内注射法制备多克隆抗体,EPO抗体与葡聚糖凝胶偶联,制成抗体亲和层析柱,以rhEPO作为抗原上样纯化。抗体先盐析粗提纯再过SPA亲和层析柱纯化。用高碘酸钠法制备酶标抗体。结果亲和层析纯化的抗原、抗体纯度较高,蛋白质含量测定分别为0.560、.41 mg/ml;酶结合率为0.578。结论免疫亲和层析法纯化rhEPO ...
曾昭伟, 王学谦
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以草鱼出血病病毒和牛血清白蛋白(BSA)为抗原妆种草鱼,比较了草鱼对两种抗原的体液免疫应答情况。结果显示,在接种了BSA的草鱼中,14d后检测至抗体,其效价在28d达到峰值;而接种了出血病病毒的草鱼,在21d后检测到抗体,抗体效价在35d达到峰值。用FTTC-BSA检测免疫BSA草鱼的抗体产生细胞 ...
罗晓春 +3 more
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将130例狼疮性肾炎(LN)分为两组,组A抗Sm及抗ds-DNA抗体均阳性,组B仅抗ds-DNA抗体阳性。通过对两组年龄、性别、病程、临床症状、血液学及免疫学预后的比较,分析抗Sm抗体在LN的临床意义,结果发现:①抗Sm抗体与疾病活跃程度相关,可作为判断病情、监测治疗的血清学指标;②抗Sm抗体阳性常伴内脏病变发生率高以及皮肤损害严重,易脱发;③抗Sm抗体为标记性抗体 ...
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