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siRNA下调VEGF基因沉默对人舌癌细胞株Tca8113的生物学作用

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2019
目的利用siRNA干扰技术特异性抑制人舌癌细胞株Tca8113的VEGF基因表达,旨在对口腔舌鳞状细胞癌抗血管生成的基因治疗提供理论依据。方法体外构建两对针对VEGF基因的siRNA重组质粒,利用脂质体转染法导入Tca8113细胞内,MTT法观察转染后的Tca8113细胞的增殖抑制率,流式细胞术检测细胞周期和凋亡率的改变,RT-PCR技术和western Blot法检测VEGF蛋白表达量。结果本研究设计的两个靶位点siRNA能有效抑制Tca8113细胞增殖,流式细胞术结果显示G0/G1期细胞阻滞 ...
崔云峰, 金月, 魏来, 金明光
doaj  

Quantitative analysis of protein-protein interaction in BACTH system using flow cytometry [PDF]

open access: yes, 2016
蛋白-蛋白相互作用是所有生命活动的基础,其研究有助于人们更好地理解蛋白质功能、构建相互作用网络、发现药物靶点、发展疾病诊断和治疗的方法。现有的蛋白-蛋白相互作用研究方法主要分为体外检测和体内检测两种。等温滴定量热法、表面等离子体共振法、荧光偏振法等是常用的体外检测方法,这类方法往往需要使用昂贵的仪器检测以及繁琐的蛋白纯化与标记过程;而酵母双杂交、蛋白质片段重组、合成致死等体内检测方法则只需在细胞和基因水平操作,不仅省去了蛋白质纯化步骤,而且能够真实地反映蛋白质在细胞中的相互作用情况。其中 ...
汪旭
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Inhibitory effect of anti-human NRP-1 monoclonal antibody on hepatocellular carcinoma cell line HepG2 and its mechanism in vitro [PDF]

open access: yes, 2016
目的研究抗人神经纤毛蛋白-1(Neuropilin1,NRP-1)单克隆抗体对肝癌Hep G2细胞的生长抑制作用及其机制。方法小鼠腹水法制备抗NRP-1单克隆抗体(NRP-1 m Ab)并用r Protein A亲和柱纯化抗体,间接ELISA检测抗体的滴度水平。Western blot检测NRP-1 m Ab对Hep G2细胞的特异性,细胞免疫荧光和流式细胞术检测NRP-1蛋白在肝癌细胞株Hep G2上的表达,MTT法检测NRP-1 m Ab对Hep G2的生长抑制作用,Western ...
张蓓蓓   +5 more
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对细胞膜质蛋白共定位染色方法的改良 [PDF]

open access: yes, 2019
[目的]将流式细胞术染色方法进行改良用于T细胞膜质蛋白共定位的共聚焦显微镜检测,在共定位表达于细胞膜上的CD4和细胞质内表达的TIPE2蛋白较常规镜检免疫荧光染色法可提高实验效率。[方法]取小鼠脾脏T细胞,用流式细胞术的染色方法代替实验室常规免疫染色法,对细胞膜上的CD4与细胞质内的TIPE2蛋白进行染色,制片并在激光共聚焦显微镜下观察。[结果]小鼠脾脏CD4+T细胞上出现了TIPE2蛋白的共表达,符合实验预期,同时实验效率从原有10%提高到90%。[结论 ...
兰天舒   +7 more
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CIK治疗前后肿瘤患者外周血CD4+ CD25+调节型T细胞变化研究

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2011
目的探讨细胞因子诱导的杀伤(Cytokine-induced killer cells,CIK)细胞治疗后肿瘤患者的免疫功能改变。方法采用流式细胞术检测28例肿瘤患者经CIK细胞治疗前后外周血CD4+CD25+T细胞比例。结果肿瘤患者CD4+CD25+T细胞比例明显高于对照组 ...
李敏   +11 more
doaj  

