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【目的】探讨细胞分化剂(CDA-Ⅱ)在三氧化二砷(As2O3)诱导肝癌细胞凋亡效应中的作用。【方法】应用CDA- Ⅱ 和As2O3 共同处理肝癌细胞株BEL-7402、HepG2 , 通过四唑蓝比色法检测细胞存活率;用活细胞荧光染色观测细胞凋亡及 形态学变化、流式细胞术分析细胞周期变化及凋亡率。【结果】CDA-Ⅱ 毒性作用很低, 但可以显著增强As2O3 对肝癌细胞生 长的抑制作用, 1.0 g/ L CDA-Ⅱ 便可使As2O3 对两株细胞的半数抑制浓度由5.0 μmol/ L 降低至1.0 ...
刘建伟, 唐 毅, 区庆嘉
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The Inhibitory Effects of Extracts of Corbicula fluminea and Crocodylus siamensis bile on Heptacarcinoma SMMC-7721 [PDF]
肝癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,对于肝癌的治疗,目前仍以手术切除为首选方法,但术后复发率高,且绝大多数患者在确诊时已属临床中晚期,从而不具备手术治疗的条件。因此,寻找其他非手术方法治疗肝癌就显得十分必要。药物治疗作为一种可单独使用也可参与综合治疗的方法在肝癌的治疗中占有重要地位。研究和发现新的、高效、低毒副作用的肝癌治疗药物是当务之急。 本论文以体外培养的人肝癌细胞SMMC-7721为药物筛选模型,采取甲醇抽提、有机溶剂萃取等方法得到河蚬乙酸乙酯萃取物(CFE),经高效液相色谱进一步分离,最终得到Cf1、
邱乒乒
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稳定过表达外源p62/SQSTM1基因的U937白血病细胞株的建立及初步特性分析
摘 要: 【目的】 构建稳定过表达外源p62/SQSTM1基因的人急性单核细胞白血病U937细胞株,并初步分析过表达p62基因对U937细胞的影响?【方法】 首先在空载体MSCV-IRES-GFP(MIG)基础上构建重组质粒MSCV-p62-IRES-GFP(MPIG),分别用MIG及MPIG载体进行病毒包装,并感染U937细胞,用流式细胞分选仪分选出绿色荧光细胞,获得U937-GFP和U937-p62稳定细胞株,利用流式细胞仪及Western blot分别检测GFP细胞的阳性率及p62蛋白表达水平 ...
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RNA干扰pygo2基因对人脑胶质母细胞瘤U251生物学行为及wnt通路的影响
目的研究pygo2在胶质瘤细胞系U251中的表达、功能及作用机制。方法利用反义pygo2转染U251,下调pygo2的表达,应用流式细胞术和MTT法,评价细胞生长、增殖、凋亡及周期变化;细胞克隆形成试验和transwell侵袭试验分析细胞的克隆形成能力和侵袭能力,采用Western印迹法检测通路蛋白的表达变化。结果转染反义pygo2后,pygo2表达降低,MTT结果显示转染反义pygo2后细胞生长受到抑制且凋亡细胞增加;流式细胞术提示G1期到S期阻滞,细胞克隆形成能力下降,侵袭能力均受到抑制 ...
傅建华 +4 more
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21世纪是生物制药的黄金时代,以重组蛋白药物和治疗性抗体为代表的蛋白质药物已成为生物技术药物的重要组成部分,其对恶性肿瘤、自身免疫性疾病、病毒感染等重大疾病的治疗效果和生物安全性远高于小分子化学药物。但是蛋白质稳定性差,在生产、纯化、运输和储存等过程中,容易因环境刺激或自身稳定性等因素产生团聚,从而导致药效降低,并可能引发免疫反应。发展灵敏度高、分辨率好、简便实用的蛋白质团聚检测技术和方法,对蛋白质药物的研发和改良可起到积极的推动作用。本文针对蛋白质团聚的检测技术和方法进行综述,从检测原理 ...
