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目的探讨兔骨髓间充质干细胞分离、培养和鉴定的方法。方法全骨髓贴壁法提取兔骨髓中的间充质干细胞,流式细胞术检测细胞表面分子CD14、CD29、CD34、CD44、CD45和CD90等标志的表达以及不同代次兔BM-SCsDNA含量。通过定向分化检测兔BMSCs的多向分化潜能。结果兔骨髓间充质干细胞呈形态较为均一的小梭形、克隆样生长。流式细胞术检测结果显示,传代至第12代和20代的兔骨髓间充质干细胞检测对数生长期细胞的DNA含量结果显示细胞为正常二倍体细胞,无明显变异。细胞表面表达CD29(61.71 ...
刘伟, 陈剑, 宋佳, 宋滇文
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Effect of Notch-1 gene uprugulation on AKT-m TOR signal of U251 cell [PDF]
目的:观察上调Notch-1基因对人胶质瘤U251细胞生学物行为及AKT-m TOR信号通路的影响。方法:采用p NL-NICD慢病毒感染U251细胞,以RT-PCR和Western-Blot检测Notch-1基因mRNA和蛋白的表达,以MTT检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期变化,Transwell实验检测细胞侵袭能力,同时检测Notch-1上调对AKT、m TOR、P70S6K、4Ebp-1蛋白的影响。结果:与对照组比较,NICD慢病毒转染72h后,Notch-1基因mRNA和蛋白表达明显增高(
戴明明, 林勤, 楚可新, 赵能江
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【目的】探讨细胞分化剂(CDA-Ⅱ)在三氧化二砷(As2O3)诱导肝癌细胞凋亡效应中的作用。【方法】应用CDA- Ⅱ 和As2O3 共同处理肝癌细胞株BEL-7402、HepG2 , 通过四唑蓝比色法检测细胞存活率;用活细胞荧光染色观测细胞凋亡及 形态学变化、流式细胞术分析细胞周期变化及凋亡率。【结果】CDA-Ⅱ 毒性作用很低, 但可以显著增强As2O3 对肝癌细胞生 长的抑制作用, 1.0 g/ L CDA-Ⅱ 便可使As2O3 对两株细胞的半数抑制浓度由5.0 μmol/ L 降低至1.0 ...
刘建伟, 唐 毅, 区庆嘉
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The relationship between Kv1.3 Potassium Ion Channels and Human Osteosarcoma MG63 cells [PDF]
目的:观察和研究电压门控钾离子通道Kv1.3特异性阻滞剂rMargatoxin(MgTX)和海葵毒素(Stichodactylahelianthustoxin,SHK)对人骨肉瘤MG63细胞增殖、凋亡、细胞分裂周期、细胞迁移和侵袭能力的影响,并初步探讨其分子作用机制。 方法:体外细胞培养法培养人骨肉瘤MG63细胞株,分别用特异性Kv1.3钾离子通道阻滞剂rMargatoxin和海葵毒素(SHK)阻滞骨肉瘤MG63细胞的Kv1.3钾离子通道 ...
高泉
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The Inhibitory Effects of Extracts of Corbicula fluminea and Crocodylus siamensis bile on Heptacarcinoma SMMC-7721 [PDF]
肝癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,对于肝癌的治疗,目前仍以手术切除为首选方法,但术后复发率高,且绝大多数患者在确诊时已属临床中晚期,从而不具备手术治疗的条件。因此,寻找其他非手术方法治疗肝癌就显得十分必要。药物治疗作为一种可单独使用也可参与综合治疗的方法在肝癌的治疗中占有重要地位。研究和发现新的、高效、低毒副作用的肝癌治疗药物是当务之急。 本论文以体外培养的人肝癌细胞SMMC-7721为药物筛选模型,采取甲醇抽提、有机溶剂萃取等方法得到河蚬乙酸乙酯萃取物(CFE),经高效液相色谱进一步分离,最终得到Cf1、
邱乒乒
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RNA干扰pygo2基因对人脑胶质母细胞瘤U251生物学行为及wnt通路的影响
目的研究pygo2在胶质瘤细胞系U251中的表达、功能及作用机制。方法利用反义pygo2转染U251,下调pygo2的表达,应用流式细胞术和MTT法,评价细胞生长、增殖、凋亡及周期变化;细胞克隆形成试验和transwell侵袭试验分析细胞的克隆形成能力和侵袭能力,采用Western印迹法检测通路蛋白的表达变化。结果转染反义pygo2后,pygo2表达降低,MTT结果显示转染反义pygo2后细胞生长受到抑制且凋亡细胞增加;流式细胞术提示G1期到S期阻滞,细胞克隆形成能力下降,侵袭能力均受到抑制 ...