The Applications of High Sensitivity Flow Cytometry in the Detection of Bacteria [PDF]

open access: yes, 2015
自然界中存在着许多微纳米尺寸的生物颗粒,比如细菌、病毒、分子组装体和生物大分子等。其中细菌具有体形微小、繁殖迅速、容易变异及环境适应能力强等特点,对人们的日常生活与生产具有诸多影响。一方面经过基因改造的工程菌在生物、医学、医药、工农业生产、环境治理等众多领域发挥着重要的应用。另一方面,各种致病菌的存在严重威胁着人类的生存和健康:不仅影响食品的质量和安全,而且带有耐药性的致病菌往往容易导致疾病治疗的失败。然而,传统的细菌检测方法操作复杂、检测周期长,难以满足实际需求。因此,发展快速、灵敏 ...
黄天逊
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Xaf1诱导XIAP-/-成纤维细胞凋亡机制的研究

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2008
利用XIAP-/-成纤维细胞,检测在剔除XIAP的情况下Xaf1诱导细胞凋亡的作用,探索Xaf1诱导细胞凋亡的机制?【方法】 Xaf1诱导的XIAP-/-成纤维细胞凋亡由流式细胞DNA含量来表示,免疫荧光显微镜检测XIAP-/-成纤维细胞中Xaf1的亚细胞分布,共转染并细胞周期 DNA 含量流式细胞术检测Bcl2对Xaf1诱导的细胞凋亡的影响,细胞色素C流式细胞术检测Xaf1对细胞色素C释放的调节?【结果】 Xaf1与TNFα显著协同诱导XIAP-/-成纤维细胞凋亡,凋亡峰值27 ...
doaj  

沉默细胞周期检测点激酶l基因对人膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2017
目的探讨沉默细胞周期检测点激酶l(Chk1)基因对人膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响。方法培养人膀胱癌T24细胞,根据转染物的不同,将细胞分为siRNA-Chk1组、siRNA-对照序列组和空白对照组,利用实时荧光定量PCR检测各组细胞中Chk1基因表达,MTT法检测各组细胞增殖能力,利用流式细胞术检测各组细胞凋亡,利用流式细胞术检测各组细胞周期,利用Western blot法检测各组细胞中Chk1、Cdc25C和Cyclin B1蛋白表达。结果与空白对照组和siRNA-对照序列组比较,siRNA ...
姜明哲, 李国忠
doaj  

Epithelial-mesenchymal Transition in Renal Cell Carcinoma: The Role of Hepatocyte Nuclear Factor 4α [PDF]

open access: yes, 2013
【背景及目的】 肾癌(renalcellcarcinoma,RCC)是起源于肾小管上皮细胞的恶性肿瘤,占肾脏恶性肿瘤的80%~90%,近年来发病率呈上升趋势。除传统手术治疗外,缺乏其它的有效治疗方法。上皮间质转化(epithelial-mesenchymaltransition,EMT)是上皮细胞在细胞结构、形态、功能等方面获得间质细胞特性的过程,在肿瘤的发生、浸润、转移过程中具有重要作用,核心为上皮标志物E-cadherin表达降低和间质标志物表达增高。肝细胞核因子4α ...
谭伟
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Reprogramming of global histone methylation controls the differentiation of monocytes into macrophages [PDF]

open access: yes, 2016
单核-巨噬细胞系统由一类具有吞噬功能的免疫细胞组成,包括单核细胞、巨噬细胞及树突状细胞,是机体免疫系统重要的组成之一。来源于造血干细胞的单核细胞在趋化因子激活下,分化为巨噬细胞和树突状细胞,参与机体防卫。目前有关单核-巨噬细胞分化的细胞学过程已基本阐释,然而分化进程中关键分子及其调控网络仍需要深入阐明。此外,单核细胞如果过度增生,会导致正常造血功能衰竭。白血病的发生也与单核-巨噬细胞系统的异常发展有关。因此,深入探索和阐明单核/巨噬细胞形成过程中关键转录因子及其调控网络 ...
王慧敏
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