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目的 为有效地切割端粒酶逆转录酶RNA以使端粒酶活性降低 ,从而使细胞不能维持端粒长度而在有限分裂后进入凋亡 .方法 设计并合成了针对端粒酶逆转录酶RNA的锤头状核酶基因 .将该核酶基因和端粒酶逆转录酶基因分别重组入体外转录质粒 ,经体外转录反应得到核酶RNA和地高辛标记的端粒酶逆转录酶RNA ,将转录产物混合 ,在不同条件下进行体外切割反应后 ,采用地高辛化学分光法检测切割条带 .结果 此核酶对端粒酶逆转录酶组分RNA的切割效率达 6 5% .结论 该核酶具有体外切割端粒酶逆转录酶RNA的活性 ...
屈艺, 刘菽秋, 刘柏林
doaj
【目的】对Hela 细胞端粒酶进行活性重组并探讨其重组特异性。【方法】以RT-PCR 法从纯化的人端粒酶复合 体中扩增人类端粒酶RNA(hTR)基因片段, 将其克隆至含有SP6 启动子的pGEM3f +质粒中, 构建hTR 的体外转录体系以获 得体外合成的hTR。与端粒酶蛋白组分进行活性重组。四膜虫端粒酶RNA 及16S rRNA 作为重组反应对照组, 以探测其重 组特异性。【结果】经RT-PCR 扩增出450 bp 片段;体外转录重组载体经酶切图谱和PCR 扩增鉴定构建成功;体外转录的 ...
周俊宜, 罗超权
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目的探讨胃癌组织端粒酶活性表达与其临床病理特征的关系。方法应用端粒酶重复序列扩增(telom-eric repeat amplification protocol,TRAP)银染TRAP-ELISA方法检测25例胃癌组织(实验组)和25例胃不典型增生组织(对照组1)及正常胃组织(对照组Ⅱ)中端粒酶活性的表达,并胃癌组织与临床病理分期、病理分级及预后关系进行分析。结果实验组中端粒酶活性表达率为91.1%,对照组Ⅰ端粒酶活性表达率为20%,对照组Ⅱ无表达,实验组端粒酶活性高于两对照组 ...
刘国辉 +3 more
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【目的】探讨端粒酶作为脑膜瘤标志物, 在肿瘤良恶性鉴别、恶性程度评估以及预后预测等方面的意义。【方法】 利用TRAP-ELISA 方法定量检测61 例(份)肿瘤标本端粒酶的活性(以ΔA =A 450-A690表示), 结合肿瘤的分类和患者的临 床资料, 分析端粒酶活性作为肿瘤良恶性及判断预后的标记物的可行性。另取正常脑组织标本20 例作为对照。【结果】30 例脑膜瘤中, 29 例脑膜瘤均未测到端粒酶活性;1 例端粒酶阳性(阳性率3.3%), ΔA =0.237 ;全组ΔA 平均值=0.049 ...
谭平国, 丁之明
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目的通过检测胃癌组织中端粒酶活性,探讨端粒酶与胃癌的临床病理关系。方法选取2012年10月至2013年11月来我院治疗的60例胃癌患者为研究对象,采用PCR-TRAP方法检测胃癌组织及癌旁组织中端粒酶活性。结果胃癌组织中的端粒酶表达阳性率显著高于癌旁组织(P0.05),低分化胃癌组织端粒酶活性阳性率明显高于高度分化和中度分化胃癌组织 ...
罗启翅, 左素清, 张薇珊
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目的 为有效地切割端粒酶逆转录酶mRNA以降低端粒酶活性 ,从而使肿瘤细胞生长变慢 ,凋亡增加 .方法 设计并合成了 2个针对端粒酶逆转录酶mRNA的锤头状核酶基因htertRZ及htert 5’RZ ,构建了核酶基因的体外转录和真核表达质粒 ;并将核酶转染致肿瘤细胞中 ,检测其对肿瘤细胞端粒酶活性和生物学性状的影响 .结果 2种核酶在细胞内均能明显地抑制端粒酶活性 ;核酶htertRZ稳定转染细胞后 ,使细胞生长变慢 ,倍增时间延长 ,但无明显促细胞凋亡作用 .结论 ...
屈艺, 刘菽秋, 彭文珍, 刘柏林
doaj
近年来端粒、端粒酶与肿瘤间的关系越来越引起学者们的注意。 本文复习了目前有关端粒、端粒酶的研究进 展,综述了端粒、端粒酶在肿瘤,尤其是在口腔颌面部肿瘤中的作用;同时对其研究前景和存在问题进行探讨 。
王安训 黄洪章
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目的探讨膀胱癌的端粒酶活性表达及其在膀胱癌中的诊断价值。方法采用端粒重复序列扩增程序──酶标法(定量)和银染法(定性)对28例膀胱瘤、11例癌旁膀胱、6例正常膀胱的组织标本进行端粒酶活性检测。结果膀胱癌组织的端粒酶活性阳性检出率为89.3%(25/28),癌旁膀胱组织为27.3%(3/11),正常膀胱组织为0%(0/6)。膀胱癌组与癌旁组、正常组端粒酶阳性检出率经比较,有显著性差异(P<0.01)。端粒酶活性表达与膀胱癌病理分期、分级等无相关性(P>0.05)。结论端粒酶激活发生在肿瘤形成的早期阶段 ...
黄永南 +4 more
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目的探讨乳头溢液脱落细胞端粒酶活性检测在临床诊断中的应用。方法采用TRAP-PCR银染定性法及TRAP-PCR-ELISA定量法对50例溢乳进行脱落细胞端粒酶活性分析。结果50例溢乳脱落细胞端粒酶阳性率高达78%(39/50),随着年龄的增大,端粒酶阳性率呈逐步下降趋势,而同期送检的细胞病理诊断则无1例找到癌细胞。结论溢乳脱落细胞端粒酶阳性检出率明显增高。随着疾病的发展,端粒酶阳性患者易发生恶变的可能性是否大于端粒酶阴性患者需进一步研究。
张行 +6 more
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目的 探讨胸腹水端粒酶活性检测对良、恶性胸腹水鉴别诊断的价值。方法 采用TRAP PCR银染法和TRAP PCR ELISA半定量法对 32例胸腹水端粒酶活性进行检测。结果 恶性胸腹水中端粒酶阳性检出率 40 .0 % ,良性胸腹水端粒酶阳性率 5 .9% ,恶性胸腹水端粒酶活性 (平均OD值 :0 .46 8)明显高于良性胸腹水 (平均OD值 :0 .0 86 )。结论 胸腹水中端粒酶活性测定可作为鉴别诊断恶性胸腹水的辅助手段。
蒋文智, 叶锋, 陈杰, 张行
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