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SOCS1-siRNA沉默SOCS1基因表达对脐血树突状细胞生物学活性的影响
目的采用RNA干扰技术抑制脐血树突状细胞(DC)SOCS1基因表达,并检测其对树突状细胞生物学活性的影响,为树突状细胞的临床应用奠定基础。方法针对SOCS1基因,采用化学合成法合成SOCS1siRNA,并转染脐血DC。RT-PCR和Western blot检测转染前后DC的SOCS1基因表达;流式细胞术检测细胞表面CD80、CD86及HLA-DR分子表达情况;ELISA法检测细胞培养上清中IL-12水平。结果与对照组相比,siRNA组SOCS1蛋白质表达水平降低,差异有统计学意义;DC表面CD80 ...
于鸿, 陈阳, 张健, 徐广伟
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目的 研究小鼠骨髓树突状细胞体外诱导分化、成熟及对T细胞增殖的影响 ,为进一步研究树突状细胞的功能及临床肿瘤治疗的应用提供技术方法。方法 应用IL 4、GM CSF培养小鼠骨髓细胞 5~ 7d ,镜下观察细胞形态学变化 ;培养至第 5~ 6d ,加入黑色素瘤 (B16 )冻融抗原继续培养 1~ 2d ,流式细胞仪检测细胞表面分子CD83、CD86 ,并与同种异体T细胞混合培养 72h ,终止培养前 16h加入 3H TdR(0 .5 μCi 孔 ) ,γ 液体闪烁仪测定cpm值。 结果 IL 4、GM ...
陈玉丙 +4 more
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目的探讨96gp负载树突状细胞联合化疗抗耐药卵巢癌的效果。方法使用树突状细胞中的96gp多肽复合物作为抗原来刺激树突细胞从而增加抗原递呈作用,加大对卵巢癌细胞的杀伤力,为临床治疗卵巢恶性肿瘤提供依据。选取一定的人卵巢癌细胞(SKOV3)和耐药卵巢癌细胞(SKOV3/DDP),从中提取gp96多肽复合物,对其进行鉴定,然后使用脐血将树突细胞(DC)诱导后进行培养,待细胞成熟后将其和gp96相结合制成gp96-DC复合物,然后分别将一般DC和载有抗原的DC分别与脐血有核细胞、人外周血T淋巴细胞相结合 ...
杨淑莉 +4 more
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【目的】 观察氯胺酮对树突细胞体外分化和成熟的影响?【方法】 取6 ~ 8周C57BL/6 野生型老鼠(雌雄不限)的骨髓细胞, 在FMS样酪氨酸激酶3(Flt3)配基的作用下诱导分化为树突细胞各种亚型?在培养体系中加入50?100?200 μmol/L的氯胺酮,观察氯胺酮对树突细胞亚型分化比例的影响?同时为了观察氯胺酮对树突细胞成熟的影响, 利用脂多糖刺激树突细胞成熟并检测氯胺酮对树突细胞表面成熟标记分子表达的影响?【结果】 200 μmol/L氯胺酮不明显影响pDc和cDc 的分化比例 ...
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对离体培养的胡萝卜(Daucuscarota)细胞和普通烟草(Nicotianatabacum)细胞的表面进行了扫描电镜观察.观察表明,细胞的自由表面上有很多疣突和纤丝.疣突的大小不同、形状各异,主要含果胶质;有些细胞表面出现小坑,坑中集中有许多微小颗粒.疣突相互可融合成更大的疣突或连成桥;纤丝常与疣突结合.纤丝-纤丝的交织,纤丝-疣突的交联,及疣突-疣突的融合,在细胞壁外表面构成交织的网络.同种细胞之间及异种细胞之间均可通过纤丝、疣突的交织融合而粘连.疣突分布不均一,且与细胞的分散性有关 ...
郭骁才,吴伯骥,蒋辉,郑国錩 +1 more
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目的 探讨脐血树突状细胞 (DC)的体外诱导及其免疫学特征。方法 无菌条件下常规采集脐血 ,采用淋巴细胞分离液分离脐血单个核细胞 ,去除悬浮细胞后获得单核细胞。将获得的单核细胞分为两组 ,组 1:在含白介素 4(IL 4 )和粒细胞巨细胞集落刺激因子 (GM CSF)的DMEM液中培养。组 2 :在上述培养液中孵育 5天后 ,加入肿瘤坏死因子 (TNF α)。收集培养 7天的贴壁细胞 ,分别用流式细胞仪检测CD83、CD86 、CD54、CD1α和CD1 4等免疫因子。结果 ①组 1培养 12 ...
刘崇东, 王玫, 张震宇, 李琳
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携带AFP的rAAV感染树突状细胞对肝癌细胞杀伤作用的实验研究
目的探讨携带甲胎蛋白(AFP)的重组腺相关病毒(rAAV)感染树突状细胞(DCs)对肝癌细胞株SMMC-7721的体外杀伤作用,为肝癌非手术治疗提供方法。方法首先确定AFP基因序列并合成AFP基因,将其转染至重组腺相关病毒rAAV,之后将转染AFP的rAAV感染树突状细胞,并将感染rAAV的DC与SMMC-7721共同培养,同时设未感染rAAV的DC作为对照组,用MTT法检测rAAV-DC及DC对SMMC-7721的杀伤活性。结果感染rAAV的DC对SMMC-7721的杀伤活性为89.00 ...
王斌 +5 more
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目的:探索葛根素对脂多糖(LPS)诱导N9小胶质细胞激活的抑制作用,为其在神经退行性疾病的防治方面提供依据。方法:用MTT法检测脂多糖和葛根素对小胶质细胞的细胞毒性作用;用流式细胞术(FCM)检测葛根素对LPS诱导N9细胞内活性氧(ROS)产生的抑制作用;分别用Griess法和FCM检测细胞培养液和细胞内一氧化氮(NO)含量;用HE染色法观察LPS激活N9细胞,及葛根素恢复细胞静息状态下细胞的形态;以FCM检测细胞凋亡和细胞周期。结果:葛根素(100~200μmol/L)能使LPS激活的N9细胞 ...
陈文娟 +5 more
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用细胞核移植的方法已获得了不同属浅水硬骨鱼类之间的移核杂种鱼,即鲤鱼细胞核和鲫鱼细胞质配合的杂种鱼.这种杂种鱼的形态性状,有的像供体细胞核的鱼,如口须和咽喉齿,有的像受体细胞质的鱼,如脊椎骨的数目,有些则属于中间性状,如侧线鳞片数目.这表明杂种鱼中,细胞核和细胞质对遗传信息的表一都有影响 ...
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TLR7刺激对Balb/c小鼠树突状细胞免疫功能影响的体外研究
树突状细胞是迄今所知的功能最强的抗原提呈细胞,是连接固有免疫和适应性免疫的桥梁。未成熟的DC主要发挥抗原摄取作用,摄取抗原后DC成熟并由非淋巴器官到归巢到淋巴结,活化机体初始性淋巴细胞,介导了细胞免疫和体液免疫 ...
弓莉 +6 more
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