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【目的】 建立Nestin-GFP转基因小鼠的胚胎干细胞(mESC)系,并观察其示踪ES细胞系的神经分化过程【方法】将E3.5的Nestin-GFP小鼠囊胚接种于小鼠胚胎成纤维细胞上(MEF经γ射线照射失去增殖活性)4 ~ 6 d后将自囊胚长出的内细胞团(ICM)继续培养并传代扩增 ,检测所得细胞Oct-4SSEA-1和AKP等胚胎干细胞特异性标志物的表达及在体内外向三胚层分化的能力;之后,诱导细胞向神经元样细胞及神经胶质样细胞分化,利用免疫荧光检测其标志性抗原【结果】 免疫组化可见Nestin ...
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Effects of different serum-free culture systems on the biological function of hUC-MSCs [PDF]
Objective To evaluate the effects of three different serum-free culture systems on the biological function of human umbilical cord mesenchymal stem cells (hUC-MSC) cultured in vitro.
Lin Huizhu, Li Cuiping, Chen Xiaoyan, Yang Li
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Advances in stem cell therapy for sensory nerve injury [PDF]
Sensory nerves belong to the afferent nerve part of the peripheral nervous system. Their role is to accept the stimuli inside and outside the body and transmit them to the center nerve system to form sensations or reflexes.
CHEN Huidong +3 more
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【目的】评价造血干细胞移植(HSCT)治疗儿童白血病的疗效及合并症。【方法】非血缘相关脐血移植(UDUCBT) 治疗儿童白血病5 例(AM L 4 例, HR-ALL 1 例);同胞外周血造血干细胞移植(allo-PBSCT)治疗CML 及HR-ALL 各1 例;自体外周血造血干细胞移植(auto-PBSCT)治疗AML 2 例。UD-UCBT 中4 例为HLA 5/6 相合, 1 例为全相合。输入的脐 血(UCB)平均有核细胞数(NC)为6.29 ×107/ kg , CFU-GM 为0.17 ×
包 蓉 +6 more
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目的利用人诱导多能干细胞(hiPSCs)定向分化为γ-氨基丁酸能(GABA)神经前体细胞后种植到脱细胞视神经(DON)材料内,以构建出具有突触形成潜能的hiPSC源性抑制性神经网络组织。为研究与治疗修复中枢神经系统损伤提供一种新的组织工程产品。方法采用分步定向诱导和组织工程构建技术相结合的方法。将hiPSCs体外定向诱导为GABA能神经前体细胞(hNPCs)后,种植于DON材料上三维培养,在特定神经元诱导环境下,将其进一步分化为GABA能神经元 ...
彭历芝 +7 more
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【目的】构建前列腺癌患者的噬菌体抗体库,为前列腺癌特异性的人源性抗体Fab片段的筛选及其应用奠定基础。【方法】由前列腺癌患者外周血分离得淋巴细胞,完整提取其总RNA,经RT-PCR及半套式扩增得到免疫球蛋白全部轻链和重链Fd段基因,然后经酶切、纯化、连接等步骤克隆进载体pComb3,并电转化大肠杆菌XL1-Blue,从而构建前列腺癌患者噬菌体抗体库。【结果】成功构建噬菌体抗体Fab片段库,其轻链及重链Fd段与载体DNA的重组率分别为87%、79%,库容为23.2×107,滴度为87×1012mL-1 ...
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目的探索乳鼠视网膜细胞体外诱导骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞的可行性。方法以大鼠BMSCs为研究对象,利用分层共培养的乳鼠视网膜细胞作诱导剂,进行增殖培养、分化诱导;免疫组化法进行细胞性质鉴定。结果加入乳鼠视网膜细胞共培养第7天有神经元样细胞形成,经nestin、NF鉴定为神经元样细胞。结论BMSCs在体外培养条件下,经过新生乳鼠视网膜细胞诱导,可以分化为神经元样细胞。
徐春玲, 苏冠方, 牟大鹏
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碱性成纤维细胞生长因子对大鼠骨髓间质干细胞增殖的影响 [PDF]
【目的】研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对大鼠骨髓基质干细胞(MSC)增殖的影响。【方法】用α-MEM冲洗骨髓腔,收集骨髓细胞悬液,接种在塑料培养瓶中,经体外扩增、纯化,观察其生长特性,用免疫组织化学SABC法检测波形蛋白和纤粘连蛋白的表达,并研究不同浓度bFGF对MSC生长曲线和克隆形成率的影响。【结果】原代培养时形成由基质干细胞组成的细胞集落,细胞集落14d时接近融合,传代后细胞体积变大,约5~7d传代1次;免疫组化显示MSC呈波形蛋白阳性,而纤粘连蛋白阴性。浓度10ng/mL和20ng ...
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目的探讨磷酸化Smad3蛋白在神经元样PC12细胞氧糖剥夺中的表达变化。方法利用鼠神经生长因子(NGF)诱导大鼠嗜铬细胞瘤细胞(PC12)向神经元样细胞转化,应用无糖DMEM培养液联合连二亚硫酸钠(Na2S2O4)构建氧糖剥夺模型(oxygen-glucose deprivation,OGD),体外模拟神经元缺血性损伤。MTT检测神经元样细胞OGD 0,3,6和12h存活率,Western blot检测OGD前后磷酸化Smad3蛋白表达。结果成功建立神经元样PC12细胞的OGD模型;OGD ...
徐仲航 +7 more
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小鼠骨髓干细胞有诱导分化为胰岛素分泌细胞的可能性 [PDF]
【目的】探讨小鼠骨髓干细胞有无被诱导分化为胰岛素分泌细胞的可能性。【方法】培养小鼠骨髓干细胞,采用含GLP-1和nicotinamide的无血清培养液诱导分化,在培养过程中,检测有关基因的表达。【结果】培养的小鼠骨髓干细胞具有与文献报道相似的生物学特性;在诱导分化第7天,有ngn3和pdx-1基因表达;在诱导分化第14天,有nkx2.2、pdx-1和ins2基因表达。【结论】小鼠骨髓干细胞有诱导分化为胰岛素分泌细胞的可能性 ...
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