颜晓梅, 高恺旻
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Study of P-TEFb reconstitution [PDF]
P-TEFb在基因转录调控中具有重要地位。因此围绕P-TEFb的研究是基因转录调控研究中的重点问题。为了适应转录本身的复杂性,P-TEFb的活性调控以及其募集的方式也非常精致复杂。本文详细揭示了具有调控转录活性的,活化态P-TEFb的形成过程,即P-TEFb的重活化。 之前我们发现激酶活性受到限制的P-TEFb存在于核浆中的7SKsnRNP复合物中。在细胞受到外界刺激(如HMBA)时可以从7SKsnRNP中解离而最终产生活化态的P-TEFb。这个过程伴随着CDK9-T186位的去磷酸化 ...
李游
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RNAi-chk1在抑制小鼠Lewis肺癌细胞生长作用的实验研究
目的观察chk1-RNAi联合放疗对Lewis肺癌细胞的抑制及凋亡情况。方法以脂质体Lipofectimine-2000介导,将chk1-536的siRNA表达载体转染小鼠Lewis肺癌细胞株,将其分为空白对照组、错义序列组、siRNA组,2Gy照射组、2Gy照射+错义序列组、2Gy照射+siRNA组。应用MTT法检测转染细胞抑制率、流式细胞术分析转染siRNA后细胞的凋亡,并应用RT-PCR检测转染细胞chk1-mRNA表达水平。结果 chk1-siRNA转染联合辐射组的Lewis肺癌细胞 ...
侯吉光 +4 more
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目的探讨肾细胞癌患者手术治疗前后外周血T淋巴细胞亚群的变化特征,为了解病情、判断预后提供免疫学依据。方法应用三色荧光素标记CD4、CD8、CD3的单克隆抗体,对外周血淋巴细胞进行标记后,应用流式细胞仪进行检测分析。结果肾细胞癌患者CD3+、CD4+T细胞明显低于正常对照组,CD8+T细胞明显高于正常对照组,CD4/CD8比值倒置;肾细胞癌患者手术后CD3+、CD4+T细胞较术前明显升高,CD4/CD8比值恢复正常。结论肾细胞癌患者T淋巴细胞百分率异常,存在细胞免疫功能紊乱现象;手术后有效去除瘤负荷 ...
叶兴龙, 宋玉国
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Effects of Jiangu Granules on the proliferation of osteoblasts through G_1/S phase cell-cycle regulated proteins [PDF]
目的观察健骨颗粒对成骨细胞G_1/S期调控的影响,探讨健骨颗粒促进成骨细胞增殖的作用机制。方法制备健骨颗粒血清组、模型血清组和雌二醇血清组。采用酶消化法培养SD大鼠成骨细胞,健骨颗粒含药血清干预,以模型血清和雌二醇血清为对照。运用流式细胞术检测成骨细胞增殖周期,荧光定量PCR法检测成骨细胞G_1/S期调控蛋白Cyclin E、CDK2、p21和转录因子E2F-1 m RNA的表达。结果 15%的雌二醇血清与健骨颗粒血清干预48 h,成骨细胞增殖速度均明显快于模型血清组 ...
吴银生 +6 more
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新型伊立替康衍生物ZBH-1208的体外抗肿瘤活性及机制研究
目的研究新型伊立替康衍生物ZBH-1208体外对肿瘤细胞的生长抑制作用并初步探讨其作用机制。方法采用四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法检测分析ZBH-1208对人宫颈癌HeLa细胞、人非小细胞肺癌A549细胞、人小细胞肺癌NCI-H446细胞、人乳腺癌MCF-7细胞、人结肠癌SW1116细胞、人胃腺癌SGC-7901细胞、人肝癌SMMC-7721细胞及人胚肾293细胞的生长抑制作用,计算IC50值;流式细胞术检测ZBH-1208对肿瘤细胞周期及活化Caspase-3表达的影响。结果 ZBH ...
赵静 +8 more
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