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两种不同AFP启动子控制下表达HIV vpr基因的重组非复制型腺病毒获得及鉴定
目的 构建及包装由全长 5 1kbAFP启动子和低氧反应元件 (HRE)与 0 3kbAFP启动子两者组合的杂合0 3kbAFP启动子控制下表达HIVvpr基因的两种重组非复制型腺病毒。方法 采用细菌内同源重组腺病毒载体制备方法和PacI酶切、PCR、SouthernBlot鉴定方法。结果 构建及包装出由这两种AFP启动子控制下表达HIVvpr基因的重组非复制型腺病毒 ,经PacI酶切、PCR和SouthernBlot基因整合分析证明构建成功。结论 我们成功构建了的全长5 ...
魏强 +4 more
doaj
一株新的重组蛙病毒A67R-RGV的构建及基因67R的初步功能鉴定
沼泽绿牛蛙病毒(Rana grylio virus, RGV)属于虹彩病毒科(Iridoviridae),蛙病毒属(Ranavirus),其基因组中含编码尿嘧啶脱氧核糖核苷三磷酸酶(dUTPase)的基因67R。通过构建缺失67R的重组病毒A67R-RGV,探讨67R在RGV复制和感染过程中的功能。首先构建携带有作为标记的绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescence protein, EGFP)基因的质粒(pGL3-67RL-p50-EGFP-67RR ...
裴超, 张奇亚, 黄星, 何利波
core
孢子丝菌病是由双相型真菌孢子丝菌复合体引起的皮肤黏膜、皮下组织及局部淋巴系统的慢性感染性疾病,可播散至全身引起多系统损害,是一种全球性的人畜共患真菌病,临床表现以固定型和淋巴管型为主。病原真菌孢子丝菌复合体包含多种孢子丝菌,它们在微观形态学、遗传学、流行病学、耐药性和致病性等方面存在差异。孢子丝菌复合体的致病性与其本身的黑素、粘附因子及几丁质等毒力因素有关。课题组参与了孢子丝菌复合体的全基因组和转录组的测序分析工作和对孢子丝菌毒力因素研究,为孢子丝菌病的发病机制研究提供了基础。
黄怀球
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目的研究肾脏移植术后病人BK病毒复制情况,并初步探讨其检测方法。方法肾脏移植术后95例患者尿沉渣细胞形态学检测,并通过定量PCR检测尿液和血浆中病毒核酸载量,确定是否存在BK病毒复制。结果尿沉渣形态学检测有35例发现可疑decoy细胞,14例患者的尿液病毒核酸检测呈阳性,核酸载量在4×1032×109/ml之间,5例患者的血浆中病毒核酸呈阳性,核酸载量为2×104/ml4.8×106/ml。结论形态学和血浆、尿液中病毒核酸检测,可以为临床诊断、治疗监测和预防肾脏间质性肾病提供重要的依据。
刘湘帆 +4 more
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RNA干扰(RNAi)是个古老而保守的机制,其作用如同“基因组的免疫系统”,广泛存在于真核生物真菌、植物、动物中,是天然的抵御病毒侵袭的系统.植物病毒在和植物长期而复杂的协同进化中,为了生存繁殖,提高自身复制、运动、感染寄主的能力,也演化出了对付宿主沉默反应的机制,即反干扰机制.目前的研究表明,病毒编码沉默抑制子是反干扰机制的最主要方式.本文主要就病毒编码的沉默抑制子作用特点和功能进行了概述.并介绍了缺损干扰RNA及卫星RNA的特殊复杂二级结构、快速复制与运动躲避沉默信号等反干扰机制 ...
乔定君, 黄维藻, 马欣荣
core
目的分析Pre-S1蛋白与HBeAg及HBV-DNA的相关性,探讨Pre-S1蛋白在诊断乙型肝炎病毒复制中的价值。方法收集我院住院慢性乙型肝炎患者血清97例,检测其Pre-S1蛋白、HBV标志物与HBV-DNA定量。结果HBsAg、HBeAg、抗-HBc阳性者28例,HBV-DNA与Pre-S1蛋白的检出率均高达90.0%以上。HBsAg、抗-HBe和抗-HBc阳性者61例,HBV-DNA与Pre-S1蛋白的检出率分别为82.0%和70.5%;HBsAg和抗-HBc阳性者8例,HBV-DNA与Pre ...
夏凌志, 蔡长争, 苏进
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Replication Characterization of Grass Carp Reovirus(GCRV) and Expression of its RNA Polymerase
该研究首先对1999年从湖南长沙新分离到的一株致病性强的草鱼呼肠孤病毒991毒株(命名为GCRV<,991>)进行了体外复制与生物学特性研究.在对GCRV生物学特性认识的基础上,该研究进行了该病毒复制相关基因第1、2 ...
方勤
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目的原核表达SARS冠状病毒非结构蛋白RNA多聚酶表位区,了解其在SARS病毒感染诊断及作为病毒复制指标的意义。方法通过PCR扩增获得RNA多聚酶表位区基因,与原核表达载体Pet32a+连接,转化E.coliBL-21表达获得重组融合蛋白。经切胶透析纯化后,应用ELISA检测SARS患者及动物模型血清标本的IgG抗体。结果获得原核表达的RNA多聚酶表位区。ELISA检测正常人血清均阴性,SARS患者血清阳性率为95%;检测SARS病毒感染实验动物血清阳性率100%,灭活纯化病毒接种恒河猴均为阴性 ...
沈成利 +6 more
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本发明公开了一种大菱鲆弹状病毒毒株及其制备方法和应用,大菱鲆弹状病毒毒株Scophthalmus maximus rahbdovirus,SMRV0207,CCTCC NO:V202006。将患病大菱鲆的肝、肾、心、脾组织取出后,剪碎、加入PBS进行匀浆,再加入双抗,置冰箱冰冻,取出融化后,离心,再将病毒粗提液经过滤后,分别接种到CLC0207细胞中,恒温继续培养。本方法易行,该病毒株在CLC0207细胞中能迅速增殖,增殖效价可达到108TCID50/ml ...
张奇亚, 李正秋, 桂建芳
core
RNA干扰是细胞利用21-23nt双链RNA介导的转录后同源mRNA沉默的现象[1]。由于具有高度特异性和有效性,RNA干扰被广泛用于HIV、HCV、流感病毒等功能性基因的研究中。基于逆转录环节在HBV复制中的重要作用,一些学者已经证实RNA干扰可以通过沉默病毒基因来抑制HBV复制[2,3 ...
李静红 +4 more
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