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从细粒棘球蚴病人体内获取生发层和原头节作为培养材料, 采用改良DMEM 培养液和鼠胶原蛋白包被的培养 瓶进行细胞培养, 建立了适合人源细粒棘球蚴细胞体外培养的方法, 并探讨棘球蚴细胞培养的制约因素。首次成功培育出一 株人源细粒棘球蚴细胞系(13G-5), 至1997 年3 月1 日为止该细胞系已培养了140 d, 其间传了21 代。该细胞系主要以成纤 维型细胞为主, 呈贴壁生长;用该细胞系细胞接种于昆明(Km)小鼠腹腔内, 能形成具包囊样结构的类似包囊;接种鼠产生对 囊液抗原的特异性抗体;ELI
陆家海, 李德昌, 程维兴
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目的: 探讨牛视网膜提取物对人 -鼠杂合细胞抗体产生的影响。方法: 在 PRMI 1640 完全培养基( CM)中加入 20 mg/L 牛视网膜提取蛋白,配成牛视网膜培养基( BREM)。用 MTT 测定、细胞克隆技术、夹心 ELISA 方法和染色体分析, 比较人-鼠杂合细胞 G12在两种培养条件下的细胞活力、克隆效率、人 IgM 分泌和人染色体阳性细胞比率之间的差异。结 果: 用 BREM 培养的 G12 细胞活力高于用 CM 培养(P
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腺病毒介导的IL-24基因转移对系膜细胞分泌细胞因子IL-6、TNF-α的影响
目的 探讨腺病毒介导的白细胞介素24(interleukin-24,IL-24)基因转移对系膜细胞分泌细胞因子白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、IL-6、TNF-α的影响。方法 通过逆转录-聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)方法构建IL-24腺病毒载体,并经序列分析证实。腺病毒载体在293细胞中扩增。分组培养系膜细胞:
王晓浪
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【目的】探讨保持胚胎干细胞( ES cells)全能性的体外培养条件。【方法】将 ES-D3 细胞株培养在 SNL 饲养层细 胞和原代小鼠胚胎成纤维细胞饲养层上以及在无饲养层的条件下, 培养基中加入小鼠白血病抑制因子(m LIF)或用 Buffalo Rat Liver( BRL)条件培养基进行培养, 并对培养细胞进行碱性磷酸酶检测和染色体分析。【结果】ES-D3在上述培养体系中能 形成正常形态的克隆,并且经多次传代后碱性磷酸酶检测为阳性,而且核型保持稳定。【结论】说明上述各种培养体系均能保 持 ES ...
邱观婷, 黄 冰, 胡 洁
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[目的] 分离、纯化新生小鼠真皮间充质干细胞(mdMSCs),在体外培养、鉴定并标记,为MSCs的细胞学治疗开拓实用、简便的纯化方法。[方法] 采用低血清培养基,消化-贴壁-传代法体外培养mdMSCs,并对第3代mdMSCs从形态学、细胞生长曲线、流式细胞仪检测细胞周期和表面标记、细胞纯度等方面进行鉴定。CM-DiI红色荧光蛋白标记所获取的mdMSCs。 [结果] 培养的第3代mdMSCs细胞形态比较均一,主要为多角形、扯布状;生长曲线显示前5天mdMSCs细胞数呈指数递增,倍增时间约为22小时 ...
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目的探索树突细胞的生长状态,建立鉴别树突细胞的简便方法。方法从正常人外周血分离获得单个核细胞,常规培养2 h,取贴壁细胞,用含细胞因子的培养液进行培养,于第1、2、5、7天在光镜下对其进行形态鉴别,然后检测其促淋巴细胞增殖和诱导免疫反应的功能。结果实验中所培养的树突细胞始终处于贴壁状态,未见悬浮生长现象,其形态与理论相符,可在体外促进淋巴细胞增殖,并诱导免疫反应。结论树突细胞体外培养至发育成熟的过程中,树突细胞可能始终处于贴壁生长状态。
刘朋飞 +4 more
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目的建立一种分离纯化,培养扩增人骨髓MSCs的方法,并探讨体外诱导骨髓间充质干细胞分化为脂肪细胞。方法密度梯度离心,贴壁培养和消化时间控制相结合,分离纯化人骨髓间充质干细胞,并用马血清诱导分化为脂肪细胞。结果MSCs原代培养呈均匀分布的集落样生长,呈梭形,细胞传代稳定,在体外连续传代培养9代,未发生形态学改变,无衰老征象;传代培养MSCs(P3)在20%马血清的L-DMEM培养液中分化为脂肪细胞。结论骨髓MSCs体外增殖和传代能力强,通过离体培养可使体内环境下低丰度的MSCs实现数量扩增 ...
王莹, 罗速
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目的探讨分离、培养、纯化和鉴定小鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)方法,观察MSCs体外生长特征。方法取小鼠胫骨和股骨,取出骨髓细胞,用1.073g/ml的Percoll分离液梯度离心,培养皿培养、换液除去非贴壁细胞,获得MSCs,通过传代对MSCs进行纯化和扩增培养。进行形态学观察,测定生长曲线,用流式细胞仪检测P3代MSCs细胞周期及表面抗原。结果 新分离的MSCs呈小圆形,形态规整。培养传代后,细胞大小均匀,形态较一致,多为梭形。P1、P2 ...
赵继学, 王广义, 张海玉, 伏鑫
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目的通过小鼠乳腺癌细胞分泌的前列腺素E2(ProstglandinE2,PGE2)与人成纤维细胞生成的肝细胞生长因子(Hepatocytegrowthfactor,HGF)之间关系的研究,进一步了解肿瘤细胞的浸润、转移与基质细胞间的关系。方法采用分子筛与反相高效液相色谱分离出小鼠乳腺癌细胞条件培养基中刺激人成纤维细胞分泌HGF的有效成份,并对其进行鉴定。另外在培养小鼠乳腺癌细胞的同时加入细胞环氧化酶抑制剂消炎痛,收集条件培养液,观察其对人成纤维细胞生成HGF的影响 ...
尹家俊 +4 more
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目的探讨体外诱导人骨髓间充质干细胞(hMSC)向造血细胞分化的可行性及分化条件。方法首先建立hMSC的分离培养扩增体系,制备小鼠胎肝基质细胞条件培养液(FLSC-CM),将hMSC接种在分别含FLSC-CM和IL-6、SCF组合的培养体系中,通过形态学、直接免疫荧光染色检测法、粒-单/巨噬系集落形成细胞培养(CFU-GM)对分化细胞进行鉴定。结果hMSC经FLSC-CM诱导培养9天后,产生较多的悬浮细胞,悬浮细胞瑞士染色后形态类似于单核或小淋巴细胞,表达人CD34和人CD45表面抗原 ...
陈晓 +5 more
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