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目的乳腺癌患者经动员后采集外周血干细胞,通过体外培养的方法诱导为成熟树突细胞。方法乳腺癌患者注射G-CSF进行干细胞动员3天,血细胞分离机采集外周血干细胞悬液,用Ficoll分离,收集单个核细胞,RP-MI-1640培养基重悬静置30min,贴壁细胞用含GM-CSF 1 000U/ml、IL-4 500U/ml、10%FBS的RPMI-1640培养基继续培养,第4天2/3量换液,补足GM-CSF、IL-4,并加入TNF-α500U/ml,第7天换液,补足细胞因子。结果培养至第9天,收集培养的1-2 ...
韩光宇 +5 more
doaj
[Progress on three-dimensional cell culture technology and their application]. [PDF]
Lu X +5 more
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[A convenient and time-saving method for primary culture of mature white adipocytes from mice]. [PDF]
Shentu Z, Gong X, Yang H.
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【目的】探讨大鼠牙囊细胞体外培养的方法。【方法】分离出大鼠牙囊组织,分别采用组织块培养法、细胞消化分散法、及改良组织块法进行牙囊细胞原代及传代培养,倒置相差显微镜下进行细胞形态学观察,透射电镜观察细胞超微结构。【结果】培养至第3天,倒置相差显微镜观察发现,采用组织块培养法,见少数细胞从组织块爬出;而细胞消化分散法则可获得数量多的牙囊细胞,但与杂质细胞混杂生长;改良组织块法见量多、相对纯的牙囊细胞。电镜下牙囊细胞无桥粒,胞浆中含有高密度电子颗粒和大量粗面内质网。组织块法 ...
谷海晶, 凌均棨, 杜宇
doaj
【目的】探讨胎鼠肺泡Ⅱ型细胞原代培养及鉴定方法 , 建立肺泡Ⅱ型细胞培养模型 , 为体外研究肺泡Ⅱ型细胞及胎儿肺发育提供实验手段。【方法】采用低浓度胰酶消化 20 d 胎鼠肺组织, 经差速离心和特异性免疫吸附后, 分离、纯化胎鼠肺泡Ⅱ型细胞, 进行原代培养; 根据细胞生长特点、形态特征、细胞表型和肺表面活性特异蛋白 A 的分泌, 用免疫细胞化学染色、透射电镜及酶联免疫吸附法对分离的细胞进行形态学和功能鉴定。【结果】原代培养的肺Ⅱ型细胞 12 h 开始贴壁, 外观呈多边形, 岛状生长。培养的 24~48 ...
王振花, 张建平, 杨冬梓
doaj
目的探讨焦磷酸溴代醇(BrHPP)诱导人外周血单核细胞产生γ9δ2T淋巴细胞的方法,同时与抗γδTCR诱导产生的细胞进行比较,并用IL-2诱导的细胞作为对照,以提供一种新的诱导γ9δ2T淋巴细胞的方法,为γ9δ2T淋巴细胞的研究应用提供有效的细胞。方法分离健康人外周血单核细胞,计数后加到细胞培养瓶培养,每瓶先加入IL-2,1000IU/ml,然后按不同浓度加入BrHPP、抗γδTCR等,至培养第10天用流式细胞仪检测3种方法培养细胞γ9δ2TCR的表达 ...
夏莉 +6 more
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目的观察肝衰竭大鼠血清诱导骨髓间充质干细胞向肝细胞分化的作用,探讨大鼠骨髓间充质干细胞分离培养、体外扩增及其向肝细胞分化的体外培养条件和方法。方法从股骨胫骨分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,体外扩增培养、鉴定,并采用肝衰竭大鼠血清血清诱导培养,分别在诱导培养0、7、14、24、28天时留取细胞,观察细胞形态的变化,并采用免疫细胞化学方法检测肝特异性标记物(AFP、Alb、CK-18)、用PAS进行糖原染色实验,以验证诱导分化结果。结果诱导后5天间充质干细胞表现为肝细胞样,随着诱导培养时间的延长 ...
孙庆国 +3 more
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【目的】探讨原代培养垂体腺瘤的细胞纯化方法及其激素表达与分泌的特点。【方法】采用三种原代培养方法对垂体腺瘤细胞进行培养,方法Ⅰ为目前常用的垂体瘤细胞培养方法,方法Ⅱ结合使用右旋颉氨酸(D-valineDMEMD-valine)培养液,方法Ⅲ采用反复贴壁法结合DMEMD-valine培养液培养。观察其细胞形态变化和生长特征,放射免疫法测定不同培养时间培养液中相应激素的水平。免疫组织化学染色法检测培养细胞生长激素(growthhormone,GH)、泌乳素(prolactin,PRL)的表达。【结果 ...
徐伟光 +5 more
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Renca 条件培养基转化的调节性T细胞 对小鼠同种免疫的影响
【目的】 探讨小鼠肾癌细胞株Renca来源的条件培养基能否诱导CD4+ CD25- T细胞转化为具有免疫抑制效能的CD4+ CD25+ Foxp3+ T细胞65377; 【方法】 培养Renca提取上清获得条件培养基,将条件培养基与普通培养液按不同比例混合培养小鼠CD4+ CD25- T细胞7 d,以流式细胞仪检测CD4+ CD25+ T细胞和Foxp3+ 细胞的比例;再次分选CD4+ CD25+ T细胞检测其抑制细胞增殖的能力,体内过继性输入观察对移植物存活时间65380 ...
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目的培养符合实验要求的系统性红斑狼疮小鼠胸腺上皮细胞。方法剪切、胶原酶消化自发性系统性红斑狼疮小鼠(BXSB小鼠)胸腺,进行原代培养,胰蛋白酶消化法传代培养,光镜、免疫细胞化学染色进行细胞鉴定。结果经剪切、胶原酶消化的BXSB胸腺植块,在体外培养2~3天后,可见上皮样细胞从植块长出,8~15天后胸腺上皮细胞在培养瓶底部长满,细胞间通过胞浆突起连接成网孔结构。当原代培养的细胞长满瓶壁的90%左右时可传代,角蛋白染色阳性细胞纯度达95%以上。结论剪切、胶原酶消化法简便易行 ...
刘波, 毕黎琦
doaj