傅建华 +4 more
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Epithelial-mesenchymal Transition in Renal Cell Carcinoma: The Role of Hepatocyte Nuclear Factor 4α [PDF]
【背景及目的】 肾癌(renalcellcarcinoma,RCC)是起源于肾小管上皮细胞的恶性肿瘤,占肾脏恶性肿瘤的80%~90%,近年来发病率呈上升趋势。除传统手术治疗外,缺乏其它的有效治疗方法。上皮间质转化(epithelial-mesenchymaltransition,EMT)是上皮细胞在细胞结构、形态、功能等方面获得间质细胞特性的过程,在肿瘤的发生、浸润、转移过程中具有重要作用,核心为上皮标志物E-cadherin表达降低和间质标志物表达增高。肝细胞核因子4α ...
谭伟
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稳定过表达外源p62/SQSTM1基因的U937白血病细胞株的建立及初步特性分析
摘 要: 【目的】 构建稳定过表达外源p62/SQSTM1基因的人急性单核细胞白血病U937细胞株,并初步分析过表达p62基因对U937细胞的影响?【方法】 首先在空载体MSCV-IRES-GFP(MIG)基础上构建重组质粒MSCV-p62-IRES-GFP(MPIG),分别用MIG及MPIG载体进行病毒包装,并感染U937细胞,用流式细胞分选仪分选出绿色荧光细胞,获得U937-GFP和U937-p62稳定细胞株,利用流式细胞仪及Western blot分别检测GFP细胞的阳性率及p62蛋白表达水平 ...
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Effects of Jiangu Granules on the proliferation of osteoblasts through G_1/S phase cell-cycle regulated proteins [PDF]
目的观察健骨颗粒对成骨细胞G_1/S期调控的影响,探讨健骨颗粒促进成骨细胞增殖的作用机制。方法制备健骨颗粒血清组、模型血清组和雌二醇血清组。采用酶消化法培养SD大鼠成骨细胞,健骨颗粒含药血清干预,以模型血清和雌二醇血清为对照。运用流式细胞术检测成骨细胞增殖周期,荧光定量PCR法检测成骨细胞G_1/S期调控蛋白Cyclin E、CDK2、p21和转录因子E2F-1 m RNA的表达。结果 15%的雌二醇血清与健骨颗粒血清干预48 h,成骨细胞增殖速度均明显快于模型血清组 ...
吴银生 +6 more
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RNAi-chk1在抑制小鼠Lewis肺癌细胞生长作用的实验研究
目的观察chk1-RNAi联合放疗对Lewis肺癌细胞的抑制及凋亡情况。方法以脂质体Lipofectimine-2000介导,将chk1-536的siRNA表达载体转染小鼠Lewis肺癌细胞株,将其分为空白对照组、错义序列组、siRNA组,2Gy照射组、2Gy照射+错义序列组、2Gy照射+siRNA组。应用MTT法检测转染细胞抑制率、流式细胞术分析转染siRNA后细胞的凋亡,并应用RT-PCR检测转染细胞chk1-mRNA表达水平。结果 chk1-siRNA转染联合辐射组的Lewis肺癌细胞 ...
侯吉光 +4 more
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