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目的探讨DC(dendritic cells)、CIK(cytokine-induced killer cells)联合培养对肺腺癌细胞A549的杀伤活性的影响,并与单独CIK对A549杀伤活性进行比较,为肿瘤生物治疗提供有效方法。方法分别培养DC、CIK细胞,经鉴定后进行联合培养,联合培养3天后,对A549细胞进行杀伤活性实验,检测DC联合CIK及单独CIK对A549的杀伤活性,同时用流式细胞检测DC、CIK联合培养细胞及单独CIK细胞中淋巴细胞亚群的表达。结果 ...
赵鑫 +8 more
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目的 研究小鼠骨髓树突状细胞体外诱导分化、成熟及对T细胞增殖的影响 ,为进一步研究树突状细胞的功能及临床肿瘤治疗的应用提供技术方法。方法 应用IL 4、GM CSF培养小鼠骨髓细胞 5~ 7d ,镜下观察细胞形态学变化 ;培养至第 5~ 6d ,加入黑色素瘤 (B16 )冻融抗原继续培养 1~ 2d ,流式细胞仪检测细胞表面分子CD83、CD86 ,并与同种异体T细胞混合培养 72h ,终止培养前 16h加入 3H TdR(0 .5 μCi 孔 ) ,γ 液体闪烁仪测定cpm值。 结果 IL 4、GM ...
陈玉丙 +4 more
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从细粒棘球蚴病人体内获取生发层和原头节作为培养材料, 采用改良DMEM 培养液和鼠胶原蛋白包被的培养 瓶进行细胞培养, 建立了适合人源细粒棘球蚴细胞体外培养的方法, 并探讨棘球蚴细胞培养的制约因素。首次成功培育出一 株人源细粒棘球蚴细胞系(13G-5), 至1997 年3 月1 日为止该细胞系已培养了140 d, 其间传了21 代。该细胞系主要以成纤 维型细胞为主, 呈贴壁生长;用该细胞系细胞接种于昆明(Km)小鼠腹腔内, 能形成具包囊样结构的类似包囊;接种鼠产生对 囊液抗原的特异性抗体;ELI
陆家海, 李德昌, 程维兴
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目的: 探讨牛视网膜提取物对人 -鼠杂合细胞抗体产生的影响。方法: 在 PRMI 1640 完全培养基( CM)中加入 20 mg/L 牛视网膜提取蛋白,配成牛视网膜培养基( BREM)。用 MTT 测定、细胞克隆技术、夹心 ELISA 方法和染色体分析, 比较人-鼠杂合细胞 G12在两种培养条件下的细胞活力、克隆效率、人 IgM 分泌和人染色体阳性细胞比率之间的差异。结 果: 用 BREM 培养的 G12 细胞活力高于用 CM 培养(P
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[目的] 探讨兔关节软骨细胞的分离、培养方法,观察单层高浓度培养时细胞表型表达情况。l方 法]无菌条件下,从2周龄新西兰白兔的颖颌关节及四肢关节棵突面削取软骨片,采用机械-酶消化法分离软骨 细胞,经台盼蓝拒染计数,将细胞按1X 106个/孔接种于6孔培养板,传代培养,描绘生长曲线。利用相差显微镜及透射电镜观察细胞形态。应用甲苯胺蓝及II型胶原免疫组化对细胞进行鉴定。(结果】每克软骨能获取 l.5xl06个软骨细胞,活性率为95%。培养2-3 d, 细胞贴壁、变形,呈多角形;8d左右,细胞融合成层。透射电
张志光, 郑卫平, 苏凯, 许跃
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【目的】探讨保持胚胎干细胞( ES cells)全能性的体外培养条件。【方法】将 ES-D3 细胞株培养在 SNL 饲养层细 胞和原代小鼠胚胎成纤维细胞饲养层上以及在无饲养层的条件下, 培养基中加入小鼠白血病抑制因子(m LIF)或用 Buffalo Rat Liver( BRL)条件培养基进行培养, 并对培养细胞进行碱性磷酸酶检测和染色体分析。【结果】ES-D3在上述培养体系中能 形成正常形态的克隆,并且经多次传代后碱性磷酸酶检测为阳性,而且核型保持稳定。【结论】说明上述各种培养体系均能保 持 ES ...
邱观婷, 黄 冰, 胡 洁
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间充质干细胞及其培养上清与融冻产物对脐血CD34+ 细胞扩增及分化的作用
【目的】 探讨人骨髓间充质干细胞(MSC)及其培养上清65380;融冻产物对脐血CD34+ 细胞扩增及分化的作用65377;【方法】 分离纯化人骨髓MSC,收集纯化三代的MSC培养上清,采用反复冻融法获得MSC融冻产物,采用免疫磁珠分选系统纯化脐血CD34+ 细胞65377;实验分为4组,分别为含MSC滋养层组65380;MSC上清组65380;MSC融冻产物组及单纯造血生长因子(HGFs)对照组65377;流式细胞仪检测人脐血CD34+ 细胞在这四种培养体系中第6天和第12天有核细胞数及CD34 ...
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目的探索树突细胞的生长状态,建立鉴别树突细胞的简便方法。方法从正常人外周血分离获得单个核细胞,常规培养2 h,取贴壁细胞,用含细胞因子的培养液进行培养,于第1、2、5、7天在光镜下对其进行形态鉴别,然后检测其促淋巴细胞增殖和诱导免疫反应的功能。结果实验中所培养的树突细胞始终处于贴壁状态,未见悬浮生长现象,其形态与理论相符,可在体外促进淋巴细胞增殖,并诱导免疫反应。结论树突细胞体外培养至发育成熟的过程中,树突细胞可能始终处于贴壁生长状态。
刘朋飞 +4 more
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[目的] 分离、纯化新生小鼠真皮间充质干细胞(mdMSCs),在体外培养、鉴定并标记,为MSCs的细胞学治疗开拓实用、简便的纯化方法。[方法] 采用低血清培养基,消化-贴壁-传代法体外培养mdMSCs,并对第3代mdMSCs从形态学、细胞生长曲线、流式细胞仪检测细胞周期和表面标记、细胞纯度等方面进行鉴定。CM-DiI红色荧光蛋白标记所获取的mdMSCs。 [结果] 培养的第3代mdMSCs细胞形态比较均一,主要为多角形、扯布状;生长曲线显示前5天mdMSCs细胞数呈指数递增,倍增时间约为22小时 ...
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